パッシブ全身性アナフィラキシーと食品アレルギーの評価中に赤外線放射温度計を使用してマウスの体温測定
Summary
ここでパッシブ全身性アナフィラキシー (PSA) と赤外線放射温度計を用いた食品アレルギー マウス モデルのボディ温度差を正確に測定する手法を提案する.この手順は、以前の PSA の結果で正確に重複しています。
Abstract
マウスの体温測定はアレルギーとアナフィラキシー症状を調査するため非常に重要です。温度測定のため直腸プローブが一般的であり、彼らはこの点で正確で非常に貴重なと実証されています。ただし、この方法で温度測定動物に怪我なくプローブを挿入するために麻酔にマウスが必要です。これは同時にマウスの他の表現型を観察する能力が制限されます。温度を測定している間、他の表現型を調査するために直腸プローブは、理想的ではない、別の方法が望ましい。直腸体温を測定プローブに同等の信頼性を維持しながらマウス麻酔の必要性は犠牲になります温度測定の非侵襲的方法を紹介します。2 と 150 ミリメートルの間の範囲で体表面温度を検出する赤外線放射温度計を使用します。体温測定のこの方法は確実にマウスの受動システム アナフィラキシー実験中に温度変化の動向をレプリケートする場合に成功します。体表面温度が約 2.0 ° C 直腸プローブ測定よりも低いが、温度低下の程度次の同じ傾向を示します。さらに、同時に温度と活動のレベルを評価するのに食物アレルギー モデル マウスを観察するのに同じ方法を使用します。
Introduction
体温の測定は、モデル1,2の動物でアナフィラキシー症状の効果のモニタリングの重要な部分されています。温度差は、従来マウス3,4直腸プローブ温度計により計測されています。捜査官は、確実に変数間の温度の相違を描かこれらの測定では、ただし、このメソッドは、時間のかかるプロシージャ、ボディコア温度を高めることができるマウスに苦痛を引き起こします。プロービング ・直腸粘膜の断裂と感染3もあります。さらに、マウスは、人道的3温度を測定する直腸プローブを挿入するために麻酔する必要があります。これは遅いプロセスで、それは時間の短い期間内で連続した温度の測定を禁じています。さらに、マウスの活動の表現型は、麻酔が完全に磨り減る、別の時間のかかるプロセスであるまでこの時間の間に観測ができません。最近では、体の温度を測定するための他の信頼性の高い方法は皮下埋め込むパッシブ赤外線トランスポンダー タグまたは温度センサー3,5,6を含む無線送信機を使用しています。一部の研究者によって理想的な方法として許容される、データが広くこれらのメソッド高いイニシャル コストとマウス、皮膚や体の別の部分の下で温度センサーの外科的移植のために苦痛を与えないのために使用されません。
温度差が病気モデル1,2の症状の正確な反射であることを示すためにマウスする必要があります温度測定時に目を覚ましするおよび彼らの通常の表現活動に戻ることができます。測定の前後にすぐに。このため、我々 はこれを達成することができる方法を求めた。
私たちの目標は、正確にかつ安価、麻酔を必要とせず、温度測定の時間の前後の行動表現型の観察を可能にする活動に制限がなくマウスの体温を測定することでした。この目標を達成するために、低侵襲技術標準の直腸温度プローブよりもする必要があるは明らかだった。赤外線温度計は、正確な温度測定値を取得する臨床医学、特に小児科で何十年も使用されています。それは、迅速かつ正確に幼児と積極的にモバイルは、うるさい子供の温度測定を取得する臨床医を許可している別の方法をされています。マウスでこれと同じ手法を実装し、麻酔なしの温度を取得に成功した手法を開発しました。重要なは、このメソッドが測定中マウスの活動を観察することも温度変化に関する確立されたパッシブ全身性アナフィラキシーの結果を複製することがであることを示します。さらに、体温は確かに活動レベルの正確な反射との全体的な表現型であることを示すため、他の症状を同時に調査しながら食物アレルギー マウスの体温を評価する同じメソッドを使用して、マウス。
Protocol
Representative Results
Discussion
説明されたプロトコルは、麻酔を使用せず体温を測定することを目標に設立されました。にもかかわらず、どれと温度の測定値を得ることができる比較的簡単、ストレスと異なる環境温下処理などのより明らかな効果に加えて、この手法に対応するいくつかの注意点があります。
まず、実験を通じて一貫性のある温度を維持するために、温度が測定されている場所する?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
ラボは、NIH によって支えられた川上で研究助成金: R01 AR064418 01A1 や R01 HL124283-01、R21 AI 115534-01 R41AI124734 01。
Materials
| Non-contact infrared thermometer | SinoPie | DT-8861 | |
| Anti-dinitrophenyl (DNP) IgE | Sigma Aldrich | D8406-.2MG | |
| PrecisionGlide 30G needle | BD | 305128 | |
| PrecisionGlide 26G needle | BD | 305111 | |
| 1 mL syringe | BD | 309659 | |
| Dinitrophenyl – human serum albumin | Biosearch Technologies | D-5059-10 | |
| Ovalbumin from chicken egg white | Sigma Aldrich | A5503-50G | |
| Imject Alum | ThermoFisher Scientific | 77161 | |
| Animal Feeding Needles, disposable | Fisher Scientific | 01-208-87 |
Referências
- Finkelman, F. D. Anaphylaxis: lessons from mouse models. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 120 (3), 506-515 (2007).
- Lee, J. K., Vadas, P. Anaphylaxis: mechanisms and management. Clinical and Experimental Allergy: Journal of the British Society for Allergy and Clinical Immunology. 41 (7), 923-938 (2011).
- Newsom, D. M., Bolgos, G. L., Colby, L., Nemzek, J. A. Comparison of body surface temperature measurement and conventional methods for measuring temperature in the mouse. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 43 (5), 13-18 (2004).
- Wong, J. P., Saravolac, E. G., Clement, J. G., Nagata, L. P. Development of a murine hypothermia model for study of respiratory tract influenza virus infection. Laboratory Animal Science. 47 (2), 143-147 (1997).
- Quimby, J. M., Olea-Popelka, F., Lappin, M. R. Comparison of digital rectal and microchip transponder thermometry in cats. Journal of American Association for Laboratory Animal Science. 48 (4), 402-404 (2009).
- Mei, J., Riedel, N., Grittner, U., Endres, M., Banneke, S., Emmrich, J. V. Body temperature measurement in mice during acute illness: implantable temperature transponder versus surface infrared thermometry. Scientific Reports. 8 (1), 3526 (2018).
- Doyle, E., Trosien, J., Metz, M. Protocols for the induction and evaluation of systemic anaphylaxis in mice. Methods in Molecular Biology. 1032, 133-138 (2013).
- Brandt, E. B., et al. Mast cells are required for experimental oral allergen-induced diarrhea. The Journal of Clinical Investigations. 112 (11), 1666-1677 (2003).
- Ando, T., et al. Histamine-releasing factor enhances food allergy. The Journal of Clinical Investigations. 127 (12), 4541-4553 (2017).
- Brandt, E. B., et al. Targeting IL-4/IL-13 signaling to alleviate oral allergen-induced diarrhea. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 123 (1), 53-58 (2009).
