红外测温仪在被动系统过敏反应和食品过敏评价中的应用
Summary
在这里, 我们提出了一个新的方法, 以准确地测量体温差异的被动系统过敏 (PSA) 和食品过敏小鼠模型使用红外线温度计。此过程在以前的 PSA 结果中得到了准确的复制。
Abstract
小鼠体温测量对研究过敏和过敏性症状至关重要。直肠探针为温度读数是普遍的, 并且他们被证明是准确和可贵的在这方面。然而, 这种温度测量方法要求小鼠进行麻醉, 以便插入探针而不损伤动物。这就限制了同时观察鼠标的其他表型的能力。为了研究其他表型, 同时测量温度, 直肠探头是不理想的, 另一种方法是需要的。在这里, 我们引入了一种无创测温方法, 全国加工业副产品了对小鼠麻醉的要求, 同时保持了直肠探头在体温测量中的同等可靠性。我们使用红外线温度计, 在2和150毫米的范围内检测出体表温度。这种体温测量方法成功地在小鼠被动系统过敏实验中可靠地复制了温度变化趋势。我们表明, 体表温度约2.0 °c 低于直肠探针测量, 但温度下降的程度遵循相同的趋势。此外, 我们用同样的方法观察在食物过敏模型中的小鼠, 同时评估温度和活动水平。
Introduction
体温测量是监测1、2动物模型过敏性症状影响的重要组成部分。传统上用直肠探针温度计测量了3、4小鼠的温度差异。通过这些测量, 调查人员可以可靠地描述变量之间的温度差异;然而, 这种方法是一个耗时的过程, 导致小鼠的苦恼, 这可以增加人体核心温度。直肠探查也可引起粘膜撕裂和感染3。此外, 应麻醉小鼠, 以人道地插入直肠探针测量温度3。这是一个缓慢的过程, 它禁止在短时间内测量连续温度。此外, 在这段时间内, 老鼠的活动表型不能被观察到, 直到麻醉完全磨损, 这是另一个耗时的过程。最近, 其他可靠的方法来测量体温已经使用皮下植入被动红外转发器标签或无线电发射机, 包括温度传感器3,5,6。虽然这些方法被一些研究人员接受为理想的实践, 但由于在皮肤或身体的另一部分的温度传感器的外科植入, 所以由于最初的成本高昂和对老鼠的苦恼, 这些办法没有得到广泛的应用。
为了证明温度差异是一个准确的反映症状在疾病模型1,2, 小鼠必须清醒的温度测量, 并能够返回到他们的正常表型活动在测量前后立即。为此目的, 我们寻求一种可以实现这一目标的方法。
我们的目标是准确和廉价的测量鼠标体温, 不需要麻醉和不限制活动, 使观察的行为表型期间和之后的温度测量。为了实现这一目标, 显然需要一种比标准直肠温度探针更少侵入的技术。红外线温度计已经在临床上使用了数十年, 特别是在儿科, 以获得准确的体温读数。它一直是一种替代方法, 使临床医生能够迅速和准确地获得温度测量的婴儿和挑剔的儿童积极流动。我们在小鼠中实施了同样的技术, 并开发了一种成功的方法来获得温度而无需麻醉。重要的是, 我们表明, 这种方法能够复制已建立良好的被动系统性过敏反应的温度变化的结果, 同时也能够观察的活动, 鼠标在整个测量。此外, 我们使用相同的方法来评估食物过敏小鼠的体温, 同时调查其他症状, 以证明体温确实是准确反映的活动水平和整体表型的鼠标。
Protocol
Representative Results
Discussion
所述的协议是建立在不使用麻醉的情况下测量体温的目标。尽管它相对容易获得的温度读数, 有几个警告, 以适应这种技术, 除了更明显的影响, 如处理压力和不同的环境温度。
首先, 为了在整个实验中保持一致的温度读数, 测量温度的位置必须使用解剖标志来确定, 而研究者必须能够复制所述身体的测量。位置。通过在直边表面上保护鼠标的前爪, 如笼子的唇或温度计的边缘, ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
川上刚实验室的研究得到了 NIH 赠款的支持: R01 AR064418-01A1、R01 HL124283-01、R21 AI 115534-01 和 R41AI124734-01。
Materials
| Non-contact infrared thermometer | SinoPie | DT-8861 | |
| Anti-dinitrophenyl (DNP) IgE | Sigma Aldrich | D8406-.2MG | |
| PrecisionGlide 30G needle | BD | 305128 | |
| PrecisionGlide 26G needle | BD | 305111 | |
| 1 mL syringe | BD | 309659 | |
| Dinitrophenyl – human serum albumin | Biosearch Technologies | D-5059-10 | |
| Ovalbumin from chicken egg white | Sigma Aldrich | A5503-50G | |
| Imject Alum | ThermoFisher Scientific | 77161 | |
| Animal Feeding Needles, disposable | Fisher Scientific | 01-208-87 |
Referências
- Finkelman, F. D. Anaphylaxis: lessons from mouse models. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 120 (3), 506-515 (2007).
- Lee, J. K., Vadas, P. Anaphylaxis: mechanisms and management. Clinical and Experimental Allergy: Journal of the British Society for Allergy and Clinical Immunology. 41 (7), 923-938 (2011).
- Newsom, D. M., Bolgos, G. L., Colby, L., Nemzek, J. A. Comparison of body surface temperature measurement and conventional methods for measuring temperature in the mouse. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 43 (5), 13-18 (2004).
- Wong, J. P., Saravolac, E. G., Clement, J. G., Nagata, L. P. Development of a murine hypothermia model for study of respiratory tract influenza virus infection. Laboratory Animal Science. 47 (2), 143-147 (1997).
- Quimby, J. M., Olea-Popelka, F., Lappin, M. R. Comparison of digital rectal and microchip transponder thermometry in cats. Journal of American Association for Laboratory Animal Science. 48 (4), 402-404 (2009).
- Mei, J., Riedel, N., Grittner, U., Endres, M., Banneke, S., Emmrich, J. V. Body temperature measurement in mice during acute illness: implantable temperature transponder versus surface infrared thermometry. Scientific Reports. 8 (1), 3526 (2018).
- Doyle, E., Trosien, J., Metz, M. Protocols for the induction and evaluation of systemic anaphylaxis in mice. Methods in Molecular Biology. 1032, 133-138 (2013).
- Brandt, E. B., et al. Mast cells are required for experimental oral allergen-induced diarrhea. The Journal of Clinical Investigations. 112 (11), 1666-1677 (2003).
- Ando, T., et al. Histamine-releasing factor enhances food allergy. The Journal of Clinical Investigations. 127 (12), 4541-4553 (2017).
- Brandt, E. B., et al. Targeting IL-4/IL-13 signaling to alleviate oral allergen-induced diarrhea. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 123 (1), 53-58 (2009).
