Brain Banking: Het maken van de meeste van uw onderzoek Specimens
Summary
Brain bank-en systematische bemonstering van biologisch materiaal vormt de basis voor onpartijdige stereology en maximaliseert de mogelijkheden gegevens van elk exemplaar.
Abstract
Onpartijdige stereology is een methode voor het nauwkeurig en efficiënt schatting van het totaal aantal neuron (of een ander celtype) in een bepaald gebied van belang<sup> 1</sup>. Om dit doel te bereiken 60-10 systematische rubrieken moeten gegevens worden gepeild over de gehele structuur. Normaal gesproken is dit gaat om de verwerking van 1 / 5 secties die een aanzienlijke hoeveelheid materiaal onbewerkte bladeren. Om het materiaal te maximaliseren, stellen we een goedkope methode voor het conserveren van vaste weefsels, als onderdeel van een lange-termijn opslag onderzoeksplan. Omdat de weefsel is gesneden en verwerkt voor de gewenste vlek of antilichaam, alternatieve onderdelen moeten systematisch worden geplaatst in antigeen te bewaren bij -20 ° C voor verdere verwerking. Met behulp van 24-well platen, kunnen delen worden geplaatst, zodat de toekomst terug te vinden. Met behulp van deze methode kan weefsel worden opgeslagen en verwerkt voor immunohistochemie in de loop der jaren.
Protocol
Discussion
Systematische steekproef is een goedkope methode bedoeld om onderzoeksmateriaal te maximaliseren. Deze bemonstering strategie is ontworpen om te voldoen aan de regels van onpartijdige stereology dat systematische bemonstering in de hele regio nodig heeft. Het is cruciaal dat de volgorde van de secties voor elke serie wordt gehandhaafd. In ons laboratorium hebben we met succes gebruik gemaakt van deze methode voor banken zowel de hamster en niet-menselijke primaat hersenen secties. Tot nu toe hebben we verzameld bijna 20…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
De auteurs willen graag Ikiel Ptito bedanken voor zijn voortdurende technische ondersteuning.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Ethylene glycol | Fisher | E178-4 | ||
| Polyvinyl pyrrolidone | Fisher | BP431-500 | ||
| Thermal Scientific Embedding Medium | Fisher |
Riferimenti
- West, M., Slomianka, L., Gundersen, H. Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in the subdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator. Aat Rec. 231, 482-497 (1991).
- Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Dissecting the Non-human Primate Brain in Stereotaxic Space. J Vis Exp. , (2009).
