Muis lichaamstemperatuurmeting met behulp van Infrarood Thermometer tijdens passieve systemische anafylaxie en voedsel allergie evaluatie
Summary
Hier presenteren we een nieuwe methode voor het nauwkeurig meten van de lichaam temperatuurverschillen in passieve systemische anafylaxie (PSA) en voedsel allergie Muismodellen met behulp van een infrarood thermometer. Deze procedure is nauwkeurig gedupliceerd in de resultaten van de vorige PSA.
Abstract
Muis lichaamstemperatuurmeting is van het allergrootste belang voor het onderzoeken van allergieën en anafylactische symptomen. Rectaal probes voor temperatuur lezingen is gemeenschappelijk en ze zijn bewezen om te worden accuraat en van onschatbare waarde in dit opzicht. Echter, deze methode van temperatuurmeting moet de muizen te worden verdoofd om het invoegen van de sonde zonder letsel aan het dier. Dit beperkt de mogelijkheid om te observeren gelijktijdig andere fenotypes van de muis. Om te onderzoeken andere fenotypen tijdens het meten van temperaturen, rectale sondes zijn niet ideaal, en een andere methode is gewenst. Hier introduceren we een noninvasive methode van temperatuurmeting die de eis voor muis anesthesie met behoud van gelijke betrouwbaarheid rectale sondes in het meten van de lichaamstemperatuur foregoes. We gebruiken een infrarood thermometer die lichaam oppervlaktetemperaturen op varieert tussen 2 en 150 mm detecteert. Deze methode van lichaamstemperatuurmeting is succesvol bij het repliceren van betrouwbaar temperatuur verandering trends tijdens passieve systeem anafylaxie experimenten in muizen. We laten zien dat de oppervlaktetemperaturen lichaam ongeveer 2,0 ° C lager dan rectale sonde metingen, maar de mate van temperatuurdaling dezelfde trend volgt. Bovendien gebruiken we dezelfde techniek om muizen in een voedsel allergie model te evalueren van temperatuur en activiteit niveaus gelijktijdig observeren.
Introduction
Meting van de lichaamstemperatuur is een essentieel onderdeel van de monitoring van de effecten van anafylactische symptomen in dierlijke modellen1,2. Temperatuurverschillen zijn traditioneel gemeten door rectale sonde thermometer in muizen3,4. Met deze metingen, hebben onderzoekers op betrouwbare wijze geportretteerd verschillen in temperatuur tussen variabelen; echter, deze methode is een tijdrovende procedure en nood aan muizen, die de kerntemperatuur van het lichaam verhogen kunnen veroorzaakt. Rectale sonderen, kan dit ook leiden tot de mucosal scheuren en infectie3. Bovendien moeten de muizen te humaan voegen de rectale sonde voor het meten van de temperatuur3worden verdoofd. Dit is een langzaam proces en het verbiedt het meten van de opeenvolgende temperaturen binnen een korte periode van tijd. Bovendien, muizen activiteit fenotypen niet worden waargenomen gedurende deze tijd totdat de verdoving volledig versleten is uit, dat een tijdrovend proces is. Meer recentelijk hebben andere betrouwbare methoden voor het meten van de lichaamstemperatuur gebruikt subcutaan geïmplanteerde passieve infrarood transponder tags of radiozenders die een temperatuur sensor3,5,6 bevatten. Hoewel ze wordt geaccepteerd als de ideale praktijk door sommige onderzoekers, zijn deze methoden niet veel gebruikt vanwege de hoge aanloopkosten en nood aan muizen, als gevolg van de chirurgische inplanting van een temperatuursensor onder de huid of een ander deel van het lichaam.
Om aan te tonen dat een temperatuurverschil een nauwkeurige weerspiegeling van symptomen bij een ziekte model1,2 is, moeten muizen wakker tijdens de temperatuurmeting en kunnen terug te keren naar hun normale fenotypische activiteit onmiddellijk vóór en na de meting. Te dien einde, we geprobeerd een methode waarmee dit kan worden bereikt.
Ons doel was om nauwkeurig en goedkoop meet muis lichaamstemperatuur, zonder de noodzaak voor anesthesie en zonder beperkingen op de activiteiten, om de waarneming van gedrags fenotypen tijdens en na de tijd van de temperatuurmeting. Om dit te bereiken, werd het duidelijk dat een minder invasieve techniek dan de standaard rectale temperatuur sondes nodig was. Infrarood thermometers zijn gebruikt voor decennia in de klinische geneeskunde, vooral in de kindergeneeskunde, verkrijgen van nauwkeurige temperatuur lezingen. Het is een alternatieve methode die heeft toegestaan clinici voor snel en nauwkeurig temperatuurmetingen in zuigelingen en pietluttig kinderen die actief mobiel zijn geweest. We deze zelfde techniek in muizen geïmplementeerd en hebben een succesvolle methode ontwikkeld om het verkrijgen van temperaturen zonder verdoving. Nog belangrijker is, laten we zien dat deze methode geschikt is voor het repliceren van de resultaten van de gevestigde passieve systemische anafylaxie aangaande de temperatuurveranderingen, terwijl ook het kunnen waarnemen van de activiteit van de muis in de meting. Bovendien gebruiken we dezelfde methode om te evalueren van lichaam temperaturen van voedsel-allergische muizen, terwijl het tegelijkertijd het onderzoeken van andere symptomen, om aan te tonen dat de lichaamstemperatuur inderdaad een accurate weerspiegeling zijn van het activiteitenniveau en algehele fenotype van is de muis.
Protocol
Representative Results
Discussion
Het protocol beschreven werd opgericht met het doel van het meten van de lichaamstemperatuur zonder het gebruik van de verdoving. Ondanks het relatieve gemak met welke temperatuur lezingen kunnen worden verkregen, zijn er verschillende waarschuwingen die geschikt voor deze techniek, naast de meer voor de hand liggende effecten zoals de behandeling van stress en andere omgevingstemperaturen.
Eerst, teneinde overeenstemming temperatuur lezingen gedurende het gehele experiment, de locatie waar de…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Onderzoek in het lab werd gesteund door de NIH Kawakami verleent: R01 AR064418-01A1, R01 HL124283-01, R21 AI 115534-01, en R41AI124734-01.
Materials
| Non-contact infrared thermometer | SinoPie | DT-8861 | |
| Anti-dinitrophenyl (DNP) IgE | Sigma Aldrich | D8406-.2MG | |
| PrecisionGlide 30G needle | BD | 305128 | |
| PrecisionGlide 26G needle | BD | 305111 | |
| 1 mL syringe | BD | 309659 | |
| Dinitrophenyl – human serum albumin | Biosearch Technologies | D-5059-10 | |
| Ovalbumin from chicken egg white | Sigma Aldrich | A5503-50G | |
| Imject Alum | ThermoFisher Scientific | 77161 | |
| Animal Feeding Needles, disposable | Fisher Scientific | 01-208-87 |
Referências
- Finkelman, F. D. Anaphylaxis: lessons from mouse models. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 120 (3), 506-515 (2007).
- Lee, J. K., Vadas, P. Anaphylaxis: mechanisms and management. Clinical and Experimental Allergy: Journal of the British Society for Allergy and Clinical Immunology. 41 (7), 923-938 (2011).
- Newsom, D. M., Bolgos, G. L., Colby, L., Nemzek, J. A. Comparison of body surface temperature measurement and conventional methods for measuring temperature in the mouse. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 43 (5), 13-18 (2004).
- Wong, J. P., Saravolac, E. G., Clement, J. G., Nagata, L. P. Development of a murine hypothermia model for study of respiratory tract influenza virus infection. Laboratory Animal Science. 47 (2), 143-147 (1997).
- Quimby, J. M., Olea-Popelka, F., Lappin, M. R. Comparison of digital rectal and microchip transponder thermometry in cats. Journal of American Association for Laboratory Animal Science. 48 (4), 402-404 (2009).
- Mei, J., Riedel, N., Grittner, U., Endres, M., Banneke, S., Emmrich, J. V. Body temperature measurement in mice during acute illness: implantable temperature transponder versus surface infrared thermometry. Scientific Reports. 8 (1), 3526 (2018).
- Doyle, E., Trosien, J., Metz, M. Protocols for the induction and evaluation of systemic anaphylaxis in mice. Methods in Molecular Biology. 1032, 133-138 (2013).
- Brandt, E. B., et al. Mast cells are required for experimental oral allergen-induced diarrhea. The Journal of Clinical Investigations. 112 (11), 1666-1677 (2003).
- Ando, T., et al. Histamine-releasing factor enhances food allergy. The Journal of Clinical Investigations. 127 (12), 4541-4553 (2017).
- Brandt, E. B., et al. Targeting IL-4/IL-13 signaling to alleviate oral allergen-induced diarrhea. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 123 (1), 53-58 (2009).
