脑银行业：使你的研究样本中，大部分
Summary
脑银行和生物材料的系统抽样提供无偏体视学的基础上，并最大限度地从每个试样获得潜在的数据。
Abstract
无偏体视学是一种准确，有效地估算总神经元的数量（或其他类型的细胞）在特定地区的利益的方法<sup> 1</sup>。要实现这一目标6-10探测系统部分应涵盖整个结构。通常情况下，这涉及到处理的1 / 5的部分叶片大量未处理的材料。为了最大限度地利用材料，我们提出了一个便宜的方法保留作为一个长期的存储研究计划的一部分的固定的组织。作为组织切片和处理所需的染色或抗体，替代部分应系统地放置在抗原在-20 ° C保存以备将来处理。利用24孔板，部分可以放置，以便将来检索。使用这种方法，组织可以存储和近两年的过程中的免疫组织化学处理。
Protocol
第1部分：前处理的组织组织应多聚甲醛，戊二醛，或福尔马林灌注。这可以通过标准transcardial，通常用于收获其他器官灌注。在本研究的主题是深刻的盐酸氯胺酮（10毫克/公斤，IM）与戊巴比妥钠（25毫克/公斤，四）过量安乐死，镇静剂和用0.1 M PBS灌注，直到完全exsanguinated transcardially人。其次是在PBS的4％多聚甲醛为5分钟（约1升）的解决方案。 大脑应stereotaxically封锁，从头骨取出?…
Discussion
系统抽样是一种廉价的方法，旨在最大限度地提高研究材料。此取样策略的目的是，遵守的规则，需要整个地区的系统采样的无偏体视。至关重要的是，每个系列的部分路段秩序维持。在我们的实验室中，我们已经成功地使用银行仓鼠和非人类灵长类动物的脑切片这种方法。到目前为止，我们已经收集了接近20000 vervet猴（Chlorocebus aethiops sabeus）的脑切片，进行常规免疫组已存放了一年多的?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
作者想感谢他持续的技术支持Ikiel Ptito。
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Ethylene glycol | Fisher | E178-4 | ||
| Polyvinyl pyrrolidone | Fisher | BP431-500 | ||
| Thermal Scientific Embedding Medium | Fisher |
Riferimenti
- West, M., Slomianka, L., Gundersen, H. Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in the subdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator. Aat Rec. 231, 482-497 (1991).
- Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Dissecting the Non-human Primate Brain in Stereotaxic Space. J Vis Exp. , (2009).
Citazione di questo articolo
Burke, M. W., Zangenehpour, S., Ptito, M. Brain Banking: Making the Most of your Research Specimens. J. Vis. Exp. (29), e1260, doi:10.3791/1260 (2009).