Summary

Samle og måle såreksudat biokjemiske mediatorer i kirurgiske sår

Published: October 20, 2012
doi:

Summary

Denne artikkelen er en detaljert og visuell beskrivelse av en metode for å samle og måle biokjemiske inflammatoriske og nociceptive mediatorer ved kirurgisk sårstedet etter keisersnitt. Dette menneskelige bioassay har blitt brukt for å bestemme sammenhenger mellom såret og serum cytokin konsentrasjoner og narkotika-medierte endringer i såret cytokiner, chemokines og neuropetides.

Abstract

Vi beskriver en metodikk som vi er i stand til å samle og måle biokjemiske inflammatoriske og nociceptive mediatorer ved kirurgisk sårstedet. Samle stedsspesifikke biokjemiske markører er viktig å forstå sammenhengen mellom nivåer i serum og operasjonssåret, avgjøre eventuelle sammenhenger mellom megler utgivelse, smerte, bruk av smertestillende midler og andre utfall av interesse, og evaluere effekten av systemisk og perifer Drug Administration på operasjonssåret biokjemi. Denne metoden har blitt brukt til friske kvinner som gjennomgår keisersnitt levering med spinalanestesi. Vi har målt såreksudat og serum meglere på samme tidsintervaller som pasientens smerte score og smertestillende forbruk for opptil 48 timer etter keisersnitt. Ved hjelp av denne metodikken har vi vært i stand til å oppdage forskjellige biokjemiske mediatorer inkludert nervevekstfaktor (NGF), prostaglandin E2 (PG-E2) substans P, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IL-8,IL-10, IL-12, IL-13, IL-17, TNFa, INFγ, G-CSF, GM-CSF, MCP-1 og MIP-1β. Studier som søker denne menneskelige operasjonssåret bioassay har funnet noen korrelasjon mellom såret og serum cytokin konsentrasjoner eller deres tid-utgivelsen profil (J Pain 2008;. 9 (7) :650-7) 1 Vi har også dokumentert nytten av teknikk for å identifisere. narkotika-medierte endringer i såret cytokin innhold (Anesth Analg 2010; 111:1452-9). 2

Introduction

Etter et kirurgisk innsnitt, bosatt og migrering betennelsesceller frigi pro-og anti-inflammatoriske cytokiner, prostanoider, neuropeptider og kjemokiner som er viktige for å initiere og opprettholde smerte. 3,4 Evnen til å samle stedsspesifikke biokjemiske markører er kritisk for å bestemme forholdet mellom nivåer i serum og operasjonssåret, forstår det komplekse forholdet mellom mellommann utgivelsen og kirurgisk smerte, og for å være i stand til å evaluere effekten av både systemisk og perifer legemiddeladministrasjon på operasjonssåret biokjemi. Studier har fokusert på systemiske målinger av biokjemiske mediatorer og har ikke vurdert stedsspesifikke utgivelse. 5,6 Serum målinger av cytokiner og chemokines kan ikke være representative for lokale kirurgiske sår biokjemiske hendelser og bare indikerer en global systemisk respons på kirurgisk skade. Denne artikkelen gir en detaljert og unik visuell beskrivelse av denne metoden som var edelgranst referert i 2008 i Journal of Pain. 1 Målet med denne Jove artikkelen er å gi en unik og visuelt forbedret beskrivelse av metoder.

Protocol

1. Studien Protocol Skaffe Institutional Review Board godkjennelse og skriftlig informert samtykke. Velge en passende kirurgisk befolkningen for studien oppførsel. Denne metodikken har bare blitt brukt til keisersnitt sår, men de fleste kirurgiske sår ville være passende. Vurdere inkludering og ekskludering kriterier for studien deltakelse. Pasienter og prosedyrer med høy forekomst av kirurgiske sårinfeksjoner kan ikke være hensiktsmessig. Standardisere anestesi og postope…

Representative Results

Ved hjelp av denne metodikken har vi vært i stand til å detektere alle biokjemiske mediatorer skissert ovenfor med unntak av IL-5 i såreksudat og plasma. 1,2 Noen ytterligere cytokiner ble ikke påvist i plasma (IL-4, IL-17, TNFa, INFγ , GM-CSF). en Tidsforløpet av målte cytokiner og chemokines i rapporterte studiene var konsekvent, nådde et platå i løpet av de første timene som ble påført for 24-timers observasjonsperiode .. 1,2 Men NGF økt jevnt over 24-timers innsamling p…

Discussion

Denne metodikken er beskrevet ovenfor er blitt funnet å være følsom nok til å detektere biokjemiske inflammatoriske og nociceptive mediatorer i såreksudat. Prøvetaking i ulike tidspunkter har også tillatt oss å observere endringer av disse meglere over tid. 1,2 Vi er ikke kjent med at andre menneskelige operasjonssåret analyse som kan serielt måle frisettingsprofil av inflammatoriske og nociceptive meklarar i operasjonssåret eksudat. Resultater fra vår metodikk sårvæsken samling fra det kirurgis…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dr. Carvalho arbeid ble støttet av et forskningsstipend fra Office of forskning på kvinners helse og National Institute of Child Health and Human Development av National Institutes of Health (5K12 HD043452). Dr Angst fikk forsyninger (On-Q PainBuster Post-Op Pain Relief System) og fond (for de biokjemiske analyser) fra I-Flow (Lake Forest, California).

References

  1. Carvalho, B., Clark, D. J., Angst, M. S. Local and Systemic Release of Cytokines, Nerve Growth Factor, Prostaglandin E2, and Substance P in Incisional Wounds and Serum Following Cesarean Delivery. J. Pain. 9, 650-657 (2008).
  2. Carvalho, B., Clark, D. J., Yeomans, D. C., Angst, M. S. Continuous subcutaneous instillation of bupivacaine compared to saline reduces interleukin 10 and increases substance P in surgical wounds after cesarean delivery. Anesth. Analg. 111, 1452-1459 (2010).
  3. Verri, W. A., Cunha, T. M., Parada, C. A., Poole, S., Cunha, F. Q., Ferreira, S. H. Hypernociceptive role of cytokines and chemokines: targets for analgesic drug development. Pharmacol. Ther. 112, 116-138 (2006).
  4. Watkins, L. R., Maier, S. F. Immune regulation of central nervous system functions: from sickness responses to pathological pain. J. Intern. Med. 257, 139-155 (2005).
  5. Beilin, B., Bessler, H., Mayburd, E., Smirnov, G., Dekel, A., Yardeni, I., Shavit, Y. Effects of preemptive analgesia on pain and cytokine production in the postoperative period. Anesthesiology. 98, 151-155 (2003).
  6. Wu, C. T., Jao, S. W., Borel, C. O., Yeh, C. C., Li, C. Y., Lu, C. H., Wong, C. S. The effect of epidural clonidine on perioperative cytokine response, postoperative pain, and bowel function in patients undergoing colorectal surgery. Anesth. Analg. 99, 502-509 (2004).
  7. Buvanendran, A., Kroin, J. S., Berger, R. A., Hallab, N. J., Saha, C., Negrescu, C., Moric, M., Caicedo, M. S., Tuman, K. J. Upregulation of prostaglandin E2 and interleukins in the central nervous system and peripheral tissue during and after surgery in humans. Anesthesiology. 104, 403-410 (2006).
  8. Kristiansson, M., Soop, M., Sundqvist, K. G., Soop, A., Suontaka, A. M., Blomback, M. Local vs. systemic immune and haemostatic response to hip arthroplasty. Eur. J. Anaesthesiol. 15, 260-270 (1998).
  9. Liu, S. S., Richman, J. M., Thirlby, R. C., Wu, C. L. Efficacy of continuous wound catheters delivering local anesthetic for postoperative analgesia: a quantitative and qualitative systematic review of randomized controlled trials. J. Am. Coll. Surg. 203, 914-932 (2006).
  10. Eriksson, A. S., Sinclair, R., Cassuto, J., Thomsen, P. Influence of lidocaine on leukocyte function in the surgical wound. Anesthesiology. 77, 74-78 (1992).
  11. Clark, J. D., Shi, X., Li, X., Qiao, Y., Liang, D., Angst, M. S., Yeomans, D. C. Morphine reduces local cytokine expression and neutrophil infiltration after incision. Mol. Pain. 3, 28 (2007).
  12. Webb, S. T., Ghosh, S. Intra-articular bupivacaine: potentially chondrotoxic. Br. J. Anaesth. 102, 439-441 (2009).
  13. Scott, N. B. Wound infiltration for surgery. Anaesthesia. 65, 67 (2010).

Play Video

Cite This Article
Carvalho, B., Clark, D. J., Yeomans, D., Angst, M. S. Collecting And Measuring Wound Exudate Biochemical Mediators In Surgical Wounds. J. Vis. Exp. (68), e50133, doi:10.3791/50133 (2012).

View Video