Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Biology
Click here for the English version

Biology

تصنيف خلل الحركة الناجم عن L-DOPA في نموذج الفئران المصاب من جانب واحد 6-OHDA لمرض باركنسون

Published: October 4, 2021 doi: 10.3791/62924
Automatic Translation
*1, *1, 1, 1
1Department of Psychology, Faculty of Philosophy, Sciences and Letters of Ribeirão Preto, University of São Paulo
* These authors contributed equally

Summary

تعد نماذج القوارض من خلل الحركة الناجم عن L-DOPA أدوات لا تقدر بثمن لتحديد التدخلات العلاجية لتخفيف التطور أو التخفيف من المظاهر التي تظهر بسبب الإدارة المتكررة ل L-DOPA. يوضح هذا البروتوكول كيفية تحفيز وتحليل الحركات الشبيهة بخلل الحركة في نموذج الفئران المصاب من جانب واحد 6-OHDA لمرض باركنسون.

Abstract

يشير خلل الحركة الناجم عن L-DOPA (LID) إلى المضاعفات الحركية التي تنشأ عن إعطاء L-DOPA لفترات طويلة للمرضى الذين يعانون من مرض باركنسون (PD). النمط الأكثر شيوعا الذي لوحظ في العيادة هو خلل الحركة بجرعة الذروة والذي يتكون من مظاهر سريرية للحركات الرقصية وخلل التوتر والباليستية. يحاكي نموذج الفئران 6-هيدروكسي دوبامين (6-OHDA) ل PD العديد من خصائص LID. بعد تكرار إعطاء L-DOPA ، تظهر الفئران المصابة ب 6-OHDA حركات تشبه خلل الحركة (على سبيل المثال ، حركات لا إرادية غير طبيعية ، AIMs). يوضح هذا البروتوكول كيفية تحفيز وتحليل AIMs في الفئران المصابة ب 6-OHDA مع استنفاد الدوبامين بنسبة 90٪ -95٪ في المسار الأسود. يمكن أن يؤدي الإعطاء المتكرر (3 أسابيع) من L-DOPA (5 مجم / كجم ، جنبا إلى جنب مع 12.5 مجم / كجم من benserazide) إلى تحفيز تطوير AIMs. يكشف تحليل الدورة الزمنية عن زيادة كبيرة في AIMs في 30-90 دقيقة (خلل الحركة بجرعة الذروة). تعد نماذج القوارض من LIDs أداة مهمة قبل السريرية لتحديد التدخلات الفعالة المضادة لخلل الحركة.

Introduction

يمثل سلائف الدوبامين L-3،4-ثنائي هيدروكسي فينيل ألانين (L-DOPA) العلاج الأكثر فعالية للأعراض الحركية لمرض باركنسون (PD)1. قد يخفف علاج L-DOPA من الأعراض الحركية المرتبطة بمرض باركنسون ولكنه يفقد فعاليته بمرور الوقت. تظهر التقلبات الحركية مثل "تذبذب التآكل" أو "تدهور نهاية الجرعة" سريريا كمدة قصيرة لتأثير جرعات L-DOPA المفردة2. في حالات أخرى ، تتكون المظاهر السريرية من حركات التواء بطيئة ومواقف غير طبيعية (خلل التوتر)3 وتحدث عندما تكون مستويات الدوبامين منخفضة (خلل التوتر العضلي خارج الفترة)4. من ناحية أخرى ، يظهر خلل الحركة الناجم عن L-DOPA (LID) عندما تكون مستويات الدوبامين في البلازما والدماغ مرتفعة5.

تنتج LIDs آثارا جانبية منهكة تشمل المضاعفات الحركية مثل حركات الكوريفورم وخلل التوتر والباليستية6. بمجرد إنشائها ، تحدث LIDs بعد كل إدارة L-DOPA. تحدث المضاعفات الحركية في 40٪ -50٪ من مرضى PD الذين يخضعون لعلاج L-DOPA لمدة 5 سنوات ، ويزداد معدل الإصابة على مر السنين7. على الرغم من أن الآليات الفيزيولوجية المرضية المشاركة في تطوير LIDs في مرضى PD لم يتم توضيحها بالكامل بعد ، إلا أن مدى إزالة التعصيب الدوبامين ، وإدارة L-DOPA النابضة ، والتغيرات النهائية في البروتينات والجينات المخططة ، والتشوهات في أنظمة الإرسال غير الدوبامين هي عوامل تساهم في تطوير هذه الآثار الجانبية غير المرغوب فيها6،8،9،10.

السم العصبي 6-هيدروكسي دوبامين (6-OHDA) هو أداة مميزة جيدا لدراسة PD في القوارض11،12،13،14. نظرا لأن 6-OHDA لا يعبر الحاجز الدموي الدماغي ، فيجب حقنه مباشرة في المسار الأسود. 6-استنفاد الدوبامين الناجم عن OHDA يعتمد على التركيز والموقع15. يمكن أن يؤدي الإعطاء أحادي الجانب ل 6-OHDA في حزمة الدماغ الأمامي الإنسي (MFB) إلى تلف نيغروسترياتي شديد (>90٪) في القوارض16،17،18،19. يؤدي الإعطاء المزمن ل L-DOPA إلى القوارض الشديدة من جانب واحد 6-OHDA إلى ظهور حركات تشبه خلل الحركة تسمى الحركات اللاإرادية غير الطبيعية (AIMs). تشترك الحركات الشبيهة بخلل الحركة في القوارض في آليات جزيئية ووظيفية ودوائية مماثلة تتعلق ب LIDs في مرضى PD5. لذلك ، فإن الجرذان6-OHDA 20 والفئران21 هي نماذج قيمة قبل السريرية لدراسة LID. عند علاجها بشكل مزمن (7-21 يوما) بجرعات علاجية من L-DOPA (5-20 مجم / كجم) ، تظهر الجرذان والفئران المصابة ب 6-OHDA من جانب واحد تطورا تدريجيا ل AIMs التي تؤثر على عضلات الأطراف الأمامية والجذع والفم والوجه المقابلة للآفة17،18،19،20،22،23،24 . يتم تقديم هذه الحركات في دورة زمنية مشابهة لخلل الحركة الناجم عن جرعة الذروة الناجم عن L-DOPA في مرضى PD25 وتتميز بحركات فرط الحركة وخلل التوترالعضلي 5. عادة ما يتم تسجيل AIMs بناء على شدتها (على سبيل المثال ، عند وجود AIM محدد) والسعة (على سبيل المثال ، تتميز بسعة كل حركة)5،23،25.

6-نماذج القوارض المصابة ب OHDA من LIDs تقدم صلاحية الوجه (أي أن النموذج له العديد من الخصائص التي تشبه الحالة البشرية)5،11،26،27،28. ينظر إلى AIMs القوارض ، على غرار ما يحدث في مرضى PD ، على أنها حركات مفرطة الحركة (الأطراف الأمامية واللسانية) وخلل التوتر (المحوري)29 وتحاكي خلل الحركة بجرعة الذروة. على المستوى الجزيئي والوظيفي ، تشترك نماذج القوارض في العديد من الخصائص المرضية مع مرضى PD5 ، مثل تنظيم FosB / ΔFosB19،26،30،31،32،33 وناقل السيروتونين (SERT) 34،35 . فيما يتعلق بالصلاحية التنبؤية ، فإن الأدوية التي تقلل من LIDs في مرضى PD (على سبيل المثال ، مضادات مستقبلات N-methyl-D-aspartate (NMDA) أمانتادين) تقدم فعالية مضادة للجلد في نموذج القوارض22،36،37،38،39.

تم إنشاء مقياس تصنيف AIMs للقوارض بناء على أربعة أنواع فرعية من AIMs تشمل AIMs التي تؤثر على الرأس والرقبة والجذع (AIMs المحورية) ، وحركات الأطراف الأمامية المفرطة الحركة (AIMs الأطراف) ، والحركات الفموية اللسانية الشبيهة بخلل الحركة (AIMs الفموية اللسانية). على الرغم من أن الدوران المقابل (AIMs القاطرة) موجود أيضا في القوارض المصابة من جانب واحد 20،22،23،25،40 ، إلا أنه لم يتم تسجيله كحركة تشبه خلل الحركة لأنه قد لا يمثل مقياسا محددا ل LIDs 22،37،41.

هنا ، سنصف كيفية تحفيز وتحليل الحركات الشبيهة بخلل الحركة (AIMs المحورية والأطراف والفموية) في نموذج الفئران الشديدة (>90٪) من جانب واحد 6-OHDA من PD. قمنا بتنظيم بروتوكولنا بناء على الأدبيات السابقة وخبرتنا المختبرية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

تم إجراء جميع التجارب وفقا للجنة الأخلاقيات بكلية الفلسفة والعلوم والآداب في ريبيراو بريتو (CEUA / FFCLRP 18.5.35.59.5).

1. 6-آفة OHDA

  1. استخدم ذكور الفئران Sprague-Dawley التي تزن 200-250 جم في بداية التجارب (6 أسابيع). إيواء الحيوانات (2-3 لكل قفص) في ظل ظروف المختبر القياسية (12:12 ساعة دورة الضوء / الظلام ، والأضواء مضاءة في الساعة 06:00 ، ومرافق يتم التحكم في درجة حرارتها (22-24 درجة مئوية) ، مع توفر الطعام والماء حسب الحاجة.
    ملاحظة: وصف كامل لكيفية توليد فئران شديدة مصابة ب 6-OHDA موصوفة في مكان آخر42.
  2. تأقلم الحيوانات بشكل مناسب قبل بداية أي إجراء تجريبي.
  3. يتم تطبيق (داخل الصفاق، أي ب) مثبط ناقل النورإبينفرين إيميبرامين (20 ملغ/ كغ، مذاب في محلول ملحي 0.9٪) قبل 30 دقيقة من الجراحة.
    ملاحظة: ستزيد إدارة إيميبرامين من انتقائية 6-OHDA للخلايا العصبية الدوبامينية.
  4. تطبيق الكيتامين/زيلازين (70/10 ملغ/ كغ) داخل الصفاق.
  5. تأكد من تخدير الحيوان بعمق بسبب عدم الاستجابة لقرص إصبع القدم ووضعه في وضع الانبطاح في الجهاز المجسم أعلى وسادة التدفئة.
  6. قم بإزالة الفراء على الرأس وتطهير المنطقة الجراحية 3 مرات ، بالتناوب بين فرك اليود والكحول.
  7. استخدم مشرطا لعمل شق (حوالي 1 سم) في المنطقة التي سيحدث فيها الحقن المجهري.
  8. نظف منطقة الجمجمة بمسحات قطنية وتأكد من تعرض Bregma و Lambda.
  9. تأكد من أن إحداثيات MFB المجسمة مأخوذة من bregma43،44،45: -4.3 مم أمامي ، 1.6 مم جانبي (الجانب الأيمن) ، و 8.3 مم بطني (من الأم الجافية).
  10. إدارة 6-OHDA بمعدل 0.4 ميكرولتر / دقيقة (10 ميكروغرام في 4 ميكرولتر من محلول ملحي يحتوي على 0.1٪ حمض الأسكوربيك) من جانب واحد في حزمة الدماغ الأمامي الإنسي الأيمن (MFB) باستخدام حقنة زجاجية هاملتون 50 ميكرولتر.
  11. في نهاية الجراحة ، قم بخياطة شق فروة الرأس وإعادة ترطيب الحيوان بمحلول ملحي معقم دافئ (~ 37 درجة مئوية) 0.9٪ (~ 10 مل / كجم ، s.c.).
  12. أخرج الحيوان من الإطار المجسم وضعه في قفص استرداد دافئ. راقب حتى يتم استعادة الوعي.
  13. تقييم فعالية آفة الدوبامين بعد 4 أسابيع من الآفة باستخدام اختبار متدرج46،47.
    ملاحظة: في هذا الاختبار ، يتم تقييم حركية الطرف الأمامي المقابل للآفة من خلال عدد خطوات الضبط مع مقدمة القدم المقابلة للآفة. تم تضمين الفئران التي تقدم ثلاث خطوات أو أقل للتكيف مع الطرف الأمامي المقابل في الدراسة على أنها فئران مفترضة شديدة 6-OHDA48.

2. L-DOPA العلاج المزمن

  1. ابدأ العلاج المزمن يوم الاثنين ، بعد 4 أسابيع من آفة 6-OHDA.
    ملاحظة: نظرا لأنه سيتم تصوير AIMs بالفيديو لمدة 3 أيام متتالية في الأسبوع (الأربعاء والخميس والجمعة) لمدة 3 أسابيع ، فمن المستحسن بدء العلاج يوم الاثنين.
  2. عالج الفئران ب L-DOPA الطازج (عن طريق تحت الجلد (s.c.) ، 1 مل / كجم) بالإضافة إلى بينسيرازيد هيدروكلوريد (5 مجم / كجم و 12.5 مجم / كجم ، على التوالي) لمدة 3 أسابيع ، مرة واحدة يوميا من الاثنين إلى الجمعة45.
    ملاحظة: بمجرد إنشائها ، ستظهر AIMs مع كل إدارة L-DOPA. لذلك ، فإن إدارة L-DOPA 2-4 مرات في الأسبوع بعد فترة الحث لمدة 3 أسابيع كافية للحفاظ على تعبير مستقر عن AIMs48.

3. تسجيل AIMs وتسجيلها

  1. إجراء التجارب بين الساعة 09:00 والساعة 17:00. تأكد من أن المحقق غير مدرك تماما لهوية الفئران والعلاج الدوائي.
  2. ضع الجرذ بعناية داخل أسطوانة شفافة (قطرها 20 سم × طولها 40 سم) واتركها تتأقلم لمدة 15 دقيقة على الأقل. تأكد من أن الأرضية مغطاة بمواد الفراش. يجب وضع المرايا خلف الأسطوانة حتى يتمكن المجرب من مراقبة الحيوان من جميع الزوايا الممكنة.
    ملاحظة: إذا كان هناك أكثر من فأر واحد لكل تجربة ، فاستخدم أسطوانة لكل فأر. التلاعب بالحيوانات بين الجلسات يمكن أن يتداخل مع التحليل السلوكي.
  3. ضع كاميرا فيديو عالية الدقة بطريقة تفضل عرض AIMs المحورية والأطراف والفموية. نظرا لوجود سلوك دوراني في ظل هذه الظروف التجريبية ، فإن المرايا الموجودة خلف الأسطوانة ستسمح بتتبع AIMs بزاوية 360 درجة. استخدم حامل ثلاثي القوائم أو ثبت الكاميرا مباشرة على الطاولة.
    ملاحظة: يمكن أن يكون تسجيل AIMs الفموي صعبا ، خاصة إذا كان هناك معدل مرتفع للسلوك الدوراني. سيساعد التقاط مقاطع الفيديو باستخدام الكاميرا الموضوعة أسفل المستوى قليلا حيث تكون الحيوانات بزاوية 15 درجة في مراقبة هذا النوع الفرعي من الحركة.
  4. أخرج الحيوان برفق من الأسطوانة وتناول L-DOPA (5 ملغ/كغ مع 12.5 ملغ/كغ من بنسيرازيد، s.c.).
  5. ضع الحيوان مرة أخرى في الأسطوانة وابدأ مؤقتا لتتبع AIMs بعد حقن L-DOPA. استخدم كاميرا فيديو لتسجيل AIMs لمدة 180 دقيقة بعد حقن L-DOPA. على الرغم من أنه يمكن إجراء التحليل عن طريق الملاحظة المباشرة للحيوان ، إلا أنه يفضل التسجيل في وضع عدم الاتصال.
    ملاحظة: تأكد من أن المؤقت مسجل أيضا بالفيديو بحيث يمكن تسجيل AIMs في أوقات محددة بعد إعطاء L-DOPA.
  6. سجل AIMs على فترات 30 دقيقة حتى 180 دقيقة بعد حقن L-DOPA (انظر الجدول 1 للحصول على تعريفات) كما هو موضح في البداية20,23. يجب إعطاء الدرجات على مدى 1-2 دقيقة من الفترات وتصنيفها على أنها محورية أو أطراف أو لغوية (الشكل 1).
  7. راقب بعناية كل AIM ودرجات السمات للشدة والسعة. استخدم الجدول 1 للحصول على التعليمات. لا تقم بتضمين السلوكيات العادية ، مثل التربية والاستنشاق والاستمالة والقضم في التصنيف. سيكون هناك ما مجموعه ست فترات مراقبة (30 و 60 و 90 و 120 و 150 و 180 دقيقة).
الأنواع الفرعية
محوري: التواء الرأس والرقبة والجذع
الأطراف: الحركات اللاإرادية لكل من الأطراف الأمامية البعيدة والقريبة
اللسان: الحركات اللاإرادية لعضلات الفم والوجه
شده
0: غائب
1: عرضية (مع انقطاعات ، موجودة في أقل من نصف وقت الملاحظة)
2: متكرر (مع انقطاع ولكنه موجود في أكثر من نصف وقت الملاحظة)
3: مستمر ولكن تقطعه المحفزات الحسية الخارجية
4: مستمر ولا تقطعه المنبهات الحسية الخارجية
السعه
المحوري
1: التواء الرأس والرقبة بزاوية 30 درجة تقريبا
2: التواء الرأس والرقبة بزاوية 30 درجة < تقريبا ≤ 60 درجة
3: التواء الرأس والرقبة والجذع العلوي بزاوية 60 درجة < تقريبا ≤ 90 درجة
4: التواء الرأس والرقبة والجذع بزاوية 90 درجة > ، مما يؤدي غالبا إلى فقدان الفئران توازنها
اطرافهم
1: حركات لا إرادية صغيرة للطرف الأمامي البعيد
2: حركات ذات سعة منخفضة تسبب نقل كل من الطرف الأمامي البعيد والقريب
3: الحركات اللاإرادية للطرف كله ، بما في ذلك عضلات الكتف
4: حركات قوية للأطراف والكتف ، غالبا ما تشبه الباليستية
اللغة الفموية
1: حركات لا إرادية صغيرة لعضلات الفم والوجه
2: حركات الفم والوجه ذات السعة العالية مع نتوء اللسان

الجدول 1: تعريف نظام الإدارة المتكاملة ومعايير التصنيف.

Figure 1
الشكل 1: تسلسل الصور التي توضح كل نوع فرعي من أنواع AIM. (أ إلى أ'") يظهر الهدف المحوري حركات تشبه خلل التوتر في زوايا مختلفة (A: زاوية 30 درجة ، A': زاوية 30 درجة < ≤ 60 درجة ، A": زاوية 60 درجة < ≤ 90 درجة ، و A'": زاوية > 90 درجة). (ب إلى ب") Limb AIM (الأسهم السوداء) تظهر الحركات اللاإرادية للطرف البعيد (B و B') والطرف الأمامي بالكامل (بما في ذلك الكتف ، B"). (ج) AIM الفموي اللساني (السهم الأحمر) بسعة عالية مع نتوء اللسان. الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

4. تحليل البيانات

  1. احسب الأنواع الفرعية ل AIMs المحورية أو الأطراف أو الفموية اللسانية بضرب درجات الشدة والسعة لكل فترة ملاحظة بعد إعطاء L-DOPA (أي ست فترات مراقبة) كما هو موضح سابقا20. الدرجة القصوى النظرية التي يمكن أن يجمعها واحد في جلسة اختبار واحدة هي 240 (الحد الأقصى للدرجة لكل فترة ملاحظة هو 40 ، انظر الجدول 1 للحصول على التفاصيل).
  2. رسم درجات AIMs لجميع فترات المراقبة الست المسجلة أيام الأربعاء والخميس والجمعة على مدار 3 أسابيع من إدارة L-DOPA المزمنة (الشكل 2). يمكن تلخيص AIMs للإشارة إلى الحد الأقصى لدرجة كل في كل يوم تسجيل (الشكل 3) أو كل أسبوع (الشكل 4) على مدار 3 أسابيع من إدارة L-DOPA المزمنة.
  3. تحقق مما إذا كانت البيانات لها توزيع قريب من الطبيعي قبل تحديد نهج التحليل الإحصائي.
    ملاحظة: تتكون مقاييس تصنيف AIMs من بيانات ترتيبية ويمكن تحليلها باستخدام إحصائيات غير معلمية. تستخدم الاختبارات البارامترية على نطاق واسع عند مقارنة درجات AIMs عبر المجموعات التجريبية بعد جلسات الاختبار المتكررة40.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

على الرغم من أن أنماط AIMs التي لوحظت في الفئران أبسط ومحدودة مقارنة بتلك التي لوحظت في البشر والرئيسيات غير البشرية ، فإن هذا النموذج يعيد إنتاج كل من الحركات المفرطة الحركة والحركات الشبيهة بخلل التوتر الناتجة عن إدارة L-DOPA المزمنة. نقدم هنا البيانات التي تم جمعها من مجموعة (ن = 10) من الفئران المصابة من جانب واحد 6-OHDA التي عولجت بشكل مزمن ب L-DOPA (5 مجم / كجم مع 12.5 مجم / كجم من البنسيرازيد) لمدة 3 أسابيع (من الاثنين إلى الجمعة). لاحظ أن البيانات الواردة في الشكل 2 والشكل 3 والشكل 4 مأخوذة من نفس الحيوانات.

يوضح الشكل 2 تحليل الدورة الزمنية للدرجات المطبقة على AIMs المحورية والأطراف واللسانية على مدار 3 أسابيع من إدارة L-DOPA المزمنة. يتم الإبلاغ عن كل نوع فرعي من درجات AIM في فترة مراقبة محددة على أنه ضرب درجات الشدة والسعة في هذا التحليل. يمكن أن يكون هذا النوع من التحليل مناسبا لاستكشاف تأثير الأدوية التي تتداخل مع المظهر الزمني ل AIMs.لاحظ أن خلل الحركة الناجم عن جرعة الذروة الناجم عن L-DOPA يحدث بين 30-90 دقيقة مع انخفاض تدريجي بعد 120 دقيقة بعد الحقن (الشكل 2).

Figure 2
الشكل 2: تحليل الدورة الزمنية الذي يوضح AIMs المحورية والأطراف والفموية على مدى 3 أسابيع من إعطاء L-DOPA المزمن (5 مجم / كجم مع 12.5 مجم / كجم من البنسيرازيد) إلى 6 فئران مصابة ب OHDA. (أ) تم تسجيل AIMs المحورية ، (B) الأطراف ، و (C) AIMs الفموية اللسانية أيام الأربعاء والخميس والجمعة على مدار 3 أسابيع من إعطاء L-DOPA المزمن. يتم الإبلاغ عن كل نوع فرعي من AIM على أنه ضرب سعة أوقات الشدة في كل فترة من فترات المراقبة الست. يمكن تحليل كل نوع فرعي من AIM بشكل فردي أو تلخيصه كما هو موضح في (D). لاحظ أن ذروة شدة AIMs ستزداد تدريجيا خلال الأسبوع الأول من إدارة L-DOPA المزمنة. يتم التعبير عن البيانات كمتوسط ± SEM (ن = 10). الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

يوضح الشكل 3 مجموع درجات AIMs المقدمة لجميع فترات المراقبة الست الموضحة في الشكل 2 (مجموعات البيانات مرمزة بالألوان لسهولة المقارنات). يشير هذا التحليل إلى الحد الأقصى لدرجة كل في كل يوم تسجيل (الأربعاء والخميس والجمعة) على مدار 3 أسابيع من إعطاء L-DOPA المزمن. يمكن أن يكون هذا النوع من التحليل مفيدا لاستكشاف تأثير المركبات ذات الملامح المحتملة المضادة للجلد ، خاصة لأن درجات AIMs مستقرة خلال الأسبوعين 2 و 3 من إدارة L-DOPA المزمنة. علاوة على ذلك ، يمكن إنشاء درجات AIMs الأسبوعية (الشكل 4) من مجموع الدرجات المنسوبة إلى الفئران المصابة ب 6-OHDA أيام الأربعاء والخميس والجمعة.

Figure 3
الشكل 3: مجموع AIMs المحورية والأطراف والفموية في أيام التسجيل الفردية على مدار 3 أسابيع من إعطاء L-DOPA المزمن (5 مجم / كجم مع 12.5 مجم / كجم من benserazide) إلى 6 فئران مصابة ب OHDA. في هذا الشكل ، تم جمع درجات AIMs المقدمة في كل فترة من فترات المراقبة الست (انظر التفاصيل في وسيلة إيضاح الشكل 2). تم ترميز مجموعات البيانات الفردية بالألوان لمقارنتها بالبيانات المعروضة في الشكل 2. يشير هذا التحليل إلى الحد الأقصى لدرجة كل في كل يوم تسجيل (الأربعاء - W ، الخميس - T ، والجمعة - F) بعد 3 أسابيع من إعطاء L-DOPA المزمن. أ: المحورية، ب: الأطراف، ج: AIMs الفموية اللسانية. د: مجموع AIMs المحورية والأطراف والفموية. كشفت المقاييس المتكررة أحادية الاتجاه ANOVA و Holm-Sidak بعد الاختبار أن AIMs تزداد تدريجيا على الإدارة المزمنة ل L-DOPA. لاحظ أن درجات AIMs مستقرة خلال الأسبوعين 2 و 3 من إدارة L-DOPA المزمنة (* p < 0.05 ، ** p < 0.01 ، ***p < 0.001 مقابل الأربعاء (W) في الأسبوع 1). يتم التعبير عن البيانات كمتوسط ± SEM (ن = 10). الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

Figure 4
الشكل 4: مجموع AIMs المحورية والأطراف والفموية الأسبوعية خلال إعطاء L-DOPA المزمن (5 مجم / كجم مع 12.5 مجم / كجم من البنسيرازيد) إلى 6 فئران مصابة ب OHDA. في هذا الشكل ، تم جمع AIMs التي تم تسجيلها كل أسبوع (الأربعاء والخميس والجمعة - انظر الشكل 3). يشير هذا التحليل إلى الحد الأقصى لدرجة كل في كل أسبوع من إعطاء L-DOPA المزمن. أ: المحورية، ب: الأطراف، ج: AIMs الفموية اللسانية. د: مجموع AIMs المحورية والأطراف والفموية. كشفت المقاييس المتكررة أحادية الاتجاه ANOVA و Holm-Sidak عن أن AIMs تزيد على الإدارة المزمنة ل L-DOPA (* p < 0.05 مقابل الأسبوع 1). يتم التعبير عن البيانات كمتوسط ± SEM (ن = 10). الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

يوضح هذا البروتوكول كيفية حث وتحليل AIMs في نموذج الفئران ل PD الناجم عن الحقن المجهري أحادي الجانب ل 6-OHDA في MFB. أدى الإعطاء اليومي المزمن لجرعات منخفضة من L-DOPA (5 ملغ/كغ، جنبا إلى جنب مع 12.5 ملغ/كغ من البنسيرازيد) إلى تطوير AIMs على مدى 3 أسابيع من العلاج. كشف التحليل الزمني عن زيادة كبيرة في AIMs ، ولوحظ خلل الحركة بجرعة الذروة بين 30 و 90 دقيقة بعد إعطاء L-DOPA. AIMs هي حركات متكررة وغير هادفة تؤثر على العضلات المحورية والأطراف والعضلات الفموية. يتفق البروتوكول والبيانات المقدمة هنا مع الأدبيات السابقة22،23،49،50،51.

مقياس تصنيف AIMs المحوري والأطراف والفم واللسان حساس للغاية لأنه يصنف مقدار الوقت (أي الشدة) الذي تعرض فيه القوارض حركات تشبه خلل الحركة ويشير إلى سعة هذه الحركات20. يمكن التعبير عن درجات AIMs بدقة زمنية مختلفة (انظر الشكل 2 ، الشكل 3 ، الشكل 4)17،18،19،52. تناولت العديد من الدراسات دور جرعة L-DOPA في تطوير AIMs. يفضل الإعطاء المزمن لجرعات أقل من L-DOPA (5-20 مجم / كجم) التطور التدريجي ل AIMs على العلاج ، بينما تؤدي الجرعات العالية من L-DOPA (25 مجم / كجم أو أكثر) إلى التطور السريع والقوي ل AIMs 23،25،27،53. ومن المثير للاهتمام ، أن نسبة من الحيوانات المصابة بآفة 6-OHDA الشديدة قد لا تتطور إلى AIMs (أو لديها درجات AIMs منخفضة جدا) بعد الإعطاء المزمن لجرعات منخفضة من L-DOPA40،49،53. من الضروري أيضا النظر في مسار إدارة L-DOPA. على الرغم من أن AIMs تشترك في بداية مماثلة ، وملف تعريف الوقت ، ودرجةالشدة 40 ، فقد ثبت أن نوبات فشل الجرعة حدثت بشكل متكرر في الفئران التي عولجت داخل الصفاق27. أيضا ، i.p. إدارة L-DOPA أنتجت اختلافات بين الأفراد في مستويات البلازما ، وهو تأثير لم يلاحظ بعد حقن s.c.27.

في هذه الدراسة ، كانت AIMs واضحة في الحيوانات ذات الأضرار السوداء الشديدة (أكثر من 90 ٪ من استنفاد الدوبامين). يتميز الفقدان الهائل لتعصيب الدوبامين المخطط بانخفاض في عدد خطوات التعديل التي يتم إجراؤها مع الطرف الأمامي المقابل للآفة48. لذلك ، نوصي بإجراء اختبار الخطوة لاختيار الحيوانات المصابة بآفات 6-OHDA الشديدة المفترضة في المسار الأسود. يستخدم اختبار الدوران الناجم عن الأمفيتامين بشكل شائع لاختيار الفئران المفترضة المصابة ب 6-OHDA. يزيد الأمفيتامين من إطلاق الدوبامين في المخطط السليم ، وبالتالي يزيد من عدم التوازن الحالي بين المخطط المعصب والمنزوع العصبي. ومع ذلك ، كشفت دراسة مثيرة للاهتمام أجريت على 312 فأرا مصابة ب 6-OHDA11 عن عدم وجود علاقة بين الدوران الناجم عن الأمفيتامين والخلايا الإيجابية لهيدروكسيلاز التيروزين في المادة السوداء المماثلة pars compacta. أظهرت هذه الدراسة نفسها وجود علاقة ضعيفة بين الدوران الناجم عن الأمفيتامين وشدة AIMs.

هناك علاقة واضحة بين ظواهر AIMs ونمط استنفاد الدوبامين nigrostriatal20. نموذج الفئران 6-OHDA من PD الذي استخدمناه في هذا البروتوكول يطور استنفادا شديدا من جانب واحد لمحطات الدوبامين nigrostriatal بعد ضخ 6-OHDA في MFB. الفئران المستنفدة بالكامل للدوبامين 6-OHDA لديها نسبة أعلى من AIMs مقارنة بالحيوانات المستنفدة جزئيا للدوبامين. تم وصف تحليل مفصل للتعبير المخطط للدينورفين العصبي والببتيدات بعد آفة 6-OHDA وإدارة L-DOPA المزمنة في مكان آخر45 ويتوافق مع الأدبيات السابقة23،25. على المستوى الجزيئي ، تشترك القوارض خلل الحركة في العلامات الجزيئية المرتبطة بخلل الحركة الواضح في نماذج الرئيسيات غير البشرية لمرضى PD و PD ، مثل التنظيم المخطط لعامل النسخ ΔFosB26،32،33،54. أيضا ، يظهر نموذج القوارض من PD زيادة كثافة الأوعية الدقيقة في المخطط استجابة لعلاج L-DOPA55 بطريقة مماثلة لوحظت في بوتامين من مرضى PD56. تستجيب نماذج القوارض من LIDs للنهج الدوائية المضادة للجلد المستخدمة في العيادة ، مثل مضادات مستقبلات NMDA أمانتادين 22،23،24،25،26،27،28،29،30،31،32،33،34 ، 35،36،37 ، 38،39. إجمالا ، تؤكد هذه الأدلة صحة الوجه والصلاحية التنبؤية لنموذج الفئران 6-OHDA لتوصيف الفيزيولوجيا المرضية ل LIDs ولفحص المركبات ذات الخصائص المضادة للحركة. نموذج الفئران من LIDs هو أيضا أداة قيمة لدراسة العديد من جوانب LIDs في الفئران المعدلة وراثيا. يمكن العثور على بروتوكولات نموذج الفئران من LIDs في أوراق من مجموعات بحثية مختلفة30،57،58.

من المهم ملاحظة أن نموذج القوارض 6-OHDA من LIDs له قيود. 6-OHDA الناجم عن استنفاد الدوبامين حاد مقارنة بالطبيعة التقدمية لاستنفاد nigrostriatal في مريض PD5. أيضا ، قد يكون من الصعب العثور على نافذة علاجية ممتازة لاستخدام دواء مضاد للحركة في المرضى لأن زيادة جرعة الدواء قد تتداخل مع التأثير المفيد الناتج عن L-DOPA أو تحفز آثارا جانبية ربما لم يتم ملاحظتها في النموذج الحيواني59,60. هناك قيد آخر على نموذج الفئران ل LIDs وهو عدم وجود تشابه جسدي بين AIMs في القوارض ومظهر من مظاهر الحركات الرقاصية التي لوحظت في المرضى والرئيسيات غير البشرية10،61،62. هناك قيد محتمل آخر للبروتوكول المقدم هنا وهو أنه يتم تسجيل AIMs كل 30 دقيقة بعد إعطاء L-DOPA ، ولكن يمكن إدارة هذه المشكلة إذا قام المجرب بتصوير جميع الحيوانات بالفيديو لمدة 180 دقيقة بعد إدارة L-DOPA. يمكن للمجرب بعد ذلك ضبط بروتوكول التسجيل لتسجيل المزيد من النقاط المتكررة (على سبيل المثال ، كل 10 أو 20 دقيقة). هذا النهج مفيد في التجارب التي تتطلب صورة أكثر ديناميكية للدورة الزمنية AIMs (على سبيل المثال ، الجمع بين تسجيل AIMs والتسجيلات الكهربية أو الكيميائية العصبية في الجسم الحي).

في الختام ، فإن نموذج الفئران 6-OHDA من LID يعيد إنتاج الفيزيولوجيا المرضية للمرض ويطور AIMs التي يمكن تعديلها بواسطة الأدوية المستخدمة سريريا. على الرغم من وجود قيود ، إلا أن نموذج الفئران 6-OHDA من LID لا يزال يمثل أداة قبل سريرية لا تقدر بثمن لتحديد التدخلات الفعالة المضادة لخلل الحركة ذات الإمكانات الانتقالية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح.

Acknowledgments

تم دعم هذا العمل من قبل مؤسسة أبحاث ساو باولو (FAPESP ، منحة 2017/00003-0). نحن ممتنون للتنسيق من أجل تحسين موظفي التعليم العالي (CAPES). نشكر الدكتور أنتوني آر ويست والدكتور هاينز شتاينر والدكتور كوي واي تسينغ على الدعم والتوجيه.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
6-hydroxydopamine hydrobromide Sigma-Aldrich, USA H6507 Neurotoxin that produces degeneration of catecholaminergic terminals
Benzerazide hydrochloride Sigma B7283 Peripheral dopa-decarboxylase inhibitor
Camera Bullet IR Turbo HD (HD-TVI)  2.8mm B HIKVISION DS-2CE16C0T-IRP Camera used to record all behavior
Imipramine hidrochloride Alfa Aesar J63723 Norepinephrine transporter inhibitor (NET) used to protect noradrenergic neurons from 6-OHDA
Ketamine hydrochloride Ceva Animal Health Anesthesia for surgical intervention
L-3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) methyl ester (hydrochloride) Cayman Chemical Company 16149 Dopamine precursor
Mirrors Used to observe the behavior of animals during experiments in all directions
Needles 0.30 x 13 mm PrecisionGlide Needles used to inject drugs
Sodium chloride (NaCl) Samtec Salt
Syringes 1 ml Sterile BD Plastipak Syringes used to inject drugs
Transparent cylinders Used to record animal behavior during experiments
Xylazine hydrochloride Ceva Animal Health Sedative, analgesic and muscle relaxant for surgical intervention

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Jenner, P. Molecular mechanisms of L-DOPA-induced dyskinesia. Nature Reviews. Neuroscience. 9 (9), 665-677 (2008).
  2. Nutt, J. G. Levodopa-induced dyskinesia: review, observations, and speculations. Neurology. 40 (2), 340-345 (1990).
  3. Luquin, M. R., Scipioni, O., Vaamonde, J., Gershanik, O., Obeso, J. A. Levodopa-induced dyskinesias in Parkinson's disease: clinical and pharmacological classification. Movement Disorders: Official Journal of the Movement Disorder Society. 7 (2), 117-124 (1992).
  4. Fabbrini, G., Brotchie, J. M., Grandas, F., Nomoto, M., Goetz, C. G. Levodopa-induced dyskinesias. Movement Disorders: Official Journal of the Movement Disorder Society. 22 (10), 1379 (2007).
  5. Cenci, M. A., Crossman, A. R. Animal models of l-dopa-induced dyskinesia in Parkinson's disease. Movement Disorders: Official Journal of the Movement Disorder Society. 33 (6), 889-899 (2018).
  6. Bastide, M. F., et al. Pathophysiology of L-dopa-induced motor and non-motor complications in Parkinson's disease. Progress in Neurobiology. 132, 96-168 (2015).
  7. Manson, A., Stirpe, P., Schrag, A. Levodopa-induced-dyskinesias clinical features, incidence, risk factors, management and impact on quality of life. Journal of Parkinson's Disease. 2 (3), 189-198 (2012).
  8. Grandas, F., Galiano, M. L., Tabernero, C. Risk factors for levodopa-induced dyskinesias in Parkinson's disease. Journal of Neurology. 246 (12), 1127-1133 (1999).
  9. Schrag, A., Quinn, N. Dyskinesias and motor fluctuations in Parkinson's disease. A community-based study. Brain: A Journal of Neurology. 123, Pt 11 2297-2305 (2000).
  10. Bezard, E., Brotchie, J. M., Gross, C. E. Pathophysiology of levodopa-induced dyskinesia: potential for new therapies. Nature Reviews. Neuroscience. 2 (8), 577-588 (2001).
  11. Tronci, E., Shin, E., Björklund, A., Carta, M. Amphetamine-induced rotation and L-DOPA-induced dyskinesia in the rat 6-OHDA model: a correlation study. Neuroscience Research. 73 (2), 168-172 (2012).
  12. Duty, S., Jenner, P. Animal models of Parkinson's disease: a source of novel treatments and clues to the cause of the disease. British Journal of Pharmacology. 164 (4), 1357-1391 (2011).
  13. Ungerstedt, U. 6-Hydroxy-dopamine induced degeneration of central monoamine neurons. European Journal of Pharmacology. 5 (1), 107-110 (1968).
  14. Ungerstedt, U. Postsynaptic supersensitivity after 6-hydroxy-dopamine induced degeneration of the nigro-striatal dopamine system. Acta Physiologica Scandinavica. Supplementum. 367, 69-93 (1971).
  15. Kirik, D., Rosenblad, C., Bjorklund, A. Characterization of behavioral and neurodegenerative changes following partial lesions of the nigrostriatal dopamine system induced by intrastriatal 6-hydroxydopamine in the rat. Experimental Neurology. 152, 259-277 (1998).
  16. Zahm, D. S. Compartments in rat dorsal and ventral striatum revealed following injection of 6-hydroxydopamine into the ventral mesencephalon. Brain Research. 552 (1), 164-169 (1991).
  17. Padovan-Neto, F. E., Echeverry, M. B., Tumas, V., Del-Bel, E. A. Nitric oxide synthase inhibition attenuates L-DOPA-induced dyskinesias in a rodent model of Parkinson's disease. Neuroscience. 159 (3), 927-935 (2009).
  18. Padovan-Neto, F. E., et al. Antidyskinetic effect of the neuronal nitric oxide synthase inhibitor is linked to decrease of FosB/deltaFosB expression. Neuroscience Letters. 541, 126-131 (2013).
  19. Padovan-Neto, F. E., Cavalcanti-Kiwiatkoviski, R., Carolino, R. O., Anselmo-Franci, J., Del Bel, E. Effects of prolonged neuronal nitric oxide synthase inhibition on the development and expression of L-DOPA-induced dyskinesia in 6-OHDA-lesioned rats. Neuropharmacology. 89, 87-99 (2015).
  20. Winkler, C., Kirik, D., Björklund, A., Cenci, M. A. L-DOPA-induced dyskinesia in the intrastriatal 6-hydroxydopamine model of parkinson's disease: relation to motor and cellular parameters of nigrostriatal function. Neurobiology of Disease. 10 (2), 165-186 (2002).
  21. Francardo, V., et al. Impact of the lesion procedure on the profiles of motor impairment and molecular responsiveness to l-DOPA in the 6-hydroxydopamine mouse model of Parkinson's disease. Neurobiology of Disease. 42, 327-340 (2011).
  22. Lundblad, M., et al. Pharmacological validation of behavioural measures of akinesia and dyskinesia in a rat model of Parkinson's disease. The European Journal of Neuroscience. 15 (1), 120-132 (2002).
  23. Cenci, M. A., Lee, C. S., Björklund, A. L-DOPA-induced dyskinesia in the rat is associated with striatal overexpression of prodynorphin- and glutamic acid decarboxylase mRNA. The European Journal of Neuroscience. 10 (8), 2694-2706 (1998).
  24. Henry, B., Crossman, A. R., Brotchie, J. M. Characterization of enhanced behavioral responses to L-DOPA following repeated administration in the 6-hydroxydopamine-lesioned rat model of Parkinson's disease. Experimental Neurology. 151 (2), 334-342 (1998).
  25. Lee, C. S., Cenci, M. A., Schulzer, M., Björklund, A. Embryonic ventral mesencephalic grafts improve levodopa-induced dyskinesia in a rat model of Parkinson's disease. Brain: A Journal of Neurology. 123, Pt 7 1365-1379 (2000).
  26. Andersson, M., Hilbertson, A., Cenci, M. A. Striatal fosB expression is causally linked with l-DOPA-induced abnormal involuntary movements and the associated upregulation of striatal prodynorphin mRNA in a rat model of Parkinson's disease. Neurobiology of Disease. 6 (6), 461-474 (1999).
  27. Lindgren, H. S., Rylander, D., Ohlin, K. E., Lundblad, M., Cenci, M. A. The "motor complication syndrome" in rats with 6-OHDA lesions treated chronically with L-DOPA: relation to dose and route of administration. Behavioural Brain Research. 177 (1), 150-159 (2007).
  28. Animal Models of Movement Disorders: volume I, Neuromethods. Lane, E. L., Dunnett, S. 61, Springer Science+Business Media. (2011).
  29. Carlsson, T., Carta, M., Winkler, C., Björklund, A., Kirik, D. Serotonin neuron transplants exacerbate l-DOPA-induced dyskinesias in a rat model of Parkinson's disease. Journal of Neuroscience. 27 (30), 8011-8022 (2007).
  30. Lundblad, M., Picconi, B., Lindgren, H., Cenci, M. A. A model of L-DOPA-induced dyskinesia in 6-hydroxydopamine lesioned mice: relation to motor and cellular parameters of nigrostriatal function. Neurobiology of Disease. 16 (1), 110-123 (2004).
  31. Fasano, S., et al. Inhibition of Ras-guanine nucleotide-releasing factor 1 (Ras-GRF1) signaling in the striatum reverts motor symptoms associated with L-dopa-induced dyskinesia. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (50), 21824-21829 (2010).
  32. Berton, O., et al. Striatal overexpression of DeltaJunD resets L-DOPA-induced dyskinesia in a primate model of Parkinson disease. Biological Psychiatry. 66 (6), 554-561 (2009).
  33. Lindgren, H. S., et al. Putaminal upregulation of FosB/ΔFosB-like immunoreactivity in Parkinson's disease patients with dyskinesia. Journal of Parkinson's Disease. 1 (4), 347-357 (2011).
  34. Rylander, D., et al. Maladaptive plasticity of serotonin axon terminals in levodopa-induced dyskinesia. Annals of Neurology. 68 (5), 619-628 (2010).
  35. Smith, R., et al. The role of pallidal serotonergic function in Parkinson's disease dyskinesias: a positron emission tomography study. Neurobiology of Aging. 36 (4), 1736-1742 (2015).
  36. Lundblad, M., et al. Pharmacological validation of a mouse model of l-DOPA-induced dyskinesia. Experimental Neurology. 194 (1), 66-75 (2005).
  37. Dekundy, A., Lundblad, M., Danysz, W., Cenci, M. A. Modulation of L-DOPA-induced abnormal involuntary movements by clinically tested compounds: further validation of the rat dyskinesia model. Behavioural Brain Research. 179 (1), 76-89 (2007).
  38. Blanchet, P. J., Konitsiotis, S., Chase, T. N. Amantadine reduces levodopa-induced dyskinesias in parkinsonian monkeys. Movement Disorders: Official Journal of the Movement Disorder Society. 13 (5), 798-802 (1998).
  39. Verhagen Metman, I., et al. Amantadine as treatment for dyskinesias and motor fluctuations in Parkinson's disease. Neurology. 50 (5), 1323-1326 (1998).
  40. Cenci, M. A., Lundblad, M. Ratings of L-DOPA-induced dyskinesia in the unilateral 6-OHDA lesion model of Parkinson's disease in rats and mice. Current Protocols in Neuroscience. , Chapter 9, Unit 9 25 (2007).
  41. Dupre, K. B., et al. Effects of coincident 5- HT1A receptor stimulation and NMDA receptor antagonism on L-DOPA-induced dyskinesia and rotational behaviors in the hemi-parkinsonian rat. Psychopharmacology (Berl). 199 (1), 99-108 (2008).
  42. Guimarães, P. R., Bariotto-dos-Santos, K., Ribeiro, D. L., Padovan-Neto, F. E. The 6-hydroxydopamine (6-OHDA) rat model of Parkinson's disease. Journal of Visualized Experiments: JoVE. , (2021).
  43. Paxinos, G., Watson, C. The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates. , Academic Press. New York. (1998).
  44. Tseng, K. Y., et al. Inhibition of striatal soluble guanylyl cyclase-cGMP signaling reverses basal ganglia dysfunction and akinesia in experimental parkinsonism. PloS One. 6 (11), 27187 (2011).
  45. Padovan-Neto, F. E., et al. Selective regulation of 5-HT1B serotonin receptor expression in the striatum by dopamine depletion and repeated L-DOPA treatment: Relationship to L-DOPA-induced dyskinesias. Molecular Neurobiology. 57 (2), 736-751 (2020).
  46. Olsson, M., Nikkhah, G., Bentlage, C., Bjorklund, A. Forelimb akinesia in the rat Parkinson model: Differential effects of dopamine agonists and nigral transplants as assessed by a new stepping test. Journal of Neuroscience. 15, 3863-3875 (1995).
  47. Chang, J. W., Wachtel, S. R., Young, D., Kang, U. J. Biochemical and anatomical characterization of forepaw adjusting steps in rat models of Parkinson's disease lesions. Neuroscience. 88, 617-628 (1995).
  48. Jayasinghe, V. R., Flores-Barrera, E., West, A. R., Tseng, K. Y. Frequency-dependent corticostriatal disinhibition resulting from chronic dopamine depletion: Role of local striatal cGMP and GABAAR signaling. Cerebral Cortex. 27, 625-634 (2017).
  49. Picconi, B., et al. Loss of bidirectional striatal synaptic plasticity in L-DOPA-induced dyskinesia. Nature Neuroscience. 6 (5), 501-506 (2003).
  50. Carta, M., et al. Role of striatal L-DOPA in the production of dyskinesia in 6-hydroxydopamine lesioned rats. Journal of Neurochemistry. 96 (6), 1718-1727 (2006).
  51. Westin, J. E., Andersson, M., Lundblad, M., Cenci, M. A. Persistent changes in striatal gene expression induced by long-term L-DOPA treatment in a rat model of Parkinson's disease. The European Journal of Neuroscience. 14 (7), 1171-1176 (2001).
  52. Bariotto-Dos-Santos, K., et al. Repurposing an established drug: an emerging role for methylene blue in L-DOPA-induced dyskinesia. The European Journal of Neuroscience. 49 (6), 869-882 (2018).
  53. Lindgren, H. S., Lane, E. L. Rodent Models of l-DOPA-Induced Dyskinesia. Animal Models of Movement Disorders. Neuromethods. Lane, E., Dunnett, S. 61, Humana Press. (2011).
  54. Doucet, J., et al. Drug-drug interactions related to hospital admissions in older adults: A prospective study of 1000 patients. Journal of the American Geriatrics Society. 44, 944-948 (1996).
  55. Ohlin, K. E., et al. Vascular endothelial growth factor is upregulated by L-dopa in the parkinsonian brain: implications for the development of dyskinesia. Brain: A Journal of Neurology. 134, Pt 8 2339-2357 (2011).
  56. Jourdain, V. A., et al. Increased putamen hypercapnic vasoreactivity in levodopa-induced dyskinesia. JCI insight. 2 (20), 96411 (2017).
  57. Thiele, S. L., et al. Generation of a model of l-DOPA-induced dyskinesia in two different mouse strains. Journal of Neuroscience Methods. 197 (2), 193-208 (2011).
  58. Dos-Santos-Pereira, M., et al. Contributive role of TNF-α to L-DOPA-induced dyskinesia in a unilateral 6-OHDA lesion model of Parkinson's disease. Frontiers in Pharmacology. 11, 617085 (2021).
  59. Cenci, M. A., Ohlin, K. E., Odin, P. Current options and future possibilities for the treatment of dyskinesia and motor fluctuations in Parkinson's disease. CNS & Neurological Disorders Drug Targets. 10 (6), 670-684 (2011).
  60. Cenci, M. A. Presynaptic mechanisms of l-DOPA-induced dyskinesia: The findings, the debate, and the therapeutic implications. Frontiers in Neurology. 5, 242 (2014).
  61. Langston, J. W., Quik, M., Petzinger, G., Jakowec, M., Di Monte, D. A. Investigating levodopa-induced dyskinesias in the parkinsonian primate. Annals of Neurology. 47 (4), Suppl 1 79-89 (2000).
  62. Chase, T. N. Levodopa therapy: consequences of the nonphysiologic replacement of dopamine. Neurology. 50 (5), Suppl 5 17-25 (1998).

Tags

علم الأحياء، العدد 176، مرض باركنسون، العقد القاعدية، 6-هيدروكسي دوبامين، خلل الحركة الناجم عن L-DOPA، الحركات اللاإرادية غير الطبيعية
تصنيف خلل الحركة الناجم عن L-DOPA في نموذج الفئران المصاب من جانب واحد 6-OHDA لمرض باركنسون
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Bariotto-dos-Santos, K., Ribeiro, D. … More

Bariotto-dos-Santos, K., Ribeiro, D. L., Guimarães, R. P., Padovan-Neto, F. E. Rating L-DOPA-Induced Dyskinesias in the Unilaterally 6-OHDA-Lesioned Rat Model of Parkinson's Disease. J. Vis. Exp. (176), e62924, doi:10.3791/62924 (2021).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter