Summary

Het verzamelen van en het meten van wondexsudaat Biochemische Mediators In chirurgische wonden

Published: October 20, 2012
doi:

Summary

Dit artikel geeft een gedetailleerde en visuele beschrijving van een methodologie voor het verzamelen en meten van biochemische inflammatoire en nociceptieve bemiddelaars op de chirurgische wond na keizersnede. Deze menselijke bioassay werd gebruikt om correlaties tussen wond en serum cytokine concentraties en drug-gemedieerde veranderingen in wond cytokines, chemokines en neuropeptiden bepalen.

Abstract

We beschrijven een methode waarmee we kunnen verzamelen en biochemische inflammatoire mediatoren en nociceptieve meten op de chirurgische wond. Het verzamelen van site-specifieke biochemische markers belangrijk om te begrijpen van de relatie tussen niveaus in serum en chirurgische wond vast die associaties tussen mediatorafgifte, pijn, pijnstillend gebruik en andere uitkomsten van belang, en evalueren van het effect van systemische en perifere toediening van het geneesmiddel op chirurgische wonden biochemie. Deze methodologie is toegepast op gezonde vrouwen die een electieve keizersnede met spinale anesthesie. We hebben gemeten wondexsudaat en serum mediators op dezelfde tijdsintervallen als pijnpatiënt scores en analgetica verbruik tot 48 uur na keizersnede. Met deze methode hebben we verschillende biochemische mediatoren waaronder nerve growth factor (NGF), prostaglandine E2 (PG-E2) substance P, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7 detecteren, IL-8,IL-10, IL-12, IL-13, IL-17, TNFa, INFγ, G-CSF, GM-CSF, MCP-1 en MIP-1β. Studies van dit menselijk wond bioassay hebben geen correlaties tussen wond en serum cytokine concentraties of de time-afgifteprofiel (J Pain 2008;. 9 (7) :650-7) 1 wij gedocumenteerd de bruikbaarheid van de techniek te identificeren. drug-gemedieerde veranderingen in de wond cytokine-inhoud (Anesth Analg 2010; 111:1452-9). 2

Introduction

Na een chirurgische incisie, verblijvende en migrerende ontstekingscellen vrij pro-en anti-inflammatoire cytokines, prostanoïden, neuropeptiden en chemokines die belangrijk zijn voor het initiëren en onderhouden pijn. 3,4 De mogelijkheid om site-specifieke biochemische markers verzamelen is essentieel voor het bepalen tussen niveaus in serum en chirurgische wond begrijpen complexe relatie tussen mediatorafgifte en chirurgische pijn en kunnen het effect van zowel systemische als perifere toediening evalueren operatiewond biochemie. Studies gericht op systemische metingen van biochemische mediators en niet als plaats-specifieke afgifte. 5,6 Serum metingen van cytokines en chemokines hoeft niet representatief voor lokale operatiewond biochemische gebeurtenissen en slechts dan een globale systemische reactie op chirurgische letsel. Dit artikel geeft een gedetailleerde en unieke visuele beschrijving van deze methodiek dat was sparst waarnaar verwezen wordt in 2008 in de Journal of Pain. 1 Het doel van deze Jove artikel is om een unieke en visueel verbeterde beschrijving van de methoden.

Protocol

1. Studie protocol Verkrijgen van Institutional Review Board goedkeuring en schriftelijke informed consent. Selecteer een geschikte chirurgische populatie voor onderzoek uit te voeren. Deze methodologie is alleen van toepassing op keizersnede wonden, maar de meeste chirurgische wonden passend zou zijn. Overweeg in-en exclusiecriteria voor uw deelname aan het onderzoek. Patiënten en procedures met hoge tarieven van chirurgische wondinfectie wellicht niet geschikt. Standaardiseren…

Representative Results

Met deze methode hebben we kunnen alle biochemische mediators hierboven beschreven, met uitzondering van IL-5 in wondexsudaat en plasma gedetecteerd. 1,2 Enkelen cytokines werden niet gedetecteerd in plasma (IL-4, IL-17, TNFa, INFγ , GM-CSF). 1 Het tijdsverloop van de gemeten cytokines en chemokines in de gerapporteerde studies consistent waren, het bereiken van een plateau in de eerste uren dat werd volgehouden voor de 24 uur observatieperiode .. 1,2 Echter, NGF gestaag toegenomen in d…

Discussion

Deze methodologie hierboven beschreven is gebleken is gevoelig genoeg om biochemische inflammatoire mediatoren en nociceptieve detecteren wondvocht. Bemonstering op verschillende tijdstippen heeft ook ons toegestaan ​​om veranderingen van deze mediatoren in de tijd. 1,2 Wij zijn niet op de hoogte van andere menselijke operatiewond test die serieel kan meten het afgifteprofiel van inflammatoire en nociceptieve mediatoren in chirurgische wond exsudaat te observeren. Resultaten van onze methodiek wondexsudaa…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dr Carvalho's werk werd ondersteund door een onderzoekssubsidie ​​van het Office of Research on Women's Health en National Institute of Child Health and Human Development van de National Institutes of Health (5K12 HD043452). Dr Angst levert (On-Q PainBuster Post-Op Pain Relief System) en fondsen (voor de biochemische assays) ontvangen van I-Flow (Lake Forest, Californië).

References

  1. Carvalho, B., Clark, D. J., Angst, M. S. Local and Systemic Release of Cytokines, Nerve Growth Factor, Prostaglandin E2, and Substance P in Incisional Wounds and Serum Following Cesarean Delivery. J. Pain. 9, 650-657 (2008).
  2. Carvalho, B., Clark, D. J., Yeomans, D. C., Angst, M. S. Continuous subcutaneous instillation of bupivacaine compared to saline reduces interleukin 10 and increases substance P in surgical wounds after cesarean delivery. Anesth. Analg. 111, 1452-1459 (2010).
  3. Verri, W. A., Cunha, T. M., Parada, C. A., Poole, S., Cunha, F. Q., Ferreira, S. H. Hypernociceptive role of cytokines and chemokines: targets for analgesic drug development. Pharmacol. Ther. 112, 116-138 (2006).
  4. Watkins, L. R., Maier, S. F. Immune regulation of central nervous system functions: from sickness responses to pathological pain. J. Intern. Med. 257, 139-155 (2005).
  5. Beilin, B., Bessler, H., Mayburd, E., Smirnov, G., Dekel, A., Yardeni, I., Shavit, Y. Effects of preemptive analgesia on pain and cytokine production in the postoperative period. Anesthesiology. 98, 151-155 (2003).
  6. Wu, C. T., Jao, S. W., Borel, C. O., Yeh, C. C., Li, C. Y., Lu, C. H., Wong, C. S. The effect of epidural clonidine on perioperative cytokine response, postoperative pain, and bowel function in patients undergoing colorectal surgery. Anesth. Analg. 99, 502-509 (2004).
  7. Buvanendran, A., Kroin, J. S., Berger, R. A., Hallab, N. J., Saha, C., Negrescu, C., Moric, M., Caicedo, M. S., Tuman, K. J. Upregulation of prostaglandin E2 and interleukins in the central nervous system and peripheral tissue during and after surgery in humans. Anesthesiology. 104, 403-410 (2006).
  8. Kristiansson, M., Soop, M., Sundqvist, K. G., Soop, A., Suontaka, A. M., Blomback, M. Local vs. systemic immune and haemostatic response to hip arthroplasty. Eur. J. Anaesthesiol. 15, 260-270 (1998).
  9. Liu, S. S., Richman, J. M., Thirlby, R. C., Wu, C. L. Efficacy of continuous wound catheters delivering local anesthetic for postoperative analgesia: a quantitative and qualitative systematic review of randomized controlled trials. J. Am. Coll. Surg. 203, 914-932 (2006).
  10. Eriksson, A. S., Sinclair, R., Cassuto, J., Thomsen, P. Influence of lidocaine on leukocyte function in the surgical wound. Anesthesiology. 77, 74-78 (1992).
  11. Clark, J. D., Shi, X., Li, X., Qiao, Y., Liang, D., Angst, M. S., Yeomans, D. C. Morphine reduces local cytokine expression and neutrophil infiltration after incision. Mol. Pain. 3, 28 (2007).
  12. Webb, S. T., Ghosh, S. Intra-articular bupivacaine: potentially chondrotoxic. Br. J. Anaesth. 102, 439-441 (2009).
  13. Scott, N. B. Wound infiltration for surgery. Anaesthesia. 65, 67 (2010).
check_url/50133?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Carvalho, B., Clark, D. J., Yeomans, D., Angst, M. S. Collecting And Measuring Wound Exudate Biochemical Mediators In Surgical Wounds. J. Vis. Exp. (68), e50133, doi:10.3791/50133 (2012).

View Video