脳バンキング：あなたの研究の標本のほとんどを作る
Summary
脳の銀行と生体物質の系統的サンプリングは、公平な立体学の基礎を提供し、各試料から得られる潜在的なデータを最大限に高めることができます。
Abstract
公平な立体学が正確かつ効率的に関心のある一定の領域で合計ニューロンの数を（または他の細胞型）を推定するための方法です。<sup> 1</sup>。 60から10まで体系的なセクションを、この目標を達成するため、構造全体をカバーするプローブする必要があります。通常、これは未処理材のかなりの量を残す5分の1のセクションの処理を伴います。素材を最大にするために、我々は長期保存の研究計画の一環として、固定した組織を維持するための安価な方法を提案する。組織が必要な汚れや抗体、別のセクションのためにスライスして処理される際には、体系的に将来の処理のために-20℃で保存する抗原に配置する必要があります。 24ウェルプレートを使用して、セクションは、将来の検索のための順序で配置することができます。この方法を使用して、組織が保存され、年間の経過、免疫組織化学のために処理することができます。
Protocol
パート1：組織の前処理組織はよくパラホルムアルデヒド、グルタルアルデヒド、またはホルマリンで灌流してください。これは通常、他の臓器を収穫するために使用される標準transcardial灌流によって達成することができます。本研究では被験者は深く、（10 mg / kgを、IM）塩酸ケタミンで鎮静したペントバルビタールナトリウムの過剰投与（25 mg / kgを、IV）を使用して、安楽死させ、?…
Discussion
系統的サンプリングは、研究材料を最大にするため安価な方法です。このサンプリングの戦略は、地域全体の体系的なサンプリングを必要とする公平な立体学の規則を遵守するように設計されています。それは、シリーズごとのセクションの順序が維持されていることが重要です。私たちのラボでは、正常ハムスターとヒト以外の霊長類の脳の両方のセクションをバンキングのこのメソッド?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
著者は、彼の継続的な技術サポートのためにIkiel Ptitoに感謝します。
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Ethylene glycol | Fisher | E178-4 | ||
| Polyvinyl pyrrolidone | Fisher | BP431-500 | ||
| Thermal Scientific Embedding Medium | Fisher |
Riferimenti
- West, M., Slomianka, L., Gundersen, H. Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in the subdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator. Aat Rec. 231, 482-497 (1991).
- Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Dissecting the Non-human Primate Brain in Stereotaxic Space. J Vis Exp. , (2009).
Citazione di questo articolo
Burke, M. W., Zangenehpour, S., Ptito, M. Brain Banking: Making the Most of your Research Specimens. J. Vis. Exp. (29), e1260, doi:10.3791/1260 (2009).