Réparation d'un modèle de critique des défauts de taille crânienne Utilisation adipeuses cellules stromales prélevés sur des Lipoaspirate
Summary
Ce protocole décrit l'isolement de tissu adipeux dérivé des cellules stromales de lipoaspirate et la création d'une 4 mm de taille critique défaut crânienne pour évaluer la régénération osseuse.
Abstract
Craniofaciale réparation et la régénération osseuse offre la promesse de la formation de novo des tissus grâce à une approche basée sur des cellules en utilisant des cellules souches. Adipeuses cellules stromales (ASC) se sont révélés être une source abondante de cellules souches multipotentes capables de subir ostéogénique, chondrogénique différenciation, adipogénique et myogénique. De nombreuses études ont exploré le potentiel ostéogénique de ces cellules in vivo avec l'utilisation de biomatériaux divers échafaudages pour la livraison cellulaire. Il a été démontré qu'en utilisant une ostéoconducteur, recouverte d'hydroxyapatite poly (acide lactique-co-acide glycolique) (PLGA-HA) échafaudage ensemencé avec CSA, un défaut critique entreprises crânienne, un défaut qui est défini par son incapacité à subir spontanée la guérison au cours de la vie de l'animal, peuvent être effectivement montrer robuste régénération osseuse. Ce modèle de vivo démontrent la base de l'approche translationnelle visant à régénérer le tissu osseux – le cellulairecomposant et la matrice biologique. Cette méthode sert de modèle pour l'application ultime clinique d'une cellule souche vers la réparation d'un défaut spécifique au tissu.
Protocol
Discussion
Depuis l'isolement de tissu adipeux dérivé des cellules stromales de 2 lipoaspirate, ces cellules ont été différenciées en une grande variété de lignées cellulaires. Le tissu adipeux est d'origine mésodermique et, par conséquent, multipotentes dérivées du tissu adipeux cellules stromales sera probablement plus efficace avec une application vers un lignage mésodermique. La capacité à générer du tissu squelettique est particulièrement important compte tenu de la pénurie de sites donn…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Nous tenons à remercier le Dr George communes et le Dr Dean Vistnes pour leur soutien et la collaboration de nos recherches. Ce travail est soutenu par l'Institut national de bourses de recherche dentaire et craniofaciale 1 R21 DE019274-01, RC2 et R01EB009689 DE020771-02, la Fondation Oak et Hagey Laboratoire de médecine régénérative de pédiatrie à MTL Dr Hyun est pris en charge par le Saint Joseph Mercy Hospital GME .
Materials
| Name of the reagent: | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| Lipoaspirate Harvest | |||
| PBS | Gibco | 10010-023 | |
| Hank’s Balanced Salt Solution | Cellgro | 21-023-CV | |
| Collagenase | Sigma | C6885-500MG | |
| Cell Strainer 100 μm | BD Falcon | 352360 | |
| Steri-top 500 ml .22 μm filter | Millipore | SCGPT05RE | |
| Calvarial Defect | |||
| Z500 Brushless MicromotorsUM50C | NSK | NSKZ500 | |
| Circular Knife 4.0 mm | Xemax Surgical | CK40 |
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