Summary

Mesure de température de corps de souris avec le thermomètre à infrarouge pendant Passive systémique anaphylaxie et évaluation d’allergie alimentaire

Published: September 14, 2018
doi:

Summary

Nous présentons ici une nouvelle méthode pour mesurer avec précision les écarts de température du corps dans l’anaphylaxie systémique passive (PSA) et des modèles de souris allergie alimentaire à l’aide d’un thermomètre infrarouge. Cette procédure a été fidèlement reproduite dans les précédents résultats de PSA.

Abstract

Mesurer la température de corps souris est d’une importance primordiale pour enquêter sur les allergies et les symptômes anaphylactiques. Sondes rectales pour les lectures de température est commun, et ils sont est avérés pour être précis et précieux à cet égard. Toutefois, cette méthode de mesure de température exige les souris pour être anesthésiés afin d’y pour insérer la sonde sans nuire à l’animal. Cela limite la capacité d’observer simultanément les autres phénotypes de la souris. Afin d’enquêter sur d’autres phénotypes tout en mesurant les températures, les sondes rectales ne sont pas idéales, et une autre méthode est souhaitée. Ici, nous présentons une méthode non invasive de la mesure de la température qui renonce à l’exigence pour l’anesthésie de la souris tout en maintenant la fiabilité égale aux sondes rectales pour mesurer la température corporelle. Nous utilisons un thermomètre infrarouge qui détecte la température de surface de corps à des distances de 2 à 150 mm. Cette méthode de mesure de température de corps est réussie dans la reproduction fiable des tendances de changement de température au cours d’expériences d’anaphylaxie système passif chez les souris. Nous montrons que les températures de surface de corps sont environ 2,0 ° C inférieure à la mesure de la sonde rectale, mais le degré de chute de température suit la même tendance. En outre, nous utilisons la même technique pour observer les souris dans un modèle d’allergie alimentaire pour évaluer les niveaux de température et l’activité simultanément.

Introduction

Mesure de la température corporelle a été un élément essentiel de la surveillance des effets des symptômes anaphylactiques chez les animaux modèles1,2. Écarts de température ont été traditionnellement mesurées par les thermomètres sonde rectale en souris3,4. Avec ces mesures, les enquêteurs ont dépeint fiable de différences de température entre les variables ; Toutefois, cette méthode est une procédure longue et provoque la détresse à des souris, ce qui peuvent augmenter la température corporelle. Sonde rectale peut également provoquer larmoiement et infection muqueuse3. En outre, les souris devraient être anesthésiés pour humainement insérer la sonde rectale pour mesurer la température :3. Il s’agit d’un processus lent, et il interdit la mesure des températures successives dans un court laps de temps. En outre, les phénotypes de l’activité de souris ne peuvent être observées pendant cette période, jusqu’à ce que l’anesthésie est complètement dissipé, qui est un autre processus fastidieux. Plus récemment, autres méthodes fiables pour mesurer la température corporelle ont utilisé des balises transpondeur infrarouge passif implanté sous la peau ou des émetteurs de radio comprenant un capteur de la température3,5,6. Même si elles sont acceptées comme la pratique idéale par certains chercheurs, ces méthodes ne sont pas largement utilisés en raison des coûts initiaux élevés et de détresse chez la souris, en raison de l’implantation chirurgicale d’un capteur de température sous la peau ou une autre partie du corps.

Afin de démontrer qu’une différence de température est un reflet fidèle des symptômes à une maladie modèle1,2, souris doivent être éveillés pendant la mesure de la température et reprendre leurs activités normales phénotypique immédiatement avant et après la mesure. À cette fin, nous avons recherché une méthode par lequel cela pourrait se faire.

Notre objectif était pour mesurer la température corporelle de souris, sans la nécessité d’une anesthésie et sans restrictions à l’activité, pour permettre l’observation des phénotypes comportements pendant et après le temps de mesure de la température avec précision et à moindre coût. Pour atteindre cet objectif, il était évident qu’une technique moins invasive que les sondes de la température rectale normale était nécessaire. Les thermomètres infrarouges ont été utilisés pendant des décennies en médecine clinique, en particulier en pédiatrie, pour obtenir des lectures de température précis. Il a été une méthode alternative qui a permis aux cliniciens de rapidement et précisément obtenir des mesures de température chez les nourrissons et les enfants capricieux qui sont activement mobiles. Nous avons mis en place cette même technique chez des souris et ont mis au point une méthode efficace pour obtenir des températures sans anesthésie. Ce qui est important, nous montrons que cette méthode est capable de reproduire les résultats de l’anaphylaxie systémique passive bien établies concernant les changements de température, tout en étant en mesure d’observer l’activité de la souris tout au long de la mesure. En outre, nous utilisons la même méthode pour évaluer la température corporelle de souris allergiques aux aliments, tout en étudiant simultanément d’autres symptômes, afin de démontrer que la température du corps est en effet un reflet exact du niveau d’activité et le phénotype global de la souris.

Protocol

Toutes les expériences animales ont été approuvées par le Comité de l’urbanisme de l’Institut de La Jolla et animalier d’allergie et d’immunologie. 1. souris corps mesure de la température au cours de la Anesthetization Placez votre souris dans une boîte d’induction de l’anesthésie. Anesthésie à l’aide de 1 L/min débit d’oxygène à l’isoflurane 5 %.Remarque : Anesthetization est confirmée lorsque la souris ne répond plus de mouvement volontaire et…

Representative Results

Anaphylaxie systémique passive : injectable i.v., semaine 10 vieilles femelles BALB/c ont été anesthésiés. Avant l’injection, nous avons mesuré leur température corporelle (Video 1) tel que décrit à l’étape 1. La figure 1 illustre la tendance de la température des deux populations après injection intraveineuse. La souris sensibilisées IgE a montré une baisse de la température maximale de 3,0 ° C à 20 min, alors que la so…

Discussion

Le protocole décrit a été créé dans le but de mesurer la température de corps sans l’utilisation de l’anesthésie. Malgré sa relative facilité avec laquelle la température lectures peuvent être obtenus, il y a plusieurs mises en garde qui s’adapter cette technique, en plus des effets plus évidents tels que gestion de stress et températures ambiantes différentes.

Tout d’abord, afin de maintenir les lectures de température constante tout au long de l’expérience, l’endr…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Subventions de recherche dans le Kawakami lab a été pris en charge par les NIH : R01 AR064418-01 a 1, R01 HL124283-01, R21 AI 115534-01 et R41AI124734-01.

Materials

Non-contact infrared thermometer SinoPie DT-8861
Anti-dinitrophenyl (DNP) IgE Sigma Aldrich D8406-.2MG
PrecisionGlide 30G needle BD 305128
PrecisionGlide 26G needle  BD 305111
1 mL syringe BD 309659
Dinitrophenyl – human serum albumin Biosearch Technologies D-5059-10
Ovalbumin from chicken egg white Sigma Aldrich A5503-50G
Imject Alum ThermoFisher Scientific 77161
Animal Feeding Needles, disposable Fisher Scientific 01-208-87

Referências

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Citar este artigo
Kawakami, Y., Sielski, R., Kawakami, T. Mouse Body Temperature Measurement Using Infrared Thermometer During Passive Systemic Anaphylaxis and Food Allergy Evaluation. J. Vis. Exp. (139), e58391, doi:10.3791/58391 (2018).

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