Banques de cerveaux: Tirer le meilleur parti de vos spécimens de recherche
Summary
Banques de cerveaux et l'échantillonnage systématique de matériel biologique fournit la base pour stéréologie impartiale et maximise le potentiel des données obtenues de chaque spécimen.
Abstract
Stéréologie impartiale est une méthode précise et efficace pour l'estimation du nombre de neurones totale (ou autre type cellulaire) dans une zone donnée d'intérêt<sup> 1</sup>. Pour atteindre cet objectif de 60 à 10 sections systématiques devraient être sondé couvrant toute la structure. Typiquement, cela implique un traitement cinquième sections qui laisse une quantité importante de matières non traitées. Afin de maximiser le matériel, nous proposons une méthode peu coûteuse pour la préservation des tissus fixés dans le cadre d'un plan de stockage à long terme de recherche. Comme le tissu est découpé et traité pour la teinture ou désiré d'anticorps, les articles de remplacement devrait être systématiquement placés dans des antigènes conserver à -20 ° C pour le traitement futur. En utilisant des plaques 24 puits, les articles peuvent être placés dans l'ordre pour une récupération future. En utilisant cette méthode, les tissus peuvent être stockées et traitées pour l'immunohistochimie au cours de l'année.
Protocol
Discussion
L'échantillonnage systématique est une méthode peu coûteuse destinée à optimiser le matériel de recherche. Cette stratégie d'échantillonnage est conçu pour se conformer aux règles du stéréologie impartiale qui nécessite un échantillonnage systématique de toute la région. Il est essentiel que l'ordre des sections pour chaque série est maintenue. Dans notre laboratoire, nous avons utilisé avec succès cette méthode pour les services bancaires à la fois de hamster et non-humains des coupes …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Les auteurs tiennent à remercier pour son Ikiel Ptito appui technique continu.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Ethylene glycol | Fisher | E178-4 | ||
| Polyvinyl pyrrolidone | Fisher | BP431-500 | ||
| Thermal Scientific Embedding Medium | Fisher |
Riferimenti
- West, M., Slomianka, L., Gundersen, H. Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in the subdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator. Aat Rec. 231, 482-497 (1991).
- Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Dissecting the Non-human Primate Brain in Stereotaxic Space. J Vis Exp. , (2009).
