Medição de temperatura de corpo do mouse usando o termômetro infravermelho durante passiva anafilaxia sistêmica e avaliação de alergia alimentar

Resumo

Aqui nós apresentamos um novo método para medir com precisão as diferenças de temperatura de corpo em anafilaxia sistêmica passiva (PSA) e modelos de rato de alergia alimentar usando um termômetro infravermelho. Este procedimento tem sido duplicado com precisão em resultados anteriores de PSA.

Resumo

Medição de temperatura de corpo do mouse é de suma importância para a investigação de alergias e sintomas de choque anafiláticas. Sondas retais para leituras de temperatura é comum, e eles têm provados ser precisos e inestimável a este respeito. No entanto, este método de medição da temperatura requer os ratos a ser anestesiada para inserir a sonda sem prejuízo para o animal. Isso limita a capacidade de observar outros fenótipos do mouse simultaneamente. A fim de investigar outros fenótipos durante a medição de temperaturas, sondas retais não são ideais, e um outro método é desejado. Aqui, apresentamos um método não invasivo de medição de temperatura que incorra a exigência de anestesia do mouse, mantendo a confiabilidade igual a sondas retais em medir a temperatura do corpo. Nós usamos um termômetro infravermelho que detecta as temperaturas de superfície de corpo em intervalos entre 2 e 150 mm. Este método de medição de temperatura do corpo é bem sucedido em confiantemente, replicando as tendências de mudança de temperatura durante experimentos de anafilaxia sistema passivo em camundongos. Nós mostramos que as temperaturas de superfície do corpo são aproximadamente 2,0 ° C inferior a medições da sonda retal, mas o grau de queda de temperatura segue a mesma tendência. Além disso, podemos usar a mesma técnica para observar ratos em um modelo de alergia alimentar para avaliar os níveis de temperatura e atividade simultaneamente.

Introdução

Medição da temperatura corporal tem sido uma parte essencial de monitorar os efeitos dos sintomas de choque anafiláticas em animal modelos^1,2. Diferenças de temperatura tem sido tradicionalmente medidas pelo termômetros retal em ratos^3,4. Com estas medidas, investigadores confiantemente tem retratado as diferenças de temperatura entre variáveis; no entanto, esse método é um procedimento demorado e faz com que a aflição de ratos, que podem aumentar a temperatura do corpo. Sondagem retal também pode causar na mucosa rasgando e infecção^3....

Protocolo

Todos os experimentos com animais foram aprovados pelo cuidado Animal e Comissão de utilização do Instituto de La Jolla para alergia e Imunologia.

1. medição de temperatura de corpo Mouse durante Anesthetization

1. Coloque o mouse em uma caixa de indução de anestesia. ANESTHETIZE usando fluxo de 1 L/min de oxigênio com 5% de isoflurano.
   Nota: Anesthetization é confirmada quando o mouse deixa o movimento voluntário e tem estado parado por mais de 30 s. Alternativamente, frequência respiratória de monitor, e uma vez que os ratos estão respirando em 1 respiração por cada 2 s ou mais, anesthetization é confirmada.
2. Segure o m....

Resultados

Anafilaxia sistêmica passiva: 10 semana para injeção iv, velhos camundongos BALB/c fêmeas foram anestesiados. Antes da injeção, medimos a temperatura do corpo (Video 1) conforme descrito na etapa 1. A Figura 1 mostra a tendência de temperatura de ambas as populações após injeção iv. O rato sensibilizados por IgE, mostrou uma queda de temperatura máxima de 3,0 ° C durante 20 min, enquanto o mouse de controle de PBS teve uma queda máxima de 1,1.......

Discussão

O protocolo descrito foi criado com o objetivo de medir a temperatura do corpo sem o uso de anestesia. Apesar de sua relativa facilidade com que temperatura leituras podem ser obtidas, existem várias advertências que acomodar esta técnica, além dos efeitos mais óbvios como lidar com stress e temperaturas ambientes diferentes.

Primeiro, a fim de manter as leituras de temperatura consistente durante todo o experimento, o local onde a temperatura está sendo medida deve ser predeterminado usando p.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Termômetro infravermelho sem contato	SinoPie	DT-8861
Anti-dinitrofenil (DNP) IgE	Sigma Aldrich	D8406-.2MG
Agulha PrecisionGlide 30 G	BD	305128
Agulha PrecisionGlide 26 G	Seringa BD	305111
1 mL	BD	309659
Dinitrofenil - albumina sérica humana	Biosearch Technologies	D-5059-10
Ovalbumina de clara de ovo de galinha	Sigma Aldrich	A5503-50G
Imject Alum	ThermoFisher Scientific	77161
Agulhas de alimentação animal, descartáveis	Fisher Scientific	208/01/87