Summary

Indsamling og måling sårekssudat Biokemiske mæglingsmænd i kirurgiske sår

Published: October 20, 2012
doi:

Summary

Denne artikel indeholder en detaljeret og visuel beskrivelse af en metode til indsamling og måling af biokemiske inflammatoriske og nociceptive mediatorer ved det kirurgiske sårsted efter kejsersnit. Denne humane bioassay er blevet anvendt til at bestemme korrelationer mellem såret og serum cytokinkoncentrationer og lægemiddel-medierede ændringer i sår cytokiner, chemokiner og neuropetides.

Abstract

Vi beskriver en metode, hvorved vi er i stand til at indsamle og måle biokemiske inflammatoriske og nociceptive mediatorer ved operationssåret site. Indsamling stedspecifikke biokemiske markører er vigtigt at forstå forholdet mellem niveauer i serum og kirurgiske sår, bestemme eventuelle sammenhænge mellem mediatorfrigivelse, smerte, smertestillende brug og andre resultater af interesse, og evaluere effekten af ​​systemisk og perifere lægemiddeladministrering på operationssåret biokemi. Denne metode er blevet anvendt til raske kvinder, der gennemgår elektiv kejsersnit med spinal anæstesi. Vi har målt sårekssudat og serum mediatorer ved de samme tidsintervaller som patientens smertescore og analgetika forbrug i op til 48 timer efter kejsersnit. Anvendelse af denne metode har vi været i stand til at detektere forskellige biokemiske mediatorer, herunder nervevækstfaktor (NGF), prostaglandin E2 (PG-E2) substans P, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IL-8,IL-10, IL-12, IL-13, IL-17, TNFa, INFy, G-CSF, GM-CSF, MCP-1 og MIP-1β. Undersøgelser, der anvender denne menneskelige operationssåret bioassay har fundet nogen korrelation mellem sår og serum cytokinkoncentrationer eller deres tid-release profil (J Pain 2008;. 9 (7) :650-7) 1 Vi har også dokumenteret anvendeligheden af teknikken til at identificere. lægemiddel-medierede ændringer i såret cytokin indhold (Anesth Analg 2010, 111:1452-9). 2

Introduction

Efter et kirurgisk snit, frigiver bor og migrerende inflammatoriske celler pro-og anti-inflammatoriske cytokiner, prostanoider, neuropeptider og chemokiner, der er vigtige til initiering og opretholdelse af smerte. 3,4 Evnen til at samle sitespecifikke biokemiske markører er kritisk at bestemme forholdet mellem niveauer i serum og kirurgiske sår, forstår det komplekse forhold mellem mediatorfrigivelse og kirurgisk smerte og til at kunne vurdere virkningen af ​​både systemiske og perifere lægemiddeladministrering på operationssåret biokemi. Undersøgelser har fokuseret på systemiske målinger af biokemiske mediatorer og er ikke anset stedspecifik frigivelse. 5,6 Serum målinger af cytokiner og chemokiner er muligvis ikke afspejler lokale operationssåret biokemiske begivenheder og kun viser en samlet systemisk reaktion på kirurgisk skade. Denne artikel indeholder en detaljeret og unik visuel beskrivelse af denne metode, der var first refereres i 2008 i Journal of Pain. 1 Formålet med denne Jové artikel er at give en unik og visuelt forbedret beskrivelse af metoderne.

Protocol

1. Undersøgelse protokol Opnå Institutional Review Board godkendelse og skriftligt informeret samtykke. Vælg et passende kirurgisk befolkning for forsøgets gennemførelse. Denne metode er kun blevet anvendt på kejsersnit sår men de fleste kirurgiske sår ville være passende. Overvej inklusions-og eksklusionskriterier for dit studie deltagelse. Patienter og procedurer med høje kirurgisk sårinfektion måske ikke relevant. Standardiser anæstesi og postoperativ ledelse for …

Representative Results

Anvendelse af denne metode har vi været i stand til at detektere alle biokemiske mediatorer skitseret ovenfor med undtagelse af IL-5 i sårekssudat og plasma. 1,2 Nogle yderligere cytokiner blev ikke påvist i plasma (IL-4, IL-17, TNFa, INFy , GM-CSF). 1 Tidsforløbet af målte cytokiner og chemokiner i rapporterede studier var konsistente og nåede et plateau inden for de første par timer, blev opretholdt i 24 timers observationsperiode .. 1,2 Dog NGF steg støt i den 24-timers indsam…

Discussion

Denne metode er skitseret ovenfor har vist sig at være følsom nok til at påvise biokemiske inflammatoriske og nociceptive mediatorer i sårekssudat. Prøveudtagning på forskellige tidspunkter med har også tilladt os at observere ændringer af disse mediatorer over tid. 1,2 Vi er ikke bekendt med nogen anden menneskelig operationssåret assay, der kan serielt måle frigivelsesprofilen af inflammatoriske og nociceptive mediatorer i kirurgisk sårekssudat. Resultater fra vores metode sårekssudat kollektion…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dr. Carvalho arbejde blev støttet af en forskningsbevilling fra Office of Research på kvinders sundhed og National Institute of Child Health and Human Development af National Institutes of Health (5K12 HD043452). Dr Angst modtog leverancer (On-Q PainBuster Post-Op smertelindring System) og fonde (for de biokemiske assays) fra I-Flow (Lake Forest, California).

References

  1. Carvalho, B., Clark, D. J., Angst, M. S. Local and Systemic Release of Cytokines, Nerve Growth Factor, Prostaglandin E2, and Substance P in Incisional Wounds and Serum Following Cesarean Delivery. J. Pain. 9, 650-657 (2008).
  2. Carvalho, B., Clark, D. J., Yeomans, D. C., Angst, M. S. Continuous subcutaneous instillation of bupivacaine compared to saline reduces interleukin 10 and increases substance P in surgical wounds after cesarean delivery. Anesth. Analg. 111, 1452-1459 (2010).
  3. Verri, W. A., Cunha, T. M., Parada, C. A., Poole, S., Cunha, F. Q., Ferreira, S. H. Hypernociceptive role of cytokines and chemokines: targets for analgesic drug development. Pharmacol. Ther. 112, 116-138 (2006).
  4. Watkins, L. R., Maier, S. F. Immune regulation of central nervous system functions: from sickness responses to pathological pain. J. Intern. Med. 257, 139-155 (2005).
  5. Beilin, B., Bessler, H., Mayburd, E., Smirnov, G., Dekel, A., Yardeni, I., Shavit, Y. Effects of preemptive analgesia on pain and cytokine production in the postoperative period. Anesthesiology. 98, 151-155 (2003).
  6. Wu, C. T., Jao, S. W., Borel, C. O., Yeh, C. C., Li, C. Y., Lu, C. H., Wong, C. S. The effect of epidural clonidine on perioperative cytokine response, postoperative pain, and bowel function in patients undergoing colorectal surgery. Anesth. Analg. 99, 502-509 (2004).
  7. Buvanendran, A., Kroin, J. S., Berger, R. A., Hallab, N. J., Saha, C., Negrescu, C., Moric, M., Caicedo, M. S., Tuman, K. J. Upregulation of prostaglandin E2 and interleukins in the central nervous system and peripheral tissue during and after surgery in humans. Anesthesiology. 104, 403-410 (2006).
  8. Kristiansson, M., Soop, M., Sundqvist, K. G., Soop, A., Suontaka, A. M., Blomback, M. Local vs. systemic immune and haemostatic response to hip arthroplasty. Eur. J. Anaesthesiol. 15, 260-270 (1998).
  9. Liu, S. S., Richman, J. M., Thirlby, R. C., Wu, C. L. Efficacy of continuous wound catheters delivering local anesthetic for postoperative analgesia: a quantitative and qualitative systematic review of randomized controlled trials. J. Am. Coll. Surg. 203, 914-932 (2006).
  10. Eriksson, A. S., Sinclair, R., Cassuto, J., Thomsen, P. Influence of lidocaine on leukocyte function in the surgical wound. Anesthesiology. 77, 74-78 (1992).
  11. Clark, J. D., Shi, X., Li, X., Qiao, Y., Liang, D., Angst, M. S., Yeomans, D. C. Morphine reduces local cytokine expression and neutrophil infiltration after incision. Mol. Pain. 3, 28 (2007).
  12. Webb, S. T., Ghosh, S. Intra-articular bupivacaine: potentially chondrotoxic. Br. J. Anaesth. 102, 439-441 (2009).
  13. Scott, N. B. Wound infiltration for surgery. Anaesthesia. 65, 67 (2010).
check_url/50133?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Carvalho, B., Clark, D. J., Yeomans, D., Angst, M. S. Collecting And Measuring Wound Exudate Biochemical Mediators In Surgical Wounds. J. Vis. Exp. (68), e50133, doi:10.3791/50133 (2012).

View Video