Summary
在这里，我们提出了一个非人灵长类动物模型，在存在父亲抑制和母亲忽视的情况下，母婴干预母乳喂养障碍。伴侣模型视频补充了教育，以支持灵长类动物和人类护理人员处理有母乳喂养问题（如疼痛）的婴儿。
Abstract
在出生率下降、人口老龄化和家庭规模缩小的环境中，父母在围产期和新生儿期的心理压力继续增加。虐待和忽视儿童案件的增加，很可能是缺乏经验和知识不足的父母所为，因此有必要在护理和助产培训中对儿童保育和干预技术进行教育。特别是，母亲和婴儿之间在生命早期形成依恋关系至关重要。为了准确教授有关母子依恋形成干预技术的敏感和全面的信息，需要逼真的视频和教育材料。虽然有伪教育材料，但它们在解释复杂的现实主义方面可能受到限制，特别是支持涉及父母和孩子的母乳喂养，并鼓励两者之间的互动。
在之前对普通狨猴（Callithrix jacchus）模型进行的一项研究中，我们通过24小时的持续感应对婴儿的喂养和养育进行了实验控制，并收集了1个月的心理指标定量数据，这些指标可能转化为心理发展。通过多变量分析对这些数据进行年龄依赖性动态可视化，推断出早期父母喂养与心理生物学节律形成之间的因果关系。在同一个灵长类动物模型中，我们发现了一个自发的母乳喂养失败病例，其中父亲抑制了新生儿的喂养，而母亲似乎放弃了养育，导致婴儿在临床上显着的体重减轻。
因此，我们探索了促进母婴互动的干预技术。母亲接受过训练，让婴儿自发地探索她的乳房。最初，母亲拒绝展示喂养姿势，可能是由于与乳房肿胀相关的疼痛。使用按摩来软化乳房并重新引入喂养。我们假设，通过鼓励每个父母和孩子的自发性来激活本能依恋形成机制是成功喂养干预的关键。
Introduction
围产期和新生儿期对父母来说往往是有压力的。这在像日本这样的国家是一个特别的问题，因为这些国家的低出生率、人口老龄化和生活在核心家庭中的倾向，直接接触育儿的机会有限。由于缺乏有关育儿的机构支持的教育，这种情况更加严重1.在这种有限的经验和与贫困相关的社会问题的背景下，例如，在年轻夫妇中，在父母与压力有关的虐待和忽视下，与母乳喂养问题相关的产后生长障碍的风险很高2。
母乳喂养与婴儿分离的母亲在分娩后建立母乳喂养对依恋的形成至关重要，“母乳喂养和配方奶喂养的比较表明，前者对新生儿丰富情绪的发展有影响”，这表明母乳喂养与依恋形成之间存在很强的因果关系3.然而，如果婴儿或母亲出现医疗问题，为了提高早期母乳喂养的成功率和产后生长发育，通常需要将婴儿与母亲分开，以便对新生儿进行适当的营养管理。在新生儿稳定后，必须为母亲提供指导和支持，以成功建立母乳喂养。父亲、亲密伴侣和其他支持人员应包括在本指导中，以学习如何养育他们的孩子并为母乳喂养提供适当的支持4.大多数现有文献（例如，“从分娩后立即到建立母乳喂养的环境和护理干预”）主要侧重于对母亲的干预和支持5.预计将更好地向助产士和护理专业的学生传授意识和具体干预技能，以支持涉及父母和孩子的母乳喂养，并鼓励两者之间的互动。
此前，我们开发了普通狨猴（Callithrix jacchus）作为小型非人灵长类动物模型，以探索围产期和新生儿干预的心理生物学基础6。我们设计了一个系统，该系统使用社会场景依赖性变化7,8,9和生物分子活动10,11,12来定量识别不同环境中感官（视觉，听觉，触觉，嗅觉）感知控制的发展变化。使用主成分分析（PCA），我们能够提取多个解释性行为因素，这使我们能够重现负责这些动物社会心理功能的复杂神经网络。这种定量情绪状态转换（BOUQUET）方法的行为输出分析结果表明，在同一评价系统中，成年男性和女性之间的社交互动可以基于熟悉度依赖性特征进行定量可视化11。我们假设常见狨猴行为的差异反映了每个人过去的心理认知学习。
在这项研究中，我们比较了三种条件下的动物：儿童相互互动的社会环境中的兄弟姐妹，仅与父母进行社交互动的单个孩子，以及类似于人类寄养的情况，其中幼崽与任何遗传家庭成员分开。BOUQUET分析揭示了群体间社会反应行为发展时间过程的定量差异，表明发展过程中的家庭互动（即父母和兄弟姐妹）会影响社会心理功能的形成13。此外，我们使用连续红外成像分析了狨猴从出生后第15天到第45天的社会心理发展，在复制寄养的情况下，研究人员提供了配方奶粉。包括体表温度、活动和位置偏好在内的数据表明存在独特的年龄依赖性模式。进一步的分析表明，初始喂养期间的经验可能显着影响了发育 1 个月后的行为节律14。众所周知，昼夜节律及其紊乱与人类适应日益复杂的社会所需的心理功能密切相关，它们的形成受到幼儿经历的影响。
本报告遵循先前的研究结果11,13,14，探讨了干预一个普通狨猴家庭母乳喂养失败案例的可行性，该家庭表现出父亲的虐待行为和母亲的忽视行为。虽然狨猴通常产生多合子多胞胎，并且以不仅由母亲而且在父亲和哥哥姐姐的合作下共同抚养后代而闻名，但这种灵长类动物模型涉及核心家庭、父母和他们唯一的后代，旨在模仿人类社会状况的现状。第一次普通狨猴的父母表现出去抑制的行为，随后停止母乳喂养和遗弃婴儿，导致婴儿无法茁壮成长。通过视频记录评估了社会喂养灵长类动物模型中这种依恋功能障碍病例的干预和恢复过程。症状和治疗效果由相对于生存极限的体重增加或减少来表示，参考先前发表的标准15,16。本研究的更大目标是确定人类临床干预对实施母乳喂养的母亲和父亲以及支持他们的助产士的教育的有效性。尽管通过自然选择遗弃具有某些问题的脆弱后代可能被归类为普通狨猴的正常行为，但该临床模型旨在探索人类支持健康和福祉的进化策略，以实现所有生命的尊严。
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Protocol
该研究方案已获得埼玉医科大学机构动物护理和使用委员会 （2476） 的批准。
1. 动物
- 为一对父母和他们的普通狨猴（Callithrix jacchus）的初次婴儿提供住所，他们没有在光密封的孵化笼中抚养任何婴儿的经验，保持恒定温度（25-30°C）和12小时的光/暗循环）。在光照期间将每个笼子的光强度设置为 750-930 lx，在黑暗期间将每个笼子的光强度设置为 0 lx。确保父母在喂养和清洁方面健康。
注：笼子的尺寸符合日本环境省《关于实验动物的护理、饲养和减轻疼痛的标准》。
2.体重不足和父母养婴异常的诊断
- 请参阅 图 1 中可视化的一般诊断和干预流程（A：婴儿， B：母亲）。当发现婴儿体重不足时，根据婴儿是否存在五种行为（哭泣、依附母亲、头部控制、生根反射、吸吮）为婴儿选择干预方法，根据是否存在五种母亲行为（喂养意愿、乳房增大、婴儿吸吮接受、 乳汁分泌和疼痛表情）。
注意：自始至终注意不要交叉污染动物的气味。
3.动物特征
- 出生时胎龄
- 记下普通狨猴的足月妊娠期约为 140-150 天。相比之下，人类标准完整术语 17。
- 出生和发育体重
- 年龄和性别定义
- 作为一天前的表示法，将生日定义为出生后第 0 天 （PD 0）。通过检查外生殖器确定婴儿的性别。
- 先天性畸形或疾病的识别
- 检查婴儿是否有任何先天性畸形或疾病，特别注意可能导致喂养困难的畸形或疾病（例如腭裂）。
- 体重测量
- 每天使用以 0.1 g 为增量的秤称量婴儿的体重，以检查他们的喂养量。准备一个干净的塑料盒或碗，内衬软纸巾，以抱住婴儿并在称重时保持其体温。将准备好的盒子或碗放在秤上，将婴儿放入准备好的容器中，并记录体重。每天大约在同一时间称重，与标准15,16进行比较。
注意： 测量体重时要采取预防措施，以防止婴儿在体重秤上逃脱或受到伤害。
- 每天使用以 0.1 g 为增量的秤称量婴儿的体重，以检查他们的喂养量。准备一个干净的塑料盒或碗，内衬软纸巾，以抱住婴儿并在称重时保持其体温。将准备好的盒子或碗放在秤上，将婴儿放入准备好的容器中，并记录体重。每天大约在同一时间称重，与标准15,16进行比较。
- 体重增加图
- 可视化每天体重增加的图表。出生时和第二天的体重预计超过27克，然后根据新生婴儿生存所需体重的菌落记录，每天增加约1克（图2）。
- 评估牛奶摄入量
- 通过在喂养前后称量婴儿的体重来评估牛奶摄入量。但是，请注意，将婴儿与父母分开称重本身可能会造成压力并干扰养育行为。如果预计母乳喂养和生长正常，请在第一周将体重测量减少到每天一次。
- 牙冠、臀部和长度测量 （CRL）
- 将婴儿与父母轻轻分开，快速测量CRL，方法是将婴儿平放在俯卧位上，靠着尺子并确定从头顶到尾巴底部的长度（补充图S1）。测量后，立即将婴儿送回父母身边。
- 年龄和性别定义
- 婴儿的母乳喂养行为
- 确认婴儿正在执行四种行为模式（图1A）。
- 确定婴儿是否充分地依附在母亲的身体上。
- 观察婴儿的头部是否因自身全身肌肉紧张而向前弯曲到母亲的身体。
- 注意婴儿是否在父母的帮助下自行探索并到达母亲的，这是人类吸吮“生根”反射。
- 当与父母分开时，大声叫phee 11,12。
- 确认婴儿正在执行四种行为模式（图1A）。
- 母亲的母乳喂养行为和功能
- 在母亲中确认这些行为模式和功能（图1B）。
- 确认母亲对新生儿进行母乳喂养的合作接受。
- 确认当母亲的乳房变得紧绷时，母亲鼓励婴儿吸吮，然后乳房变得不那么紧绷，突出。
- 用手指按压乳房侧来支持母亲的母乳分泌（图3A）。检查乳房张力是否不太硬且没有肿胀。
注意： 戴上柔软厚实的牛皮手套，以防止母亲咬人，并用非惯用手握住母亲。 - 观察母亲的表情，寻找疼痛的迹象，例如她的眼睛里有泪水，她的上下牙齿闭合和暴露，这可能是她拒绝婴儿吸吮的原因。
- 在母亲中确认这些行为模式和功能（图1B）。
- 父亲的养育行为
- 观察父亲的养育行为。观察父亲是否过度怀抱婴儿，以至于充分干扰了母亲的母乳喂养，从而扰乱了哺乳。父亲对婴儿的帮助通常是有限的。
- 针对母亲和婴儿的干预措施，以恢复自然母乳喂养
- 当发现体重不足的婴儿（小于27克）时，观察家庭关系并寻找任何异常的父母养育婴儿的行为。潜在的父母异常行为会造成伤害婴儿或干扰喂养（虐待）或放弃喂养（忽视）的高风险。
- 当婴儿太虚弱而无法探索或依附于母亲并自行开始哺乳时，将其与母亲分开，并根据体重的需要，用口服注射器给予最少量的配方奶粉（例如，0.5 mL Lebens Haihai，Wakodo，浓度为三分之二）（图 1A，B）。
- 作为针对母亲的第一个干预步骤，通过从乳晕底部向手指之间的按压和按摩三步以打开乳管来软化硬化的区域（图3B）。从奶嘴中稍微渗出乳汁以散发出气味，以鼓励婴儿探索。
- 接下来，轻轻地握住母亲的身体，将婴儿放在母亲的乳房附近，以鼓励它寻找母亲的（图1C）。引导母亲抬起手臂，以改善婴儿的通道。婴儿找到后，继续乳房按摩以帮助分泌乳汁。确认母亲的乳房压力减轻，可能缓解了疼痛，并且突出。
- 在干预期间，偶尔进行处理并与家人建立融洽的关系。
- 每天重复一次或多次这种干预，直到母亲自愿允许喂养并且婴儿学会自发吸吮。当婴儿的喂养受到父亲的抑制时，将父亲从家庭中移走，直到婴儿的发育得到改善。
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Representative Results
体重不足和父母养婴异常的诊断
2019 年 5 月，一对来自埼玉医科大学殖民地的五岁普通狨猴 （Callithrix jacchus） 一夜之间生下了第一对后代（双胞胎）。这是一次自然的阴道分娩。只有一个后代（雄性）被发现还活着，并拥抱着母亲的尸体。另一名兄弟姐妹在死亡数小时后被发现死亡，出生体重（小于25克）和性别不明。在第一次围产期检查时，母亲和后代之间是否存在乳汁摄入行为是未知的。
婴儿每天大约在同一时间称重。交货日重量为26克，低于标准的15,16。新生儿生存体重的菌落记录最小体重为27克（图2）。CRL 为 9 cm。从第一天开始，父亲就经常被观察到持续舔婴儿。在我们常见的狨猴群落中从未发现过这种父性行为。到第2天，婴儿体重减轻（图4，PD2（1），达到我们育种史上记录的最低体重23至24克（之前的最小记录;27克），并且似乎没有开始哺乳。婴儿似乎没有力量开始和维持自发的吸吮行为。
由于婴儿的状况，我们在录制的视频中搜索了父母抚养行为异常的任何证据。父亲还表现出奇怪的行为，除了持续的舔舐外，他似乎在鼓励婴儿吸吮他的乳房（见随附的视频）。母亲有时会走近父亲抚摸婴儿;然而，父亲似乎把母亲赶走了，导致母乳喂养失败——乳管闭合和乳房绷紧，然后母亲因为疼痛而拒绝让婴儿吸吮。母亲的乳房增大看起来很痛苦，她似乎不愿意被吸吮，翻译过来就是“被抛弃”。这种异常的父母行为被定义为“虐待”或“遗弃”，这些行为会阻止婴儿自发进食。确定需要重症监护。
配方奶粉和母乳的结合
因此，第一次喂养干预（通过注射器提供 0.5 mL 配方奶粉）发生在出生后第 2 天 （PD2） 的 10：30 小时（图 4A）。幸运的是，在进一步干预之前，证实婴儿保持了生根反射（新生儿阶段最重要的神经功能之一）和大声哭泣的能力，产生了典型的“Phee call”11,12,13。在第 2 天的 12：30 和 17：30 增加了两次额外的配方奶喂养，导致体重增加 1 g 至 25 g。
指导性临床护理：母婴自愿参与母乳喂养
第2天，母乳喂养干预开始。母亲被手持，她充血的乳房由干预者进行数字按摩（图4B）。接下来，将婴儿放在母亲的身体上，并鼓励他们自发地寻找（图4C）。母亲保持着试探性的姿势，表现出有限的抵抗力。干预者引导母亲抬起手臂以改善通道。在此过程中，婴儿被确认在连续进食。当婴儿开始吸吮时，母亲表现出一些不情愿，可能是由于与乳房肿胀相关的疼痛。随着护理的进行，乳房似乎变软了，可能缓解了疼痛。
第3天11时30分，父亲再次抱着婴儿，妨碍婴儿接触母亲进行母乳喂养。此时，婴儿的体重已降至23克，需要进一步干预如下。父亲与家人分离，婴儿被注射器喂食0.8毫升配方奶粉，并鼓励婴儿母乳喂养。在 13：30 h 和 16：30 h，发生 0.9 mL 配方奶粉和母乳喂养的组合。18：30时，婴儿体重25g，母子俩似乎都习惯了母乳喂养支持（图4）。此时已停止补充配方奶粉，以避免过度喂养。体重在第 4 天增加到 26.8 克，在第 5 天增加到 28 克。通过反复的乳房按摩和鼓励婴儿的积极探索，婴儿很快学会了母乳喂养，并显示出稳定的体重增加（图4，产后第12天）。此外，母亲开始通过主动举起手臂来促进母乳喂养（图4D）。
图1：关于常见狨猴母乳喂养的两份诊断和干预流程图。 （a） 婴儿;（二）母亲。 请点击这里查看此图的较大版本.
图 2：体重与发育增长的平均值和标准误差以及我们殖民地 27 g 的最小存活记录进行比较。 深灰色点和线：10 名新生儿的体重平均值和标准误差。红线：这个新生儿发育不良的研究案例。 请点击这里查看此图的较大版本.
图3：妈妈的乳房按摩，通过打开乳腺导管和分泌乳汁来支持乳汁分泌。 （A） 母乳分泌的侧压（蓝色箭头）。（B） 手指从乳晕根部向捏三步，打开乳管。 请点击这里查看此图的较大版本.
图4：体重不足的诊断，低于最低生存记录。 婴儿从出生后 （PD） 2（生存所需的干预）到 12 日（标准增加，每天约 1 克）的体重记录表明了三种干预措施 A、 B 和 C 前后的发育状况，目标行为示例 D。（A） 用注射器补充配方奶粉。（B） 软化乳房，从中渗出乳汁。（C） 抱着母亲，让婴儿下床探索。（D） 母亲在母乳喂养婴儿时的配合姿势。 请点击这里查看此图的较大版本.
补充图S1：幼狨猴的冠部、臀部、长度测量值。请点击此处下载此文件。
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Discussion
父母照顾不同物种的婴儿需要相互的生理和心理考虑 7,9,10,12,13,14,18,19,20,21,22,23,24 .缺乏经验的父母的状况可能模拟了在出生率下降和核心家庭的现代环境中照顾孩子的人类父母的状况。因此，该协议旨在对风险和干预进行比较灵长类动物学检查，尽管只提出了一个经验示例。我们进行了临床干预，以支持初次为狨猴父母的新生儿建立母乳喂养，但新生儿体重没有适当增加。在这对夫妇中，父亲对婴儿和母亲的行为可能阻止了适当的母乳喂养，导致婴儿体重减轻。
干预包括将父亲与母亲和婴儿分开，通过按摩软化母亲的乳房，并鼓励婴儿探索乳房。当婴儿到达并衔乳时，进一步的按摩激活了喂养。配方奶粉是用注射器喂养的，以补充营养，导致体重增加。重复一系列干预措施以鼓励婴儿探索乳房，最终导致母亲和婴儿之间成功的自愿吸吮和依恋。反复的干预步骤引导着母婴在自主喂养行为上的合作逐渐发展。这一成功证实了与喂养和其他养育行为相关的社会纽带形成机制的存在，正如我们在之前使用 BOUQUET 的研究中预测的那样，BOUQUET 是一种用于详细和全面的种间行为和生理结构可视化的分析方法14。此外，这项研究表明，母亲和婴儿之间的自发互动在评估母乳喂养障碍中可能很重要。
在配方奶喂养期间，婴儿继续发出“phee”叫声，大声、长叫，持续几秒钟25.我们之前的研究已经定量证实，随着狨猴从幼年阶段发展到年轻成年阶段，“phee”的叫声变得不那么频繁13.“phee”呼叫是相隔距离的个体之间交换的一种社交交流形式 26,27.它也可以用作新生儿与其非语言护理人员的沟通媒介。由于在这项研究中没有抑制“phee”叫声，即使婴儿体重明显不足，它们也可能是干预成功所必需的。在实施喂养干预措施（例如人类婴儿的哭声）时，“phee”叫声的存在和频率也许可以用作改善的指标13。
在这种情况下，我们可以诱导狨猴母亲和婴儿学习适当的喂养行为。在人类中，改善拒绝抚养孩子的母亲的心理状态将具有挑战性，因为强迫母亲与后代互动是不可能的。因此，本案例研究中最重要的发现是，干预母乳喂养失败的最佳方法可能是支持母婴依恋的形成22,23。在这个过程中，最重要的因素可能是新生儿的自发探索29。一个重要的步骤也可能是提供足够的营养（如通过配方奶粉补充提供）来支持生物生长和完成与奖励系统相关的神经回路，使婴儿能够按照视觉和嗅觉线索自行搜索并到达8,22。
作为一个可能的假设，婴儿本身可能是异常的，并且没有提供足够的线索来引起父母的照顾。为了提高早期母乳喂养的成功率和产后生长发育，如果婴儿或母亲出现医疗问题，通常需要将婴儿与母亲分开，以便对新生儿进行适当的营养管理。在新生儿稳定后，必须为母亲提供指导和支持，以成功建立母乳喂养。这种围绕家庭社会问题的常见狨猴罕见模型必须有助于提醒我们发展精神病学中的某种人类策略。虽然日本的虐待案件数量在增加，但鼓励父亲休育儿假并积极享受育儿的比例一直在稳步增加30，普通狨猴的育儿方式可能接近典范。狨猴爸爸抱着婴儿并不是一种异常行为，尽管这种情况似乎是因为父亲一直用力和过度地舔婴儿的脸。作为另一个假设，母亲可能因为乳房疼痛而拒绝了这个婴儿并且不想喂养它31.该协议必须建议对人类此类问题的干预示例。由于本文中的声明仅来自对一个单户单元的观察，其中经产物种32 中的单个婴儿与人类不同，因此需要进一步的研究将此类结果与人类的观察结果进行比较。
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Disclosures
作者声明不存在财务或其他利益冲突。
Acknowledgments
我们感谢埼玉医科大学实验动物系的所有成员。我们感谢山口大学和东北大学的研究支持。这项研究得到了 JSPS KAKENHI 授权号 JP 16K10106、17K18648 和 19K08305 的支持。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Specification | |||
| Common Marmoset | Self Breeding | ||
| Mother 5 year-old Number: 1 |
|||
| Father 5 year-old Number: 1 |
|||
| infant 0-13 day-old Number: 1 |
|||
| Formula Milk | Lebens Haihai, Wakodo Number: 1 |
||
| distilled water | |||
| Plastic glove | powder-free | ||
| Syringe | 1 mL Number: 1 |
||
| Video Cemera | Sony Handycam Number: 1 |
||
| iPhone camera Number: 1 |
|||
| Weight Scale | 0.1 g increment Number: 1 |
References
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