Измерение температуры тела мыши с помощью пирометр инфракрасный пассивный системный анафилаксии и пищевой аллергии оценки
Summary
Здесь мы представляем новый метод для точного измерения перепадов температур тела в пассивный системный анафилаксии (PSA) и пищевой аллергии мыши модели с помощью инфракрасный термометр. Эта процедура точно дублируется в предыдущие результаты PSA.
Abstract
Измерение температуры тела мышь имеет первостепенное значение для расследования анафилактический симптомы аллергии и. Ректальные зонды для показания температуры является общим, и они доказали быть точным и неоценимое значение в этом отношении. Однако этот способ измерения температуры требует мышей наркоз для того, чтобы вставить зонд без ущерба для животного. Это ограничивает способность наблюдать другие фенотипы мыши одновременно. Для того, чтобы исследовать другие фенотипы при измерении температуры, Ректальные зонды не являются идеальными, и другой метод. Здесь мы представляем неинвазивный метод измерения температуры, которая отказывается требование для мыши анестезии при сохранении равной надежности Ректальные зонды для измерения температуры тела. Мы используем инфракрасный термометр, который обнаруживает тела температуры поверхности в диапазоне от 2 до 150 мм. Этот метод измерения температуры тела является успешным в надежно реплицировать тенденции изменения температуры во время пассивной системой анафилаксии эксперименты на мышах. Мы покажем, что температура поверхности тела около 2,0 ° C ниже, чем ректальный датчик измерения, но степень падение температуры ниже ту же тенденцию. Кроме того мы используем тот же метод соблюдать мышей в продовольственной специальные модели для оценки температуры и деятельности уровнях одновременно.
Introduction
Измерение температуры тела была неотъемлемой частью мониторинга воздействия анафилактический симптомов в животных моделей1,2. Перепады температур традиционно измеряется ректальный датчик термометры в мышей3,4. С этими измерениями следователи надежно изображали различия в температуре между переменными; Однако этот метод является длительная процедура и вызывает бедствие для мышей, которые могут увеличить температуру тела. Ректальное исследование может также вызвать слизистой срывать и инфекции3. Кроме того следует под наркозом мышей чтобы гуманно вставить ректального зонда для измерения температуры3. Это медленный процесс, и он запрещает измерения последовательных температур в течение короткого периода времени. Кроме того фенотипы активность мышей не могут быть соблюдены в это время, до тех пор, пока цистит является полностью стерлась, который является еще один трудоемкий процесс. Совсем недавно другие надежные методы для измерения температуры тела использовали Теги подкожно имплантированных инфракрасный пассивный транспондер или радио передатчиков, которые включают датчик температуры3,5,6. Хотя они принимаются как идеальный практике некоторыми исследователями, эти методы не используются широко из-за высоких первоначальных издержек и страданиями для мышей, из-за хирургической имплантации датчика температуры под кожу или другой частью тела.
Для того, чтобы продемонстрировать, что разница температур является точным отражением симптомов болезни модель1,2, мышей должны бодрствовать во время измерения температуры и иметь возможность вернуться к их нормальной деятельности фенотипические непосредственно перед и после измерения. С этой целью мы искали метод, в которой это может быть достигнуто.
Нашей целью было недорого и точно измерить температуру тела мыши, без необходимости для анестезии и без ограничений на деятельность, чтобы включить наблюдение за поведенческих фенотипов во время и после времени измерения температуры. Для достижения этой цели, стало очевидно, что менее инвазивный метод чем стандартный ректальной температуры зонды не требуется. Инфракрасные термометры использовали на протяжении десятилетий в клинической медицине, особенно в педиатрии, для получения точной температуры. Это был альтернативный метод, который позволяет врачам быстро и качественно получить измерения температуры у младенцев и детей суетливый, которые активно мобильных. Мы реализовали эту же технику в мышах и разработали успешный метод для получения температур без анестезии. Важно отметить, что мы показываем, что этот метод способен тиражирование устоявшихся пассивный системный анафилаксии результаты относительно изменений температуры, а также в состоянии наблюдать действие мыши на протяжении всего измерения. Кроме того, мы используем тот же метод для оценки температуры тела еда аллергические мышей, одновременно исследуя другие симптомы, чтобы продемонстрировать, что температура тела действительно является точным отражением уровня активности и общей фенотип мыши.
Protocol
Representative Results
Discussion
Протокол, в описанный был создан с целью измерения температуры тела без применения анестезии. Несмотря на его относительной легкостью, с какой температуры могут быть получены чтений есть несколько предостережений, которые разместить эту технику, в дополнение к более очевидные эффекты…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Исследования в лаборатории был поддержан NIH Каваками грантов: R01 AR064418-01A1, R01 HL124283-01, R21 AI 115534-01 и R41AI124734-01.
Materials
| Non-contact infrared thermometer | SinoPie | DT-8861 | |
| Anti-dinitrophenyl (DNP) IgE | Sigma Aldrich | D8406-.2MG | |
| PrecisionGlide 30G needle | BD | 305128 | |
| PrecisionGlide 26G needle | BD | 305111 | |
| 1 mL syringe | BD | 309659 | |
| Dinitrophenyl – human serum albumin | Biosearch Technologies | D-5059-10 | |
| Ovalbumin from chicken egg white | Sigma Aldrich | A5503-50G | |
| Imject Alum | ThermoFisher Scientific | 77161 | |
| Animal Feeding Needles, disposable | Fisher Scientific | 01-208-87 |
Referências
- Finkelman, F. D. Anaphylaxis: lessons from mouse models. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 120 (3), 506-515 (2007).
- Lee, J. K., Vadas, P. Anaphylaxis: mechanisms and management. Clinical and Experimental Allergy: Journal of the British Society for Allergy and Clinical Immunology. 41 (7), 923-938 (2011).
- Newsom, D. M., Bolgos, G. L., Colby, L., Nemzek, J. A. Comparison of body surface temperature measurement and conventional methods for measuring temperature in the mouse. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 43 (5), 13-18 (2004).
- Wong, J. P., Saravolac, E. G., Clement, J. G., Nagata, L. P. Development of a murine hypothermia model for study of respiratory tract influenza virus infection. Laboratory Animal Science. 47 (2), 143-147 (1997).
- Quimby, J. M., Olea-Popelka, F., Lappin, M. R. Comparison of digital rectal and microchip transponder thermometry in cats. Journal of American Association for Laboratory Animal Science. 48 (4), 402-404 (2009).
- Mei, J., Riedel, N., Grittner, U., Endres, M., Banneke, S., Emmrich, J. V. Body temperature measurement in mice during acute illness: implantable temperature transponder versus surface infrared thermometry. Scientific Reports. 8 (1), 3526 (2018).
- Doyle, E., Trosien, J., Metz, M. Protocols for the induction and evaluation of systemic anaphylaxis in mice. Methods in Molecular Biology. 1032, 133-138 (2013).
- Brandt, E. B., et al. Mast cells are required for experimental oral allergen-induced diarrhea. The Journal of Clinical Investigations. 112 (11), 1666-1677 (2003).
- Ando, T., et al. Histamine-releasing factor enhances food allergy. The Journal of Clinical Investigations. 127 (12), 4541-4553 (2017).
- Brandt, E. B., et al. Targeting IL-4/IL-13 signaling to alleviate oral allergen-induced diarrhea. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 123 (1), 53-58 (2009).
