מדידה טמפרטורת גוף העכבר באמצעות מד חום אינפרא אדום במהלך אנפילקסיס מערכתית פסיבי והערכה אלרגיה למזון
Summary
כאן אנו מציגים שיטה חדשה כדי למדוד במדויק את הבדלי טמפרטורה גוף פסיבי אנפילקסיס מערכתית (PSA), מזון אלרגיה העכבר מודלים באמצעות מד חום אינפרא אדום… הליך זה שוכפל במדויק בתוצאות ה-PSA הקודמת.
Abstract
מדידה טמפרטורת גוף העכבר היא בעלת חשיבות עליונה על חקירת אלרגיה וסימפטומים אנפילקטי. פי הטבעת זונדי טמפרטורות משותף, הם הוכחו להיות מדויק ולא יקר ערך בהקשר זה. עם זאת, שיטה זו של מדידת טמפרטורה דורש העכברים עכשיו כדי להכניס את המכשיר ללא פציעה של החיה. זה מגביל את היכולת להתבונן אחרים פנוטיפים של העכבר בו-זמנית. על מנת לחקור פנוטיפים אחרים תוך מדידת טמפרטורה, הגששים רקטלי אינן אידיאלי, שיטה נוספת היא הרצויה. כאן, אנחנו מציגים שיטה לא פולשנית של מדידת טמפרטורה זה בדרישת הדרישה העכבר הרדמה תוך שמירה על אמינות שווה כדי הגששים רקטלי מדידת טמפרטורת הגוף. אנו משתמשים מד חום אינפרא אדום שמזהה טמפרטורות פני הגוף בטווחים בין 2 ל- 150 מ מ. שיטה זו של מדידת טמפרטורת הגוף הוא מצליח בצורה אמינה שכפול מגמות שינוי טמפרטורה במהלך מערכת פסיבית אנפילקסיס ניסויים בעכברים. אנו מראים כי טמפרטורות פני הגוף הינם כ 2.0 ° C נמוך יותר בדיקה רקטלית מדידות, אך מידת ירידת טמפרטורה בעקבות המגמה זהה. יתר על כן, אנו משתמשים באותה השיטה כדי להתבונן עכברים במודל אלרגיה למזון כדי להעריך את רמות טמפרטורה והפעילות בו זמנית.
Introduction
מדידת טמפרטורת הגוף כבר חלק חיוני של פיקוח על ההשפעות של אנפילקטי הסימפטומים אצל בעלי חיים מודלים1,2. הבדלי טמפרטורה נמדדו באופן מסורתי על ידי בדיקה רקטלית מדחומים עכברים3,4. עם מדידות אלה, החוקרים באופן אמין מצטייר הבדלי טמפרטורה בין משתנים; עם זאת, שיטה זו היא הליך זמן רב וגורם מצוקה לעכברים, אשר יכול להגביר את טמפרטורת הגוף. בדיקה רקטלית יכולה גם לגרום קורע ולדלקת הרירית3. יתר על כן, צריך עכשיו העכברים כדי בצורה הומאנית את הגשוש רקטלית כדי למדוד את טמפרטורת3. זהו תהליך איטי, והיא אוסרת על המידה של טמפרטורות רצופים בתוך תקופה קצרה של זמן. יתר על כן, עכברים פעילות פנוטיפים לא יכול להיות שנצפו במהלך תקופה זו עד מההרדמה הוא לחלוטין נשחק, וזה תהליך גוזלת זמן אחר. לאחרונה, שיטות אחרות אמין כדי למדוד את חום הגוף השתמשו subcutaneously מושתל משדר אינפרא-אדום פסיבי תגיות או משדרי הרדיו הכוללים5,63,חיישן טמפרטורה. למרות שהן מתקבלות כפי המנהג אידיאלי על ידי כמה חוקרים, שיטות אלה הם לא בשימוש נרחב בגלל עלויות ראשוניות גבוהות ומצוקה לעכברים, עקב השתלה כירורגית של חיישן טמפרטורה מתחת לעור או חלק אחר של הגוף.
כדי להדגים כי הפרש הטמפרטורות הוא שיקוף מדויק של סימפטומים מחלת מודל1,2, עכברים חייב להיות ער במהלך מדידת טמפרטורה ולהיות מסוגל לחזור פעילותם פנוטיפי נורמלי מיד לפני ואחרי המדידה. לשם כך, חיפשנו שיטה שבה זה יכול להיעשות.
מטרתנו הייתה למדוד במדויק ובזול העכבר טמפרטורת הגוף, ללא הצורך בהרדמה, ללא הגבלות על פעילות, כדי לאפשר התבוננות פנוטיפים התנהגותיים במהלך ואחרי הזמן של מדידת טמפרטורה. כדי להשיג מטרה זו, היה ברור כי שיטה פחות פולשנית מאשר הטמפרטורה רקטאלית רגילה רגשים היה נדרש. מדחום אינפרא אדום שימשו במשך עשרות שנים ברפואה קלינית, במיוחד ברפואת ילדים כדי להשיג קריאת הטמפרטורות מדויק. זה כבר שיטה חלופית שמותר לה קלינאים להשיג במהירות ובדייקנות מדידות טמפרטורה בתינוקות וילדים בררן כי הם פעיל ניידים. עלינו ליישם את אותה טכניקה בעכברים, פיתחו שיטה מוצלחת כדי להשיג טמפרטורות ללא הרדמה. חשוב לציין, אנו מראים כי בשיטה זו הוא מסוגל משכפל את התוצאות ומבוססת אנפילקסיס מערכתית פסיבי לגבי שינויי טמפרטורה, בעוד גם היכולת לצפות את הפעילות של העכבר במהלך המדידה. יתר על כן, אנו משתמשים באותה השיטה כדי להעריך את חום הגוף של עכברים אלרגיות מזון, כשחקרו בו-זמנית תסמינים אחרים, כדי להדגים כי טמפרטורת הגוף הוא אכן של שיקוף מדויק של רמת פעילות, ותפקיד הכוללת של עכבר.
Protocol
Representative Results
Discussion
הפרוטוקול המתואר הוקמה במטרה מדידת טמפרטורת הגוף ללא השימוש בהרדמה. למרות שלו בקלות יחסית עם איזו טמפרטורה ניתן להשיג קריאת, ישנם מספר אזהרות להכיל טכניקה זו, בנוסף ההשפעות ברורה יותר כגון: טיפול שונות בטמפרטורות הסביבה והמתח.
ראשית, על מנת לשמור על טמפרטורות עקבי לאורך כל ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
במחקר Kawakami מעבדה נתמכה על ידי NIH מענקים: R01 AR064418-01A1, HL124283-01-R01, R21 AI 115534-01, ו R41AI124734-01.
Materials
| Non-contact infrared thermometer | SinoPie | DT-8861 | |
| Anti-dinitrophenyl (DNP) IgE | Sigma Aldrich | D8406-.2MG | |
| PrecisionGlide 30G needle | BD | 305128 | |
| PrecisionGlide 26G needle | BD | 305111 | |
| 1 mL syringe | BD | 309659 | |
| Dinitrophenyl – human serum albumin | Biosearch Technologies | D-5059-10 | |
| Ovalbumin from chicken egg white | Sigma Aldrich | A5503-50G | |
| Imject Alum | ThermoFisher Scientific | 77161 | |
| Animal Feeding Needles, disposable | Fisher Scientific | 01-208-87 |
Referências
- Finkelman, F. D. Anaphylaxis: lessons from mouse models. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 120 (3), 506-515 (2007).
- Lee, J. K., Vadas, P. Anaphylaxis: mechanisms and management. Clinical and Experimental Allergy: Journal of the British Society for Allergy and Clinical Immunology. 41 (7), 923-938 (2011).
- Newsom, D. M., Bolgos, G. L., Colby, L., Nemzek, J. A. Comparison of body surface temperature measurement and conventional methods for measuring temperature in the mouse. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 43 (5), 13-18 (2004).
- Wong, J. P., Saravolac, E. G., Clement, J. G., Nagata, L. P. Development of a murine hypothermia model for study of respiratory tract influenza virus infection. Laboratory Animal Science. 47 (2), 143-147 (1997).
- Quimby, J. M., Olea-Popelka, F., Lappin, M. R. Comparison of digital rectal and microchip transponder thermometry in cats. Journal of American Association for Laboratory Animal Science. 48 (4), 402-404 (2009).
- Mei, J., Riedel, N., Grittner, U., Endres, M., Banneke, S., Emmrich, J. V. Body temperature measurement in mice during acute illness: implantable temperature transponder versus surface infrared thermometry. Scientific Reports. 8 (1), 3526 (2018).
- Doyle, E., Trosien, J., Metz, M. Protocols for the induction and evaluation of systemic anaphylaxis in mice. Methods in Molecular Biology. 1032, 133-138 (2013).
- Brandt, E. B., et al. Mast cells are required for experimental oral allergen-induced diarrhea. The Journal of Clinical Investigations. 112 (11), 1666-1677 (2003).
- Ando, T., et al. Histamine-releasing factor enhances food allergy. The Journal of Clinical Investigations. 127 (12), 4541-4553 (2017).
- Brandt, E. B., et al. Targeting IL-4/IL-13 signaling to alleviate oral allergen-induced diarrhea. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 123 (1), 53-58 (2009).
