Summary
Hier beschrijven we de identificatie van Rhodiola Crenulata aan de hand van habitat, plantenmorfologie, geneeskrachtige eigenschappen, microscopische kenmerken en dunnelaagchromatografie.
Abstract
De identificatie van medicinale materialen is het uitgangspunt en de garantie van de veiligheid van geneesmiddelen. De meerderheid van de wetenschappelijke onderzoekers zal ongetwijfeld de voorkeur geven aan het eenvoudige, snelle, effectieve en goedkope identificatieproces van kruiden. Rhodiola crenulata is een traditioneel Tibetaans medicijn dat op grote hoogte wordt geteeld en voornamelijk wordt gedistribueerd in de regio's Tibet, Yunnan en Sichuan in China. Rhodiola-crenulaat bezit meerdere bio-activiteiten, zoals ontstekingsremmende, antihypoxie en antioxiderende eigenschappen, en heeft een groot ontwikkelingspotentieel. Met de toenemende marktvraag en een snelle afname van de inhoud van hulpbronnen, hebben een groot aantal verwarde producten van Rhodiola crenulata mensen verontrust. Daarom introduceert dit protocol een standaardproces voor de identificatie van Rhodiola crenulata in het veld in combinatie met routinematige laboratoriumtests. De combinatie van habitat, microscopische kenmerken en dunnelaagchromatografie zal Rhodiola crenulata ongetwijfeld snel, efficiënt en economisch identificeren, wat bijdraagt aan de voortdurende ontwikkeling van de Tibetaanse geneeskunde en de kwaliteitscontrole van medicinale materialen.
Introduction
Kruidengeneeskunde heeft een lange geschiedenis en rijke toepassingservaring in China, en het was de eerste systematische opname in Shennong's kruidenklassieker1. De ontdekking van artemisinine toegepast op malaria bevorderde de ontwikkeling van kruidengeneeskunde in een nieuwe fase1. Het gebruik van moderne wetenschappelijke technologie om het exacte mechanisme van kruidengeneeskunde bloot te leggen, verhoogt de bezettingsgraad en de vraag naar kruidengeneeskunde, waardoor er een nieuwe internationale markt voor wordt geopend 2,3,4. Dit heeft echter geleid tot een reeks negatieve effecten. Niet-professionals hebben een vaag begrip van de kenmerken van kruidengeneeskunde, waardoor het gebruik van kruidengeneeskunde een enorm veiligheidsrisico vormt5.
Rhodiola crenulata, een van de planten van de Rhodiola-soort, komt voornamelijk voor in Tibet, het noordwesten van Yunnan en het westen van Sichuan in China (figuur 1)6,7. Rhodiola crenulata bevat salidroside, tyrosol, galluszuur en andere verbindingen voor de behandeling van hypoxische ziekten door de functie van "het stimuleren van qi en het bevorderen van de bloedcirculatie, het zuiveren van de pols en het kalmeren van astma"8,9,10,11. Veldonderzoek toont aan dat Rhodiola crenulata te vinden is in de alpiene taluszones, geulhellingen en rotsspleten op een hoogte van 4.000-5.600 m. Zijn groeiomgeving is koud, vol zonneschijn en intense straling, en hij behoort tot het ecosysteem van de alpenweide. Rhodiola crenulata kan worden verdeeld in lamellaire en puntachtige populaties, afhankelijk van het groeiterrein, en genenstroom kan worden uitgevoerd door kruisbestuiving.
De stuifmeelabortus van het geslacht Rhodiola, de opgraving van illegaliteit en de gedegenereerde ecologische omgeving maken Rhodiola crenulata tot een bedreigde diersoort 6,12. Gezien de hoge medicinale waarde van Rhodiola crenulata, wordt verwacht dat er namaakproducten op de markt zullen komen. Dit artikel presenteert de habitat van Rhodiola crenulata en enkele handige laboratoriumidentificatiemethoden. Ten eerste hebben we de groeiomgeving van Rhodiola crenulata en zijn geneeskrachtige eigenschappen geobserveerd. Ten tweede werd de microstructuur van medicinaal poeder met een microscoop waargenomen. De laatste stap is het belangrijkste punt. De representatieve componenten van Rhodiola crenulata werden gescheiden en geïdentificeerd op basis van de verschillende adsorptie- of oplossingseigenschappen van deze componenten in een bepaalde stof. Op DNA gebaseerde authenticatie- of metabolomics-analysemethoden van medicinale planten zijn ingewikkeld en duur13. Deze eenvoudige, handige en economische methoden kunnen Rhodiola crenulata snel identificeren.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Rhodiola crenulata wordt verzameld op de sneeuwberg Zhuoda, Ganzi County, Tibetaanse Autonome Prefectuur Ganzi, provincie Sichuan, China (N 31.44570°, E 99.96086°, 4892 m). De planten zijn als echt geverifieerd door professor Yi Zhang van de School of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine.
1. Verzameling Rhodiola crenulata
- Fotografeer de habitatkaart van Rhodiola crenulata.
- Fotografeer de hele plant, bladeren, kelk en wortelstok van Rhodiola crenulata.
- Gebruik een spade om het onkruid en gebroken stenen binnen 1 m van de Rhodiola crenulata te verwijderen om de daaropvolgende vlotte mijnbouw te garanderen.
- Graaf de grond op met een schoffel totdat de hele rhizosfeer te zien is en verzamel de penwortel.
OPMERKING: De wortels en wortelstokken van Rhodiola crenulata die in medicinale delen worden gebruikt, moeten in de herfst worden verzameld, wanneer de bloemstelen verdorren.
2. Identificatie van het kenmerk
- Observeer de uiterlijke kenmerken van Rhodiola crenulata met het blote oog: cilindrische en korte penwortels en wortelstokken, bruin oppervlak, vliezige gele epidermis met een roze patroon en oranjerode of bordeauxrode plakjes.
- Identificeer het aan de hand van geur: Het geeft een geurige geur in de buurt van de neus.
- Identificeer het aan de smaak: Neem een klein stukje wortel in de mond, neem eerst een slokje en kauw dan, proef licht bitter en dan zoet.
3. Microscopische identificatie van zetmeelkorrels in geneeskrachtig poeder
- Verwijder de aarde van het oppervlak van de Rhodiola crenulata met een borstel, zet deze in de oven op 40 °C en draai de kruiden elke 24 uur om.
OPMERKING: Het gemak van het breken van medicinale materialen wordt beschouwd als de standaard voor het drogen van vocht. - Poeder de gedroogde medicinale materialen met behulp van een poedermachine en filtreer het medicinale poeder met behulp van de medicinale zeef nr. 3 (zie Tabel met materialen).
- Neem een schoon objectglaasje (zie Tabel met materialen), graaf het poeder met een ontleednaald (zie Tabel met materialen) en plaats het gelijkmatig op een derde van het objectglaasje binnen 2 mm.
- Gebruik een glazen druppelaar (zie Materiaaltabel) om een druppel gedeïoniseerd water aan het poeder toe te voegen. Gebruik een pincet (zie Materiaaltabel) om het ene uiteinde van het dekglas vast te houden (zie Materiaaltabel) om het vloeistofniveau snel aan te raken en het poeder af te dekken.
NOTITIE: Gebruik een anatomische naald om water en medicinaal poeder voorzichtig te mengen om een gelijkmatige monstermenging te garanderen. Er mogen geen luchtbellen zijn tussen het glaasje, het poeder en het afdekglas. - Open de microscoop (zie Tabel met materialen) en plaats het objectglaasje in stap 3.4 op het platform om het vast te zetten. Pas de lichtbron en de grove focusspiraal aan om het poeder te zien. Pas de fijne parafocale spiraal aan totdat de weefsels duidelijk te zien zijn. Schakel over naar een 40x objectief en observeer de zetmeelkorrels.
OPMERKING: Stijf de korrels die zich presenteren als enkele of meervoudige korrels, en de navelstrengpunt lijkt visgraat- of scheurvormig.
4. Microscopische identificatie van katheters, kurkcellen, vezels, houtparenchymcellen en pigmentmassa's in medicinaal poeder
- Neem een schoon objectglaasje (zie Tabel met materialen), graaf het poeder met een ontleednaald (zie Tabel met materialen) en plaats het op een derde van het objectglaasje.
- Gebruik een glazen druppelaar (zie Tabel met materialen) om een druppel chloraalhydraat (zie Tabel met materialen) aan het poeder toe te voegen. Neem het glaasje met een pincet (zie Materiaaltabel) en verwarm het drie keer in de alcohollamp, telkens gedurende 1 s.
NOTITIE: Luchtbellen moeten tijdens het verwarmen worden vermeden. De vloeistof blijft niet-stromend, wat aangeeft dat de penetratie volledig is. - Gebruik een glazen druppelaar om een druppel glycerine toe te voegen (zie Tabel met materialen). Gebruik een pincet om het ene uiteinde van het afdekglas vast te houden om het vloeistofniveau snel aan te raken.
- Open de microscoop en plaats het objectglaasje op het platform om het vast te zetten. Pas de lichtbron en de grove focusspiraal aan om het poeder te zien. Pas de fijne parafocale spiraal aan totdat de weefsels duidelijk te zien zijn. Observeer de katheter, kurkcellen, vezels, houtparenchymcellen en pigmentblok door over te schakelen naar een 40x objectieflens.
OPMERKING: Veelhoekig of lang veelhoekig van kurkcellen, spiraalvormig vat met duidelijke spiraalvormige structuur, xyleempenchym met calciumoxalaatzandkristallen en rood of bruinrood pigmentblok.
5. Bereiding van dunnelaagchromatografische (TLC) monsters van Rhodiola crenulata en de referentie ervan
- Leg het weegpapier op de weegschaal (zie Materiaaltabel) en weeg 3 g Rhodiola crenulata af.
- Doe het poeder in een conische fles van 100 ml (zie Materiaaltabel) en voeg 25 ml methanol toe met een dikke buikpipet (zie Materiaaltabel). Plaats de conische fles in het ultrasone instrument. Stel het vermogen in op 250 W, de frequentie op 40 kHz en de tijd op 30 min (zie Materiaaltabel) en schakel het instrument in.
OPMERKING: Het doel van het ultrasone instrument is ervoor te zorgen dat het poeder van Rhodiola crenulata volledig wordt opgelost zonder de resultaten van latere dunnelaagchromatografische experimenten te beïnvloeden. - Verwijder de conische fles en spoel de buitenste fles met stromend water tot kamertemperatuur (RT).
- Zuig 800 μl vloeistof op die in stap 5.3 is bereid met een spuit van 1 ml. Filtreer met een microporeus filtermembraan van 0,22 μm (zie materiaaltabel) en verzamel 400 μl midstream-monsteroplossing van Rhodiola crenulata in een chromatografisch monsterflesje.
- Weeg en voeg 2 mg salidroside, tyrosol en galluszuur (zie materiaaltabel) toe aan respectievelijk 3 afzonderlijke conische flessen van 100 ml. Voeg 25 ml methanol met een dikke buikpipet toe aan elke conische fles.
- Plaats de conische fles in het ultrasone instrument, stel het vermogen in op 250 W, de frequentie op 40 kHz en de tijd op 30 minuten en herhaal stap 5.3 (zie Materiaaltabel).
- Zuig 800 μL vloeistof op die in stap 5.6 is bereid met een spuit van 1 ml. Filtreer met een microporeus filtermembraan van 0,22 μm (zie Materiaaltabel) en verzamel 400 μL midstream salidroside-, tyrosol- en galluszuurstandaardoplossing in overeenkomstige chromatografische monsterflessen.
6. TLC-identificatie
- Pipettrichloormethaan (5 ml), ethylacetaat (4 ml), methanol (2 ml) en mierenzuur (0,5 ml) (zie materiaaltabel). Voeg toe aan één kant van de chromatografiecilinder met dubbele tank (zie Materiaaltabel), schud en meng gelijkmatig. Bedek de bovenste cilinderkop.
- Plaats de galluszuur, salidroside, tyrosol standaardoplossing en Rhodiola crenulata-oplossing op het monsterrek in posities A1-A4.
- Leg het siliconenvel van 5 cm x 10 cm (zie Materiaaltabel) op de bemonsteringstafel. Start de automatische bemonsteringsmachine (zie Materiaaltabel) en open de luchtregelklep.
- Open de visionCATS-software (zie Materiaaltabel). Klik op Nieuw > Nieuwe map (met de naam Rhodiola crenulata sample test) > OK. Klik op Nieuwe methode (naam Rhodiola crenulata-monstertest ) > OK > ATS 4.
- Klik op Stapdefinitie voltooien. Klik op Toewijzing bijhouden om de beschrijving te bewerken (galluszuur-, salidroside-, tyrosol- en Rhodiola crenulata-monster ).
- Klik op HPTLC-stappen. Stel de parameters voor de dunne laag in (5 cm x 10 cm). Selecteer Toepassingstype (band), stel de parameters in (Tabel 1) en klik op de knop OK .
- Open vul-/spoelkwaliteit. Vink Alleen geprogrammeerd volume vullen aan. Stel het bodemniveau van de injectieflacon (mm) in op 0.5 en klik op de knop OK .
- Klik op Methode uitvoeren.
- Klik op de knop Toewijzing bijhouden , vink Midden aan en stel de parameters in (Tabel 2).
- Klik op de knop Doorgaan voor automatische steekproeven.
- Schakel de automatische bemonsteringsmachine en de luchtklep uit. Verwijder het siliconenvel uit de automatische bemonsteringsmachine.
- Plaats het siliconenvel in stap 6.1 aan de andere kant van de dubbele tankchromatografiecilinder, bedek de bovenste cilinderkop en verzadig gedurende 20 minuten voor.
- Klem het bovenste uiteinde van de dunne laagplaat voorzichtig vast met een pincet, plaats het siliconenvel snel in het ontwikkelingsmiddel en bedek de bovenste cilinderkop.
NOTITIE: Haal het siliconenvel eruit wanneer de uitvouwbare voorkant 0.5-1.0 cm verwijderd is van het bovenste uiteinde van de dunne laagplaat. - Nadat het organische oplosmiddel is verdampt, spuit u de chromogene oplossing bij kamertemperatuur op het oppervlak van de siliconenplaat om chromogene resultaten te verkrijgen.
OPMERKING: De chromogene oplossing is een waterige oplossing die 2% FeCl3 en 1% K3[Fe(CN)6] bevat.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Dit experimentele protocol beschrijft het identificeren en verzamelen van Rhodiola-crenulaat in het veld. Rhodiola crenulaat heeft de neiging om te leven in de alpiene taluszones, geulhellingen en rotsspleten op grote hoogte. De habitat, de hele plant, de bloem en de bladeren van Rhodiola crenulaat kunnen worden weergegeven in figuur 2. Rhodiola crenulaat heeft een roodbruine wortelstok (figuur 3A). Een representatief beeld van het medicinale poeder is weergegeven in figuur 3B. Volgens het bovenstaande experimentele protocol kunnen de microscopische resultaten als volgt worden weergegeven: 1) bruingele of kleurloze kurkcellen, groot uiterlijk, veelhoekig of lang veelhoekig, met iets dikkere wanden (Figuur 3C); 2) zetmeelkorrels die zich voordoen als enkelvoudige of meervoudige korrels, en een navelstrengpunt in de vorm van visgraat of scheuren (figuur 3D); 3) voornamelijk spiraalvormige vaten die dicht bij elkaar liggen (figuur 3E); 4) achromatisch en ovaal xyleemparenchym dat zich in vellen presenteert en calciumoxalaatzandkristallen bevat (figuur 3F); 5) onregelmatig gevormd, bruinrood pigmentblok (figuur 3G). De resultaten van de dunne laagscheiding toonden aan dat het Rhodiola crenulata-monster (A4) verscheen als vlekken van dezelfde kleur in de positie die overeenkomt met het chromatogram van de galluszuuroplossing (A1), salidroside (A2), tyrosol (A3) (Figuur 3H). Galluszuur, salidroside en tyrosol zijn de belangrijkste en representatieve componenten van Rhodiola-crenulaat. Deze resultaten tonen aan dat een voorlopige identificatie van Rhodiola crenulata mogelijk is met de tests die in het protocol worden besproken.
Figuur 1: Verspreidingskaart van Rhodiola crenulata. (A) Rhodiola crenulata wordt voornamelijk verspreid in China, India, Nepal en Bhutan14. (B) Rhodiola crenulata wordt voornamelijk gedistribueerd in Tibet, Qinghai, Sichuan, Yunnan en Guizhou in China (geproduceerd door zachte ArcGis 10.6). Statistische gegevens zijn afkomstig van de websites van het Instituut voor Plantkunde15,16. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 2: Foto van Rhodiola crenulata plant. (A) Biotoop van Rhodiola crenulaat. (B) Close-up van Rhodiola gecrenuleerd. (C) Hele plant van Rhodiola crenulaat. (D) Bloem van Rhodiola crenulata. (E) Bladeren van Rhodiola gecrenuleerd. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 3: Microscopische kenmerken en dunnelaagchromatogram van Rhodiola crenulata. (A) Geneeskrachtige wortel van Rhodiola crenulata. (B) Geneeskrachtige werking van Rhodiola crenulata. (C) Kurkcel. (D) Zetmeelkorrels. (E) Spiraalvormig vat. (F) Xyleemparenchym (calciumoxalaatkristal). g) pigment. (H) De dunnelaagchromatografische scheiding van salidroside (A1), galluszuur (A2), tyrosol (A3) en Rhodiola crenulata (A4). Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
| Parameters | Optie |
| Toepassingspositie Y (mm) | 10 |
| Positie eerste spoor (mm) | 10 |
| Afstand spoor (mm) | 10 |
| Applicatie lengte (mm) | 5 |
| Applicatie breedte (mm) | 0.5 |
Tabel 1: Parameterinstellingen van de automatische bemonsteringspositie.
| Flacon-ID | Beschrijving | Volume (μL) | Positie | Type |
| 1 | Salidoside | 3 | A1 | Referentie |
| 11 | galluszuur | 1 | A2 | Referentie |
| 12 | Tyrosol | 2 | A3 | Referentie |
| 13 | Rhodiola crenulaat monster | 2 | A4 | Monster |
Tabel 2: Parameterinstellingen van de automatische bemonsteringsvolgorde.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Er zijn meer dan 90 soorten Rhodiola-planten in de wereld en meer dan 60% van alle soorten komt voor in China, veel voorkomende soorten zoals Rhodiola crenulata, Rhodiola rosea, Rhodiolas achalinensis en Rhodiola algida17. Rhodiola crenulata, opgenomen in het eerste deel van de Chinese Farmacopee (2020), is een traditioneel Tibetaans medicijn dat op grote hoogte wordt verbouwd. De marktvraag naar Rhodiola crenulata neemt jaarlijks toe, dus het juiste gebruik van de bron is de sleutel tot veilig gebruik. Met name de standaardisatie van field picking tot eenvoudige en snelle routinematige identificatie in het laboratorium kan niet worden genegeerd. Er is gemeld dat hoogwaardige vloeistofchromatografie, massaspectrometrie en intereenvoudige sequentieherhalingen Rhodiola-crenulaat nauwkeurig kunnen identificeren van andere Rhodiola-soorten, wat tijdrovend, complex en duur is 18,19,20. Ondertussen hebben we een multidimensionale evaluatiemethode van sensorische herkenning (E-nose en kleuranalyse) en HPLC-methode ontwikkeld om Rhodiola-crenulaat21,22 te onderscheiden.
Elk medicinaal materiaal heeft zijn unieke groeiomgeving, microscopisch kleine structuurkenmerken en indexcomponenten. Dit protocol biedt een uitgebreide methode voor het identificeren van Rhodiola crenulata, van veldidentificatie tot laboratoriummicroscopie en validatie met behulp van dunnelaagchromatografie. Rhodiola crenulata groeit voornamelijk op hoogten van meer dan 3000 m, gebieden met lage temperaturen, weinig zuurstof en hoge ultraviolette straling23. Rhodiola crenulata is een sappig kruid, wat het intuïtieve visuele kenmerk is. Het poeder ziet er roodbruin uit met een geurige geur. Op basis van zijn gewoonten, plantenmorfologie, bloemen en bladeren onderscheidt Rhodiola crenulata zich van andere Rhodiola-soorten in het veld. De microscopische resultaten van medicinale materialen toonden het bestaan aan van zetmeelkorrels, houtparenchymcellen (inclusief calciumoxalaatzandkristallen), kurkcellen, leiding (voornamelijk draadleiding) en grote hoeveelheden rood pigment. TLC is een chromatografische scheidingstechniek voor de scheiding van monsters met meerdere componenten, die vaak wordt gebruikt bij de identificatie van Chinese medicinale materialen. Galluszuur, tyrosol en salidroside worden vaak geïdentificeerd als de indexcomponenten van Rhodiola-crenulaat24. De resultaten van dunnelaagchromatografie toonden aan dat de oplossing van Rhodiola crenulata dezelfde kleurvlekken vertoonde op de overeenkomstige positie als de controle (galluszuur, tyrosol en salidroside). Het laat zien dat Rhodiola crenulata galluszuur, tyrosol en salidroside bevat. In combinatie met de kennis van de kweekomgeving en microscopische resultaten kan Rhodiola crenulata voorlopig worden geïdentificeerd.
Het is vermeldenswaard dat de unieke groeiomgeving bepaalt dat het bijna onmogelijk is om wilde Rhodiola crenulata onder de hoogte van 3000 m te hebben. Bovendien wordt het niet aanbevolen om de wortels en wortelstok van Rhodiola crenulata tijdens de bloeiperiode te oogsten. Voor microscopische identificatie in het laboratorium zijn het drogen van de wortels en het zeven van het poeder voorwaarden voor de succesvolle voorbereiding van microscopische monsters. Ervoor zorgen dat er geen luchtbel is tussen het objectglaasje, het medicinale poeder en het dekglas is ook essentieel om de karakteristieke samenstelling onder de microscoop te observeren. Voor dunnelaagchromatografie zijn de voorverzadiging van de silicagelplaat, het redelijke ontwikkelingsmiddel en de monsterconcentratie belangrijke factoren voor het succesvol scheiden van verschillende componenten in het testmonster. In vergelijking met traditionele handmatige bemonstering verhoogt het automatische bemonsteringsproces van dit protocol ongetwijfeld de nauwkeurigheid van de resultaten en de herhaalbaarheid van het experiment. De subjectiviteit van geur- en smaakidentificatie is te sterk en kan leiden tot verkeerde inschattingen. Vergeleken met hoogwaardige vloeistofchromatografie, H-nucleaire magnetische resonantie en massaspectrometrie, kan dunnelaagchromatografie het gehalte aan verbindingen in medicinale materialen niet kwantitatief analyseren. Hoewel DNA-barcodering een superieure nauwkeurigheid heeft bij de identificatie van kruiden, bepaalt de hoge prijs dat het niet universeel is bij de identificatie van medicinale materialen26. Bovendien is de veld-naar-laboratoriumidentificatie en microscopie in combinatie met de dunnelaagchromatografietechniek die in dit protocol wordt geboden, toepasbaar op bijna alle medicinale materialen. Dit is een goedkoop, eenvoudig en snel proces voor de identificatie van medicinale kruidenmaterialen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
De auteurs hebben niets te onthullen.
Acknowledgments
Dit werk werd ondersteund door de National Natural Science Foundation of China (81973569, 82274207 en 82104533), het Xinglin Scholar Research Promotion Project van de Chengdu University of TCM (XKTD2022013) en het Key Research and Development Program van Ningxia (2023BEG02012).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.22 μm millipore filter | Millipore | SLGP033RB | |
| Automatic sampling machine | CAMAG | ATS 4 | |
| Chloral hydrate | Fuzhou Brunei Technology Co., Ltd | ST1002 | |
| Chromatographic sample bottles | Zhejiang ALWSCI Technology Co., Ltd | C0000008 | |
| Conical flask | Sichuan Shubo Co., Ltd | 1121 | |
| Cover glass | Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd | 10211818c | |
| Dissecting needle | Shanghai Bingyu Fluid Technology Co., Ltd | BY-5026 | |
| Electronic balance | SHIMADZU | ATX124 | |
| Ethyl acetate | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd | 2022120901 | |
| Formic acid | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd | 2021110801 | |
| Gallic acid | Chengdu Herbpurify Co., Ltd | M-017 | |
| Glycerol | Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd | 10010618 | |
| High speed crusher | Beijing Zhongxingweiye Instrument Co., Ltd | FW-100 | |
| Methanol | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd | 20230108 | |
| Microscope | Chongqing Oprec Nistrument Co., Ltd | B203 | |
| Microscope slide | Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd | 7105P-G | |
| Oven | Shanghai Yuejin Medical Equipment Co., Ltd | DHG-8145 | |
| Pharmacopoeia sieve | Hangzhou Xingrun sieve factory | 572423281330 | |
| Pipette | Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd | 120302008 | |
| Salidroside | Chengdu Herbpurify Co., Ltd | H-040 | |
| Saturate tank | Yancheng Liegu Technology Co., Ltd | 10*20 P-1 | |
| Silica gel plate | Yantai Jiangyou Silica Gel Development Co., Ltd | HSG20211227 | |
| Trichloromethane | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd | 20221013-1 | |
| Tweezer | Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd | 130302027 | |
| Tyrosol | Chengdu Herbpurify Co., Ltd | L-042 | |
| Ultrasound equipment | Ningbo Xinyi Ultrasonic Equipment Co., Ltd | SB-8200DTS | |
| Volumetric pipet | Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd | 120301006 |
References
- Zhang, J., et al. Traditional herbal medicine and nanomedicine: Converging disciplines to improve therapeutic efficacy and human health. Advanced Drug Delivery Reviews. 178, 113964 (2021).
- Yin, R., et al. The positive role and mechanism of herbal medicine in Parkinson's Disease. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2021, 9923331 (2021).
- Li, F. S., Weng, J. K. Demystifying traditional herbal medicine with modern approach. Nature Plants. 3, 17109 (2017).
- da Fonseca, L. R., et al. Herbal medicinal products from Passiflora for anxiety: An unexploited potential. The Scientific World Journal. 2020, 6598434 (2020).
- Aziato, L., Antwi, H. O. Facilitators and barriers of herbal medicine use in Accra, Ghana: an inductive exploratory study. BMC Complementary and Alternative Medicine. 16, 142 (2016).
- Tao, H., et al. Rhodiola species: A comprehensive review of traditional use, phytochemistry, pharmacology, toxicity, and clinical study. Medicinal Research Reviews. 39 (5), 1779-1850 (2019).
- Wang, Y., et al. The dietary supplement Rhodiola crenulata extract alleviates dextran sulfate sodium-induced colitis in mice through anti-inflammation, mediating gut barrier integrity and reshaping the gut microbiome. Food & Function. 12 (7), 3142-3158 (2021).
- Xie, N. Rhodiola crenulate alleviates hypobaric hypoxia-induced brain injury via adjusting NF-κB/NLRP3-mediated inflammation. Phytomedicine. 103, 154240 (2022).
- Wang, X., et al. Salidroside, a phenyl ethanol glycoside from Rhodiola crenulata, orchestrates hypoxic mitochondrial dynamics homeostasis by stimulating Sirt1/p53/Drp1 signaling. Journal of Ethnopharmacology. 293, 115278 (2022).
- Ma, D., et al. Chemical characteristics of Rhodiola Crenulata and its mechanism in acute mountain sickness using UHPLC-Q-TOF-MS/MS combined with network pharmacology analysis. Journal of Ethnopharmacology. 294, 115345 (2022).
- Wang, X., et al. Rhodiola crenulata attenuates apoptosis and mitochondrial energy metabolism disorder in rats with hypobaric hypoxia-induced brain injury by regulating the HIF-1α/microRNA 210/ISCU1/2(COX10) signaling pathway. Journal of Ethnopharmacology. 241, 111801 (2019).
- d'Avigdor, E., Wohlmuth, H., Asfaw, Z., Awas, T. The current status of knowledge of herbal medicine and medicinal plants in Fiche, Ethiopia. Journal of Ethnobiology and Ethnomedicine. 10, 38 (2014).
- Sánchez, M., González-Burgos, E., Divakar, P. K., Gómez-Serranillos, M. P. DNA-based authentication and metabolomics analysis of medicinal plants samples by DNA barcoding and ultra-high-performance liquid chromatography/triple quadrupole mass spectrometry (UHPLC-MS). Plants (Basel, Switzerland). 9 (11), 1601 (2020).
- Rhodiola renulata (Hook.fil & Thomson) H.Ohba. , Available from: https://www.gbif.org/species/4200529 (2023).
- Plant + data center. , Available from: https://www.iplant.cn/ (2023).
- Chinese virtual herbarium. , Available from: https://www.cvh.ac.cn/ (2023).
- Cunningham, A. B. There "ain't no mountain high enough"?: The drivers, diversity and sustainability of China's Rhodiola trade. Journal of Ethnopharmacology. 252, 112379 (2020).
- Wang, Q., Ruan, X., Jin, Z. H., Yan, Q. C., Tu, S. Identification of Rhodiola species by using RP-HPLC. Journal of Zhejiang University. Science. B. 6 (6), 477-482 (2005).
- Dong, X., Guo, Y., Xiong, C., Sun, L. Evaluation of two major Rhodiola species and the systemic changing characteristics of metabolites of Rhodiola crenulata in different altitudes by chemical methods combined with UPLC-QqQ-MS-based metabolomics. Molecules. 25 (18), 4062 (2020).
- Zhao, W., et al. HPLC fingerprint differentiation between natural and ex situ populations of Rhodiola sachalinensis from Changbai Mountain, China. PloS One. 9 (11), 112869 (2014).
- Yu, Y. Y. Quality evaluation of Tibetan medicine Rhodiolae crenulatae radix et rhizome based on sensory recognition and near infrared spectrum analysis. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. , Chinese Master's Thesis (2020).
- Lv, X. M. Simultaneous determination of 5 chemical components in 3 kinds of Rhodiola rosea by HPLC. China Pharmacy. 29 (18), 2515-2519 (2018).
- Dong, T., Sha, Y., Liu, H., Sun, L. Altitudinal variation of metabolites, mineral elements and antioxidant activities of Rhodiola crenulata (Hook.f. & Thomson) H.Ohba. Molecules. 26 (23), 7383 (2021).
- Ma, D., et al. Application of UHPLC fingerprints combined with chemical pattern recognition analysis in the differentiation of six Rhodiola species. Molecules. 26 (22), 6855 (2021).
- Li, X. H., et al. Metabolic discrimination of different Rhodiola species using 1H-NMR and GEP combinational chemometrics. Chemical & Pharmaceutical Bulletin. 67 (2), 81-87 (2019).
- Liu, Y., et al. Identification of Hippophae species (Shaji) through DNA barcodes. Chinese Medicine. 10, 28 (2015).
