Summary
Här beskriver vi identifieringen av Rhodiola crenulata utifrån habitat, växtmorfologi, medicinska egenskaper, mikroskopiska egenskaper och tunnskiktskromatografi.
Abstract
Identifiering av läkemedelsmaterial är förutsättningen och garantin för läkemedelssäkerhet. Majoriteten av vetenskapliga forskare kommer säkert att gynna den enkla, snabba, effektiva och billiga identifieringsprocessen av örter. Rhodiola crenulata är en traditionell tibetansk medicin som odlas på höga höjder och som huvudsakligen distribueras i Tibet, Yunnan och Sichuan-regionerna i Kina. Rosenrotskrenulat har flera bioaktiviteter, såsom antiinflammatoriska, anti-hypoxi och antioxidativa egenskaper, och har stor potential för utveckling. Med den ökande efterfrågan på marknaden och en snabb minskning av resursinnehållet har ett stort antal förvirrade produkter av Rhodiola crenulata oroat människor. Därför introducerar detta protokoll en standardprocess för identifiering av rosenrot crenulata i fält i kombination med rutinmässiga laboratorietester. Kombinationen av livsmiljö, mikroskopiska egenskaper och tunnskiktskromatografi kommer utan tvekan att identifiera Rhodiola crenulata snabbt, effektivt och ekonomiskt, vilket bidrar till den kontinuerliga utvecklingen av tibetansk medicin och kvalitetskontroll av medicinska material.
Introduction
Örtmedicin har en lång historia och rik erfarenhet av tillämpning i Kina, och det var den första systematiska inspelningen i Shennongs örtklassiker1. Upptäckten av artemisinin applicerad på malaria främjade utvecklingen av örtmedicin till ett nytt stadium1. Användningen av modern vetenskaplig teknik för att avslöja den exakta mekanismen för örtmedicin ökar utnyttjandegraden och efterfrågan på örtmedicin, vilket öppnar en ny internationell marknad för den 2,3,4. Detta har dock lett till en rad negativa effekter. Icke-professionella har en vag förståelse för egenskaperna hos örtmedicin, vilket gör användningen av örtmedicin inför en enorm säkerhetsrisk5.
Rhodiola crenulata, en av växterna av Rhodiola-arten, är huvudsakligen spridd i Tibet, nordvästra Yunnan och västra Sichuan i Kina (Figur 1)6,7. Rosenrot crenulata består av salidrosid, tyrosol, gallussyra och andra föreningar för behandling av hypoxiska sjukdomar genom funktionen att "stärka qi och främja blodcirkulationen, rensa pulsen och lugna astma"8,9,10,11. Fältundersökningar visar att Rhodiola crenulata kan hittas i de alpina taluszonerna, ravinsluttningarna och klippskrevorna på en höjd av 4 000-5 600 m. Dess växtmiljö är kall, full av solsken och intensiv strålning, och den tillhör det alpina ängsekosystemet. Rosenrot crenulata kan spridas i lamellära och punktliknande populationer beroende på tillväxtterrängen, och genflödet kan utföras genom korspollinering.
Pollenaborten av släktet Rhodiola, illegala utgrävningar och degenererad ekologisk miljö gör Rhodiola crenulata till en utrotningshotad art 6,12. Med tanke på det höga medicinska värdet av Rhodiola crenulata förväntas förfalskade produkter flöda ut på marknaden. I den här artikeln presenteras livsmiljön för Rhodiola crenulata och några praktiska metoder för identifiering i laboratorier. För det första observerade vi tillväxtmiljön för Rhodiola crenulata och dess medicinska egenskaper. För det andra observerades mikrostrukturen hos läkemedelspulver med mikroskop. Det sista steget är nyckelpunkten. De representativa beståndsdelarna i Rhodiola crenulata separerades och identifierades med hänsyn till de olika adsorptions- eller upplösningsegenskaperna hos dessa beståndsdelar i ett visst ämne. DNA-baserade autentiserings- eller metabolomikanalysmetoder för medicinalväxter är komplicerade och dyra13. Dessa grundläggande, bekväma och ekonomiska metoder kan snabbt identifiera Rosenrot crenulata.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Rhodiola crenulata samlas in från Zhuoda Snow Mountain, Ganzi County, Ganzi Tibetan Autonomous Prefecture, Sichuanprovinsen, Kina (N 31.44570°, E 99.96086°, 4892 m). Växterna är verifierade som äkta av professor Yi Zhang vid School of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine.
1. Insamling av Rhodiola crenulata
- Fotografera habitatkartan över Rhodiola crenulata.
- Fotografera hela växten, bladen, blomfodret och rhizom av Rhodiola crenulata.
- Använd en spade för att rensa bort ogräs och trasiga stenar inom 1 m från Rosenrot crenulata för att säkerställa den efterföljande smidiga brytningen.
- Gräv upp jorden med en hacka tills hela rhizosfären syns och samla upp pålroten.
OBS: Rötterna och jordstammarna av Rhodiola crenulata som används i medicinska delar bör samlas in på hösten, när blomstjälkarna vissnar.
2. Identifiering av egenskaper
- Observera utseendet på Rhodiola crenulata med blotta ögat: cylindriska och korta pålrötter och rhizomer, brun yta, membranös gul epidermis med rosa mönster och orangeröda eller vinröda skivor.
- Identifiera den genom lukten: Den ger en väldoftande lukt när den är nära näsan.
- Känn igen den på smaken: Ta en liten bit rot i munnen, klunka först och tugga sedan, smaka lätt bittert och sedan sött.
3. Mikroskopisk identifiering av stärkelsegranulat i läkemedelspulver
- Ta bort jorden på ytan av Rosenrot crenulata med en borste, sätt in den i ugnen på 40 °C och vänd örterna var 24:e timme.
OBS: Att det är lätt att bryta medicinska material anses vara standarden för torkning av fukt. - Pudra de torkade läkemedlen med hjälp av en pulvermaskin och filtrera läkemedelspulvret med hjälp av den medicinska sikten nr 3 (se materialförteckningen).
- Ta ett rent objektglas (se materialtabell), gräv pulvret med en dissekeringsnål (se materialtabell) och placera det jämnt på en tredjedel av objektglaset inom 2 mm.
- Använd en glaspipett (se materialförteckning) för att tillsätta en droppe avjoniserat vatten till pulvret. Använd en pincett (se Materialtabell) för att hålla ena änden av täckglaset (se Materialtabell) för att snabbt vidröra vätskenivån och täcka pulvret.
OBS: Använd en anatomisk nål för att försiktigt blanda vatten och medicinskt pulver för att säkerställa enhetlig sample blandning. Det får inte finnas några luftbubblor mellan objektglaset, pulvret och täckglaset. - Öppna mikroskopet (se materialtabell) och placera objektglaset i steg 3.4 på plattformen för att säkra det. Justera ljuskällan och den grova fokusspiralen för att se pulvret. Justera den fina parafokala spiralen tills vävnaderna syns tydligt. Byt till ett 40x objektiv och observera stärkelsekornen.
OBS: Stärkelse kornen som presenteras som enstaka eller flera korn, och navelspetsen ser fiskbens- eller sprickformad.
4. Mikroskopisk identifiering av katetrar, korkceller, fibrer, träparenkymceller och pigmentmassor i medicinskt pulver
- Ta ett rent objektglas (se materialtabell), gräv pulvret med en dissekerande nål (se materialtabell) och placera det på en tredjedel av objektglaset.
- Använd en glaspipett (se Materialförteckning) för att tillsätta en droppe kloralhydrat (se Materialförteckning) till pulvret. Ta objektglaset med en pincett (se materialtabell) och värm det i spritlampan tre gånger, varje gång i 1 s.
OBS: Bubblor bör undvikas under uppvärmningen. Vätskan förblir icke-flytande, vilket indikerar att penetrationen är klar. - Använd en glaspipett för att tillsätta en droppe glycerin (se materialförteckning). Använd en pincett för att hålla ena änden av täckglaset för att snabbt röra vid vätskenivån.
- Öppna mikroskopet och placera objektglaset på plattformen för att säkra det. Justera ljuskällan och den grova fokusspiralen för att se pulvret. Justera den fina parafokala spiralen tills vävnaderna syns tydligt. Observera katetern, korkcellerna, fibrerna, träparenkymcellerna och pigmentblocket genom att byta till en 40x objektivlins.
OBS: Polygonala eller långa polygonala korkceller, spiralkärl med tydlig spiralformad struktur, xylemparenkym som innehåller kalciumoxalatsandkristaller och rött eller brunrött pigmentblock.
5. Beredning av tunnskiktskromatografiska (TLC) prover av Rhodiola crenulata och dess referens
- Lägg vågpappret på vågen (se materialtabell) och väg upp 3 g pulver av Rhodiola crenulata.
- Ta pulvret i en 100 ml konisk flaska (se materialtabell) och tillsätt 25 ml metanol med en stor bukpipett (se materialförteckning). Sätt den koniska flaskan i ultraljudsinstrumentet. Ställ in effekten på 250 W, frekvensen på 40 kHz och tiden på 30 min (se materialtabell) och slå på instrumentet.
OBS: Syftet med ultraljudsinstrumentet är att säkerställa att pulvret av Rhodiola crenulata löses upp helt utan att påverka resultaten av efterföljande tunnskiktskromatografiska experiment. - Ta bort den koniska flaskan och skölj den yttre flaskan med rinnande vatten till rumstemperatur (RT).
- Aspirera 800 μl vätska beredd i steg 5.3 med en 1 ml spruta. Filtrera med 0,22 μm mikroporöst filtermembran (se materialförteckning) och samla upp 400 μl provlösning av Rhodiola crenulata i en kromatografisk provflaska.
- Väg och tillsätt 2 mg salidrosid, tyrosol och gallussyra (se materialtabell) i 3 separata 100 ml koniska flaskor. Tillsätt 25 ml metanol med en stor bukpipett i varje konisk flaska.
- Sätt den koniska flaskan i ultraljudsinstrumentet, ställ in effekten på 250 W, frekvensen på 40 kHz och tiden på 30 min och upprepa steg 5.3 (se materialtabell).
- Aspirera 800 μl vätska beredd i steg 5.6 med en 1 ml spruta. Filtrera med 0,22 μm mikroporöst filtermembran (se materialförteckning) och samla upp 400 μl mellanströms salidrosid-, tyrosol- och gallussyrastandardlösning i motsvarande kromatografiska provflaskor.
6. TLC-identifiering
- Pipettera triklormetan (5 ml), etylacetat (4 ml), metanol (2 ml) och myrsyra (0,5 ml) (se materialförteckning). Tillsätt på ena sidan av kromatograficylindern med dubbla tankar (se materialtabell), skaka och blanda jämnt. Täck över det övre topplocket.
- Placera gallussyra, salidrosid, tyrosol standardlösning och Rhodiola crenulata-lösning på sample rack i position A1-A4.
- Placera silikonskivan på 5 cm x 10 cm (se materialtabell) på provtagningsbordet. Starta den automatiska provtagningsmaskinen (se materialförteckning) och öppna luftreglerventilen.
- Öppna visionCATS-programvaran (se Materialförteckning). Klicka på Ny > Ny mapp (med namnet Rhodiola crenulata sample test) > OK. Klicka på Ny metod (namn Rhodiola crenulata sample test) > OK > ATS 4.
- Klicka på Slutför stegdefinition. Klicka på Spåra tilldelning för att redigera beskrivningen (gallussyra, salidrosid, tyrosol och Rhodiola crenulata-prov ).
- Klicka på HPTLC-steg. Ställ in parametrarna för tunna lager (5 cm x 10 cm). Välj Programtyp (band), ställ in parametrarna (tabell 1) och klicka på OK-knappen .
- Öppen fyllnings-/sköljkvalitet. Markera Fyll endast programmerad volym. Ställ in injektionsflaskans bottennivå (mm) till 0,5 och klicka på OK-knappen.
- Klicka på Utför metod.
- Klicka på knappen Spåra tilldelning , markera Center och ställ in parametrarna (tabell 2).
- Klicka på knappen Fortsätt för automatisk sampling.
- Stäng av den automatiska provtagningsmaskinen och luftventilen. Ta bort silikonplattan från den automatiska provtagningsmaskinen.
- Sätt silikonarket i den andra sidan av dubbeltankens kromatograficylinder i steg 6.1, täck det övre cylinderhuvudet och förmätta i 20 minuter.
- Kläm försiktigt fast den övre änden av den tunna lagerplattan med en pincett, lägg snabbt silikonskivan i framkallningsmedlet och täck det övre cylinderhuvudet.
OBS: Ta ut silikonskivan när den utfällbara framkanten är 0.5-1.0 cm från den övre änden av den tunna skiktplattan. - Efter att det organiska lösningsmedlet har avdunstat, spraya den kromogena lösningen på ytan av silikonplattan vid rumstemperatur för att få kromogena resultat.
OBS: Den kromogena lösningen är en vattenlösning som innehåller 2 % FeCl3 och 1 % K3 [Fe (CN)6].
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Detta experimentella protokoll beskriver identifiering och insamling av rosenrotskrenulat i fält. Rosenrot tenderar att leva i de alpina taluszonerna, ravinsluttningarna och klippskrevorna på höga höjder. Livsmiljön, hela växten, blomman och bladen hos Rosenrot kan visas i figur 2. Rosenrot har en rödbrun rhizom (Figur 3A). En representativ bild av det medicinska pulvret visas i figur 3B. Enligt ovanstående experimentella protokoll kan de mikroskopiska resultaten listas enligt följande: 1) brungula eller färglösa korkceller, stort utseende, polygonalt eller långt polygonalt, med något tjockare väggar (figur 3C); 2) Stärkelsekorn som består av ett eller flera korn och navelspets som ser ut som fiskbens- eller sprickformade (figur 3D). 3) huvudsakligen spiralkärl som är tätt placerade (figur 3E); 4) akromatös och oval xylemparenkym som förekommer i ark och innehåller kalciumoxalatsandkristaller (figur 3F); 5) oregelbundet format, brunrött pigmentblock (Figur 3G). Resultaten från tunnskiktsseparationen visade att Rhodiola crenulata-provet (A4) uppträdde som fläckar av samma färg i den position som motsvarade kromatogrammet för gallussyra (A1), salidrosid (A2), tyrosol standardlösning (A3) (figur 3H). Gallussyra, salidosid och tyrosol är de främsta och representativa komponenterna i rosenoakrenula. Dessa resultat visar att en preliminär identifiering av Rhodiola crenulata är möjlig med de tester som diskuteras i protokollet.
Figur 1: Utbredningskarta över Rhodiola crenulata. (A) Rosenrot crenulata förekommer huvudsakligen i Kina, Indien, Nepal och Bhutan14. (B) Rosenrot crenulata distribueras huvudsakligen i Tibet, Qinghai, Sichuan, Yunnan och Guizhou i Kina (producerad av mjuk ArcGis 10.6). Statistiken kommer från Botaniska institutets webbplatser15,16. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 2: Bild av växten Rhodiola crenulata . (A) Biotop av rosenrot. (B) Närbild av rosenrot. C) Hela växten av rosenrot. d) Blomma av Rhodiola crenulata. e) Blad av rosenrot. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 3: Mikroskopiska karakteristika och tunnskiktskromatogram av Rhodiola crenulata. A) Medicinsk rot av Rhodiola crenulata. (B) Farmakologias medicinska materialstyrka. (C) Korkcell. D) Stärkelsekorn. (E) Spiralkärl. (F) Xylemparenkym (kalciumoxalatkristall). (g) Pigment. H) Tunnskiktskromatografiseparation av salidrosid (A1), gallussyra (A2), tyrosol (A3) och rosenrot ( A4). Klicka här för att se en större version av denna figur.
| Parametrar | Alternativ |
| Appliceringsläge Y (mm) | 10 |
| Första bandets position (mm) | 10 |
| Spåravstånd (mm) | 10 |
| Appliceringslängd (mm) | 5 |
| Appliceringsbredd (mm) | 0.5 |
Tabell 1: Parameterinställningar för automatisk provtagningsposition.
| Injektionsflaskans ID | Beskrivning | Volym (μL) | Position | Typ |
| 1 | Salidrosid | 3 | A1 | Hänvisning |
| 11 | gallussyra | 1 | A2 | Hänvisning |
| 12 | tyrosol | 2 | A3 | Hänvisning |
| 13 | Rosenrot crenulate prov | 2 | A4 | Prov |
Tabell 2: Parameterinställningar för automatisk samplingsordning.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Det finns mer än 90 arter av rosenrotsväxter i världen, och mer än 60 % av alla arter finns i Kina, vanliga arter som Rhodiola crenulata, Rhodiola rosea, Rhodiolas achalinensis och Rhodiola algida17. Rhodiola crenulata, som registrerades i den första delen av den kinesiska farmakopén (2020), är en traditionell tibetansk medicin som odlas på höga höjder. Marknadens efterfrågan på rosenrot ökar årligen, så att säkerställa korrekt användning av källan är nyckeln till att säkerställa säker användning. Framför allt kan standardiseringen från fältplockning till enkel och snabb laboratorierutinidentifiering inte ignoreras. Det har rapporterats att högpresterande vätskekromatografi, masspektrometri och interenkla sekvensupprepningar exakt kan identifiera rosenolkrenulat från andra rosenalarter, vilket är tidskrävande, komplext och dyrt 18,19,20. Under tiden har vi etablerat en multidimensionell utvärderingsmetod för sensorisk igenkänning (E-näsa och färganalys) och HPLC-metod för att särskilja Rosenrot 21,22.
Varje medicinskt material har sin unika odlingsmiljö, mikroskopiska strukturegenskaper och indexkomponenter. Detta protokoll tillhandahåller en omfattande metod för att identifiera Rhodiola crenulata, från fältidentifiering till laboratoriemikroskopi och validering med hjälp av tunnskiktskromatografi. Rhodiola crenulata växer huvudsakligen på höjder över 3000 m, låg temperatur, låg syrehalt och höga ultravioletta strålningsområden23. Rhodiola crenulata är en saftig ört, vilket är dess intuitiva visuella egenskap. Pulvret ser rödbrunt ut med en väldoftande lukt. Baserat på dess vanor, växtmorfologi, blommor och blad skiljer sig Rhodiola crenulata från andra rosenrotsarter i fält. De mikroskopiska resultaten av medicinska material visade förekomsten av stärkelsegranulat, träparenkymceller (inklusive kalciumoxalatsandkristaller), korkceller, ledning (huvudsakligen gängad ledning) och stora mängder rött pigment. TLC är en kromatografisk separationsteknik för separation av multikomponentprover, som vanligtvis används vid identifiering av kinesiska läkemedel. Gallussyra, tyrosol och salidrosid identifieras ofta som indexkomponenterna i Rhodiola crenulate24. Resultaten av tunnskiktskromatografi visade att lösningen av Rhodiola crenulata visade samma färgfläckar vid motsvarande position som kontrollen (gallussyra, tyrosol och salidrosid). Den visar att Rhodiola crenulata innehåller gallussyra, tyrosol och salidrosid. I kombination med kunskap om odlingsmiljön och mikroskopiska resultat kan Rhodiola crenulata preliminärt identifieras.
Det är värt att notera att den unika växtmiljön avgör att det är nästan omöjligt att ha vild Rhodiola crenulata under 3000 m höjd. Dessutom rekommenderas det inte att skörda rötterna och rhizom av Rhodiola crenulata under blomningsperioden. För laboratoriemikroskopisk identifiering är torkning av rötterna och siktning av pulvret förutsättningar för framgångsrik beredning av mikroskopiska prover. Att se till att det inte finns någon luftbubbla mellan objektglaset, läkemedelspulvret och täckglaset är också nyckeln till att observera den karakteristiska kompositionen under mikroskopet. För tunnskiktskromatografi är förmättnad av kiselgelplatta, rimligt framkallningsmedel och provkoncentration viktiga faktorer för att framgångsrikt separera olika komponenter i testprovet. Jämfört med traditionell manuell provtagning ökar den automatiska provtagningsprocessen i detta protokoll utan tvekan resultatens noggrannhet och experimentets repeterbarhet. Subjektiviteten i arom- och smakidentifieringen är för stark och kan leda till felbedömningar. Jämfört med högpresterande vätskekromatografi, H-kärnmagnetisk resonans och masspektrometri kan tunnskiktskromatografi inte kvantitativt analysera innehållet av föreningar i medicinska material25. Även om DNA-streckkodning har överlägsen noggrannhet vid identifiering av växtbaserade läkemedel, avgör dess höga pris att den inte är universell vid identifiering av medicinska material26. Dessutom är identifiering från fält till laboratorium och mikroskopi i kombination med den tunnskiktskromatografiteknik som tillhandahålls i detta protokoll tillämplig på nästan alla medicinska material. Detta är en billig, enkel och snabb process för identifiering av medicinska växtbaserade material.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har inget att avslöja.
Acknowledgments
Detta arbete stöddes av National Natural Science Foundation of China (81973569, 82274207 och 82104533), Xinglin Scholar Research Promotion Project vid Chengdu University of TCM (XKTD2022013) och Key Research and Development Program of Ningxia (2023BEG02012).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.22 μm millipore filter | Millipore | SLGP033RB | |
| Automatic sampling machine | CAMAG | ATS 4 | |
| Chloral hydrate | Fuzhou Brunei Technology Co., Ltd | ST1002 | |
| Chromatographic sample bottles | Zhejiang ALWSCI Technology Co., Ltd | C0000008 | |
| Conical flask | Sichuan Shubo Co., Ltd | 1121 | |
| Cover glass | Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd | 10211818c | |
| Dissecting needle | Shanghai Bingyu Fluid Technology Co., Ltd | BY-5026 | |
| Electronic balance | SHIMADZU | ATX124 | |
| Ethyl acetate | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd | 2022120901 | |
| Formic acid | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd | 2021110801 | |
| Gallic acid | Chengdu Herbpurify Co., Ltd | M-017 | |
| Glycerol | Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd | 10010618 | |
| High speed crusher | Beijing Zhongxingweiye Instrument Co., Ltd | FW-100 | |
| Methanol | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd | 20230108 | |
| Microscope | Chongqing Oprec Nistrument Co., Ltd | B203 | |
| Microscope slide | Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd | 7105P-G | |
| Oven | Shanghai Yuejin Medical Equipment Co., Ltd | DHG-8145 | |
| Pharmacopoeia sieve | Hangzhou Xingrun sieve factory | 572423281330 | |
| Pipette | Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd | 120302008 | |
| Salidroside | Chengdu Herbpurify Co., Ltd | H-040 | |
| Saturate tank | Yancheng Liegu Technology Co., Ltd | 10*20 P-1 | |
| Silica gel plate | Yantai Jiangyou Silica Gel Development Co., Ltd | HSG20211227 | |
| Trichloromethane | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd | 20221013-1 | |
| Tweezer | Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd | 130302027 | |
| Tyrosol | Chengdu Herbpurify Co., Ltd | L-042 | |
| Ultrasound equipment | Ningbo Xinyi Ultrasonic Equipment Co., Ltd | SB-8200DTS | |
| Volumetric pipet | Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd | 120301006 |
References
- Zhang, J., et al. Traditional herbal medicine and nanomedicine: Converging disciplines to improve therapeutic efficacy and human health. Advanced Drug Delivery Reviews. 178, 113964 (2021).
- Yin, R., et al. The positive role and mechanism of herbal medicine in Parkinson's Disease. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2021, 9923331 (2021).
- Li, F. S., Weng, J. K. Demystifying traditional herbal medicine with modern approach. Nature Plants. 3, 17109 (2017).
- da Fonseca, L. R., et al. Herbal medicinal products from Passiflora for anxiety: An unexploited potential. The Scientific World Journal. 2020, 6598434 (2020).
- Aziato, L., Antwi, H. O. Facilitators and barriers of herbal medicine use in Accra, Ghana: an inductive exploratory study. BMC Complementary and Alternative Medicine. 16, 142 (2016).
- Tao, H., et al. Rhodiola species: A comprehensive review of traditional use, phytochemistry, pharmacology, toxicity, and clinical study. Medicinal Research Reviews. 39 (5), 1779-1850 (2019).
- Wang, Y., et al. The dietary supplement Rhodiola crenulata extract alleviates dextran sulfate sodium-induced colitis in mice through anti-inflammation, mediating gut barrier integrity and reshaping the gut microbiome. Food & Function. 12 (7), 3142-3158 (2021).
- Xie, N. Rhodiola crenulate alleviates hypobaric hypoxia-induced brain injury via adjusting NF-κB/NLRP3-mediated inflammation. Phytomedicine. 103, 154240 (2022).
- Wang, X., et al. Salidroside, a phenyl ethanol glycoside from Rhodiola crenulata, orchestrates hypoxic mitochondrial dynamics homeostasis by stimulating Sirt1/p53/Drp1 signaling. Journal of Ethnopharmacology. 293, 115278 (2022).
- Ma, D., et al. Chemical characteristics of Rhodiola Crenulata and its mechanism in acute mountain sickness using UHPLC-Q-TOF-MS/MS combined with network pharmacology analysis. Journal of Ethnopharmacology. 294, 115345 (2022).
- Wang, X., et al. Rhodiola crenulata attenuates apoptosis and mitochondrial energy metabolism disorder in rats with hypobaric hypoxia-induced brain injury by regulating the HIF-1α/microRNA 210/ISCU1/2(COX10) signaling pathway. Journal of Ethnopharmacology. 241, 111801 (2019).
- d'Avigdor, E., Wohlmuth, H., Asfaw, Z., Awas, T. The current status of knowledge of herbal medicine and medicinal plants in Fiche, Ethiopia. Journal of Ethnobiology and Ethnomedicine. 10, 38 (2014).
- Sánchez, M., González-Burgos, E., Divakar, P. K., Gómez-Serranillos, M. P. DNA-based authentication and metabolomics analysis of medicinal plants samples by DNA barcoding and ultra-high-performance liquid chromatography/triple quadrupole mass spectrometry (UHPLC-MS). Plants (Basel, Switzerland). 9 (11), 1601 (2020).
- Rhodiola renulata (Hook.fil & Thomson) H.Ohba. , Available from: https://www.gbif.org/species/4200529 (2023).
- Plant + data center. , Available from: https://www.iplant.cn/ (2023).
- Chinese virtual herbarium. , Available from: https://www.cvh.ac.cn/ (2023).
- Cunningham, A. B. There "ain't no mountain high enough"?: The drivers, diversity and sustainability of China's Rhodiola trade. Journal of Ethnopharmacology. 252, 112379 (2020).
- Wang, Q., Ruan, X., Jin, Z. H., Yan, Q. C., Tu, S. Identification of Rhodiola species by using RP-HPLC. Journal of Zhejiang University. Science. B. 6 (6), 477-482 (2005).
- Dong, X., Guo, Y., Xiong, C., Sun, L. Evaluation of two major Rhodiola species and the systemic changing characteristics of metabolites of Rhodiola crenulata in different altitudes by chemical methods combined with UPLC-QqQ-MS-based metabolomics. Molecules. 25 (18), 4062 (2020).
- Zhao, W., et al. HPLC fingerprint differentiation between natural and ex situ populations of Rhodiola sachalinensis from Changbai Mountain, China. PloS One. 9 (11), 112869 (2014).
- Yu, Y. Y. Quality evaluation of Tibetan medicine Rhodiolae crenulatae radix et rhizome based on sensory recognition and near infrared spectrum analysis. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. , Chinese Master's Thesis (2020).
- Lv, X. M. Simultaneous determination of 5 chemical components in 3 kinds of Rhodiola rosea by HPLC. China Pharmacy. 29 (18), 2515-2519 (2018).
- Dong, T., Sha, Y., Liu, H., Sun, L. Altitudinal variation of metabolites, mineral elements and antioxidant activities of Rhodiola crenulata (Hook.f. & Thomson) H.Ohba. Molecules. 26 (23), 7383 (2021).
- Ma, D., et al. Application of UHPLC fingerprints combined with chemical pattern recognition analysis in the differentiation of six Rhodiola species. Molecules. 26 (22), 6855 (2021).
- Li, X. H., et al. Metabolic discrimination of different Rhodiola species using 1H-NMR and GEP combinational chemometrics. Chemical & Pharmaceutical Bulletin. 67 (2), 81-87 (2019).
- Liu, Y., et al. Identification of Hippophae species (Shaji) through DNA barcodes. Chinese Medicine. 10, 28 (2015).
