Reparação de um modelo de defeito crítico porte calvária Usando derivadas de tecido adiposo células do estroma colhidas lipoaspirado
Summary
Este protocolo descreve o isolamento de derivadas de tecido adiposo a partir de células do estroma lipoaspirado e a criação de um defeito de 4 milímetros de tamanho crítico calvária em avaliar a regeneração óssea.
Abstract
Reparação e regeneração do esqueleto craniofacial oferece a promessa de formação de tecido de novo através de uma abordagem com base em células, utilizando células estaminais. Derivadas de tecido adiposo células do estroma (ASC) têm provado ser uma fonte abundante de células estaminais multipotentes capazes de sofrer diferenciação osteogénica condrogénica, adipogênica e miogénica. Muitos estudos têm explorado o potencial osteogénico destas células in vivo com o uso de biomateriais de andaimes diferentes para entrega celular. Tem sido demonstrado que, utilizando um osteocondutor, hidroxiapatite revestido de poli (ácido láctico-co-glicólico) (PLGA-HA) scaffold semeado com ASCs, um defeito de tamanho crítico calvária, um defeito que é definido pela sua incapacidade de sofrer espontânea cura durante o tempo de vida do animal, podem ser eficazmente mostrar regeneração óssea robusta. Este modelo de vivo demonstra a base de abordagens de translação com vista a regenerar o tecido ósseo – o celularcomponente e matriz biológica. Este método serve como um modelo para a aplicação final clínico de uma célula progenitora para a reparação de um defeito do tecido específico.
Protocol
Discussion
Uma vez que o isolamento do derivado de tecido adiposo a partir de células do estroma 2 lipoaspirado, estas células foram diferenciadas em uma grande variedade de linhagens celulares. O tecido adiposo é de origem mesodérmica e, portanto, multipotentes derivadas de tecido adiposo células estromais serão provavelmente mais eficaz com a aplicação para uma linhagem mesodérmica. A capacidade de gerar tecido ósseo é especialmente crítico dada a escassez de área doadora de um autoenxerto e as limitaçõ…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Gostaríamos de agradecer ao Dr. George Commons e Dr. Dean Vistnes por seu apoio e colaboração da nossa pesquisa. Este trabalho é apoiado pelo Instituto Nacional de Bolsas de pesquisa Dental e Craniofacial um R21 DE019274-01, R01EB009689 e RC2 DE020771-02, da Fundação Oak e Hagey Laboratório de Medicina Regenerativa de Pediatria para MTL Dr. Hyun é apoiado pela Saint Joseph Mercy Hospital GME .
Materials
| Name of the reagent: | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| Lipoaspirate Harvest | |||
| PBS | Gibco | 10010-023 | |
| Hank’s Balanced Salt Solution | Cellgro | 21-023-CV | |
| Collagenase | Sigma | C6885-500MG | |
| Cell Strainer 100 μm | BD Falcon | 352360 | |
| Steri-top 500 ml .22 μm filter | Millipore | SCGPT05RE | |
| Calvarial Defect | |||
| Z500 Brushless MicromotorsUM50C | NSK | NSKZ500 | |
| Circular Knife 4.0 mm | Xemax Surgical | CK40 |
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