브레인 은행 : 귀하의 연구 표본의 대부분을 만들기
Summary
브레인 은행 및 생물 학적 물질의 체계적인 샘플링 불편 stereology의 기초를 제공하고 각 표본에서 얻은 잠재적인 데이터를 극대화할 수 있습니다.
Abstract
불편 stereology 정확하고 효율적으로 관심 주어진 영역에서 총 뉴런 번호 (또는 다른 세포 유형) 계산하는 방법입니다<sup> 1</sup>. 이 목표를 달성하기 위해서는 6-10 체계 섹션은 전체 구조를 다루는 탐지해야합니다. 일반적으로이 처리되지 않은 물질의 상당한 양의 나뭇잎 5분의 1 섹션을 처리 포함됩니다. 자료를 극대화하기 위해, 우리는 장기 저장 연구 계획의 일환으로 고정 조직을 보존을위한 저렴한 방법을 제안합니다. 조직이 원하는 얼룩이나 항체, 다른 섹션에 대한 슬라이스 및 처리로가 체계적으로 미래를 처리 -20 ° C에 보존 항원에 배치해야합니다. 24 잘 접시를 사용하여 섹션 향후 검색을 위해 순서로 배열 수 있습니다. 이 방법을 사용하여 조직은 저장하고 년간의 과정을 통해 immunohistochemistry에 대해 처리할 수 있습니다.
Protocol
Discussion
체계적인 샘플링 연구 자료를 극대화하기위한 저렴한 방법입니다. 이 샘플링 전략 지역에 걸쳐 체계적인 샘플링을 필요로 불편 stereology의 규칙을 준수하도록 설계되었습니다. 그것은 각 시리즈에 대한 섹션의 순서를 유지하는 것은 매우 중요합니다. 저희 연구실에서는 성공적으로 햄스터와 비 인간 영장류 두뇌 섹션을 모두 은행에 대해이 방법을 사용했습니다. 지금까지 우리는 가까이에 20,000 v…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자는 자신의 지속적인 기술 지원 Ikiel Ptito 감사하고 싶습니다.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Ethylene glycol | Fisher | E178-4 | ||
| Polyvinyl pyrrolidone | Fisher | BP431-500 | ||
| Thermal Scientific Embedding Medium | Fisher |
Riferimenti
- West, M., Slomianka, L., Gundersen, H. Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in the subdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator. Aat Rec. 231, 482-497 (1991).
- Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Dissecting the Non-human Primate Brain in Stereotaxic Space. J Vis Exp. , (2009).
