La reparación de un modelo de defecto crítico del tamaño de calota Uso adiposo derivados de las células del estroma cosechadas desde lipoaspirado
Summary
Este protocolo describe el aislamiento de tejido adiposo derivado de células estromales de lipoaspirado y la creación de un 4 mm de tamaño crítico defecto craneal para evaluar la regeneración esquelética.
Abstract
Reparación y regeneración del esqueleto craneofacial ofrece la promesa de la formación de tejido de novo a través de un enfoque basado en células utilizando células madre. Derivadas de tejido adiposo células del estroma (ASCs) han demostrado ser una fuente abundante de células madre multipotentes capaces de experimentar diferenciación osteogénica, condrogénicos, adipogénicos, y miogénica. Muchos estudios han explorado el potencial osteogénico de estas células in vivo con el uso de biomateriales andamios diferentes para la entrega celular. Se ha demostrado que mediante la utilización de un osteoconductivos, con recubrimiento de hidroxiapatita poli (láctico-co-glicólico) (PLGA-HA) andamio se sembró con ASC, un defecto de la bóveda craneal de tamaño crítico, un defecto que se define por su incapacidad de someterse espontánea cicatrización durante la vida del animal, se puede mostrar efectivamente la regeneración ósea robusta. Este modelo de vivo demuestra la base de enfoques translacional destinada a regenerar el tejido óseo – el celularcomponente y la matriz biológica. Este método sirve como un modelo para la aplicación clínica final de una célula progenitora hacia la reparación de un defecto específico de tejido.
Protocol
Discussion
Desde el aislamiento de tejido adiposo derivado de células estromales 2 de lipoaspirado, estas células se han diferenciado en una amplia variedad de linajes celulares. El tejido adiposo es de origen mesodérmico y por lo tanto, multipotentes derivadas de tejido adiposo células estromales será probablemente más eficaz con aplicación hacia un linaje mesodérmico. La capacidad de generar tejido óseo es especialmente importante dada la escasez de zonas donantes para un autoinjerto y las limitaciones inhere…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Nos gustaría dar las gracias al Dr. Commons George y el Dr. Dean Vistnes por su apoyo y colaboración de nuestra investigación. Este trabajo es apoyado por el Instituto Nacional de las subvenciones Investigación Dental y Craneofacial 1 DE019274 R21-01, R01EB009689 y DE020771 RC2-02, la Fundación Oak y Laboratorio de Medicina Pediátrica Hagey Regenerativa con MTL Dr. Hyun es apoyado por el Saint Joseph Mercy Hospital GME .
Materials
| Name of the reagent: | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| Lipoaspirate Harvest | |||
| PBS | Gibco | 10010-023 | |
| Hank’s Balanced Salt Solution | Cellgro | 21-023-CV | |
| Collagenase | Sigma | C6885-500MG | |
| Cell Strainer 100 μm | BD Falcon | 352360 | |
| Steri-top 500 ml .22 μm filter | Millipore | SCGPT05RE | |
| Calvarial Defect | |||
| Z500 Brushless MicromotorsUM50C | NSK | NSKZ500 | |
| Circular Knife 4.0 mm | Xemax Surgical | CK40 |
References
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