小鼠卵母细胞的细胞核移植到

Summary

这部电影的协议，旨在帮助学习核转移。

Abstract

核移植到未受精的卵母细胞可以分化的细胞恢复发展潜力。这表明，底层的发育，分化和老化的过程，而不是遗传过程的后生。这些过程的可逆性打开令人兴奋的观点，在基础研究和在更遥远的未来，在再生医学。在小鼠胚胎干细胞可以从克隆胚胎植入前胚胎。这种胚胎干细胞会引起成人的有机体的所有细胞类型的能力。更重要的是，这些细胞是基因完全相同的捐助。如果适用于人类，这将允许从病人的干细胞的推导。然后将这些细胞可以分化成病人受影响的细胞类型，并研究在体外，或用来替换损坏或丢失的细胞。在小鼠核移植的研究仍然是重要的，因为它可以告知我们有关核重编程的原则。这部电影和所附议定书的目的是帮助学习在小鼠核移植，这种方法最初教授柳町（和歌山等，1998）集团开发的。

Protocol

准备工作： 一个超数排卵和胚胎培养microdrop的详细描述，可以发现其他地方的2。 准备好与胚胎培养基（如KSOM，Chemicon公司）microdrops培养皿。盖与矿物油（矿物油批次应与胚胎培养的兼容性测试）。平衡在37℃空气中加5％的CO 2中的C。 （热电子3110水套式孵化器或同等） 卵母细胞的隔离准备一道菜：HEPES广场滴缓冲CZB和…

Discussion

祝你好运！

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Cytochalastin B		Sigma		100x stock = 500 ug/mL Cytochalasin B in DMSO. Store at -20˚ C.
Strontium Chloride				10x stock = 100 mM SrCl2 in H2O. Store at room temperature.
MCZB Stock Salts				Filter sterilize 500 mL master salts (good for 3-4 months; store at 4˚ C)
HCZB Stock Salts				Start with 500 mL master salts. Add 50 mg PVA. Stir for 30-60 min and sterile filter (good for 3 months; store at 4˚ C).
PVA		Sigma	P-8136	cold-soluble
HCZB with 11% w/v PVP				Start with 20 ml HCZB medium in a 50 mL conical tube. Place 22g PVP on top of liquid. Close tube and store undisturbed at 4˚ C for 72 – 96 hrs, at which time the PVP will have entered solution. Filter sterilize through an 8 mm filter and store at 4˚ C.
PVP		ICN Biochemicals		MW 360000

Please check for additional buffers compositions in the Protocol part.