Riparazione di un critico di dimensioni modello Difetto cranica Usando derivate da tessuto adiposo cellule stromali raccolte da Lipoaspirate
Summary
Questo protocollo descrive l'isolamento di adiposo cellule stromali di lipoaspirate e la creazione di un millimetro 4 critico imprese difetto cranica per valutare rigenerazione scheletrico.
Abstract
Craniofacciale scheletrica riparazione e rigenerazione offre la promessa di formazione de novo tessuto attraverso una cella approccio che utilizza cellule staminali. Derivate da tessuto adiposo cellule stromali (CSA) hanno dimostrato di essere una fonte abbondante di cellule staminali multipotenti in grado di subire osteogenico, differenziazione condrogenico, adipogenico e miogenico. Molti studi hanno esplorato il potenziale osteogenico di queste cellule in vivo con l'uso di biomateriali impalcature varie consegna cellulare. È stato dimostrato che utilizzando un osteoconduttiva, rivestimento in idrossiapatite poli (lattico-co-glicolico) (HA-PLGA) scaffold seminati con ASC, un difetto critico dimensioni cranica, un difetto che è definita dalla sua incapacità di subire spontanea guarigione sulla durata di vita dell'animale, può essere efficacemente mostrare robusta rigenerazione ossea. Questo modello in vivo dimostra la base di approcci translazionale volta la rigenerazione del tessuto osseo – il cellularecomponente e matrice biologica. Questo metodo serve da modello per l'applicazione clinico finale di una cellula progenitrice verso la riparazione di un difetto specifico tessuto.
Protocol
Discussion
Poiché l'isolamento di adiposo cellule stromali 2 da lipoaspirate, queste cellule sono state differenziate in una varietà di linee cellulari. Il tessuto adiposo è di origine mesodermica e, quindi, cellule stromali multipotenti derivate da tessuto adiposo sarà probabilmente più efficace con l'applicazione nei confronti di un lignaggio mesodermica. La capacità di generare tessuto scheletrico è particolarmente importante data la carenza di siti donatori per un innesto di osso autologo e le limitaz…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Vorremmo ringraziare il Dott. Commons George e il Dr. Dean Vistnes per il loro sostegno e la collaborazione della nostra ricerca. Questo lavoro è supportato dal National Institute of Dental Research e borse di craniofacciale 1 R21 DE019274-01, R01EB009689 e RC2 DE020771-02, la Fondazione di quercia e Hagey Laboratorio di Medicina Rigenerativa di Pediatric MTL Dr. Hyun è supportato dal San Giuseppe Mercy Hospital GME .
Materials
| Name of the reagent: | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| Lipoaspirate Harvest | |||
| PBS | Gibco | 10010-023 | |
| Hank’s Balanced Salt Solution | Cellgro | 21-023-CV | |
| Collagenase | Sigma | C6885-500MG | |
| Cell Strainer 100 μm | BD Falcon | 352360 | |
| Steri-top 500 ml .22 μm filter | Millipore | SCGPT05RE | |
| Calvarial Defect | |||
| Z500 Brushless MicromotorsUM50C | NSK | NSKZ500 | |
| Circular Knife 4.0 mm | Xemax Surgical | CK40 |
References
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