Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Biology
Click here for the English version

Biology

Parkinson Hastalığının Tek Taraflı 6-OHDA-Lezyonlu Sıçan Modelinde L-DOPA-İndüklenen Diskinezilerin Değerlendirilmesi

Published: October 4, 2021 doi: 10.3791/62924
Automatic Translation
*1, *1, 1, 1
1Department of Psychology, Faculty of Philosophy, Sciences and Letters of Ribeirão Preto, University of São Paulo
* These authors contributed equally

Summary

L-DOPA ile indüklenen diskinezilerin kemirgen modelleri, L-DOPA'nın tekrarlanan uygulaması nedeniyle ortaya çıkan belirtileri hafifletmek veya gelişimi hafifletmek için terapötik müdahaleleri tanımlamak için paha biçilmez araçlardır. Bu protokol, Parkinson hastalığının tek taraflı 6-OHDA lezyonlu sıçan modelinde diskinetik benzeri hareketlerin nasıl indükleneceğini ve analiz edileceğini göstermektedir.

Abstract

L-DOPA ile indüklenen diskineziler (LID'ler), Parkinson hastalığı (PD) olan hastalara uzun süreli L-DOPA uygulamasından kaynaklanan motor komplikasyonları ifade eder. Klinikte en sık gözlenen patern, koreiform, distonik ve balistik hareketlerin klinik belirtilerinden oluşan pik doz diskinezidir. PD'nin 6-hidroksidopamin (6-OHDA) sıçan modeli, LID'lerin çeşitli özelliklerini taklit eder. Tekrarlanan L-DOPA uygulamasından sonra, 6-OHDA lezyonlu sıçanlar diskinetik benzeri hareketler sergiler (örneğin, anormal istemsiz hareketler, AIM'ler). Bu protokol, nigrostriatal yolakta% 90-95 dopaminerjik tükenme ile 6-OHDA lezyonlu sıçanlarda AIM'lerin nasıl indükleneceğini ve analiz edileceğini göstermektedir. Tekrarlanan L-DOPA uygulaması (3 hafta) (5 mg / kg, 12.5 mg / kg benserazid ile birlikte) AIM'lerin gelişimini indükleyebilir. Zaman seyri analizi, AIM'lerde 30-90 dakikada (pik doz diskinezi) önemli bir artış olduğunu ortaya koymaktadır. LID'lerin kemirgen modelleri, etkili antidiskinetik müdahaleleri tanımlamak için önemli bir klinik öncesi araçtır.

Introduction

Dopamin öncüsü L-3,4-dihidroksifenilalanin (L-DOPA), Parkinson hastalığının (PD) motor semptomları için en etkili tedaviyi temsil eder1. L-DOPA tedavisi PD ile ilişkili motor semptomları iyileştirebilir, ancak zamanla etkinliğini kaybeder. "Aşınma dalgalanması" veya "doz sonu bozulması" gibi motor dalgalanmalar, klinik olarak tek L-DOPA dozlarının etkisinin süresinin kısaltılması olarak kendini gösterir2. Diğer durumlarda, klinik bulgular yavaş büküm hareketleri ve anormal duruşlardan (distoni)3 oluşur ve dopamin seviyeleri düşük olduğunda ortaya çıkar (dönem dışı distoni)4. Öte yandan, L-DOPA kaynaklı diskineziler (LID'ler), plazmadaki ve beyindeki dopamin seviyeleri yüksek olduğunda ortaya çıkar5.

LID'ler, koreiform, distonik ve balistik6 hareketleri gibi motor komplikasyonları içeren zayıflatıcı yan etkiler üretir. Bir kez kurulduktan sonra, LID'ler her L-DOPA uygulamasından sonra ortaya çıkar. 5 yıl boyunca L-DOPA tedavisi gören PD hastalarının %40-50'sinde motor komplikasyonlar ortaya çıkar ve insidansı7 yıl içinde artar. PD hastalarında LID'lerin gelişiminde rol oynayan patofizyolojik mekanizmalar henüz tam olarak aydınlatılamamış olsa da, dopaminerjik denervasyonun derecesi, pulsatil L-DOPA uygulaması, striatal proteinlerde ve genlerde aşağı akış değişiklikleri ve dopamin dışı verici sistemlerdeki anormallikler bu istenmeyen yan etkilerin gelişimine katkıda bulunan faktörlerdir 6,8,9,10.

Nörotoksin 6-hidroksidopamin (6-OHDA),11,12,13,14 kemirgenlerinde PD'yi incelemek için iyi karakterize edilmiş bir araçtır. 6-OHDA kan-beyin bariyerini geçmediğinden, doğrudan nigrostriatal yola enjekte edilmelidir. 6-OHDA'ya bağlı dopaminerjik tükenme konsantrasyon ve bölgeye bağımlıdır15. Medial ön beyin demetinde (MFB) 6-OHDA'nın tek taraflı uygulanması, kemirgenlerde ciddi (>% 90) nigrostriatal hasara neden olabilir16,17,18,19. L-DOPA'nın tek taraflı olarak şiddetli 6-OHDA lezyonlu kemirgenlere kronik olarak uygulanması, anormal istemsiz hareketler (AIM'ler) adı verilen diskinetik benzeri hareketlerin ortaya çıkmasına neden olur. Kemirgenlerdeki diskinetik benzeri hareketler, PD hastalarında LID'lerle ilgili benzer moleküler, fonksiyonel ve farmakolojik mekanizmaları paylaşır5. Bu nedenle, 6-OHDA lezyonlu sıçanlar20 ve fareler21, LID'leri incelemek için değerli klinik öncesi modellerdir. L-DOPA'nın terapötik dozları (5-20 mg / kg) ile kronik olarak (7-21 gün) tedavi edildiğinde, tek taraflı olarak 6-OHDA lezyonlu sıçanlar ve fareler, lezyonun tersiyatında ön ayak, gövde ve orofasiyal kasları etkileyen AIM'lerin kademeli olarak geliştiğini göstermektedir 17,18,19,20,22,23,24 . Bu hareketler PD hastalarında L-DOPA ile indüklenen pik doz diskinezilere benzer bir zaman diliminde sunulur25 ve hiperkinetik hareketler ve distoni5 ile karakterizedir. AIM'ler genellikle şiddetlerine (örneğin, belirli bir AIM mevcut olduğunda) ve genliklerine (örneğin, her hareketin genliği ile karakterize edilir) göre puanlanır5,23,25.

6-OHDA lezyonlu LID kemirgen modelleri yüz geçerliliği sunar (yani, modelin insan durumuna benzeyen çeşitli özellikleri vardır)5,11,26,27,28. Kemirgen AIM'ler, PD hastalarında görülenlere benzer şekilde, hiperkinetik (ön ayak ve orolingual) ve distonik (aksiyel) hareketler29 olarak görülür ve pik doz diskineziyi taklit eder. Moleküler ve fonksiyonel düzeyde, kemirgen modelleri, PD hastaları 5 ile FosB / ΔFosB 19,26,30,31,32,33 ve serotonin taşıyıcısının (SERT) 34,35 upregülasyonu gibi birçok patolojik özelliği paylaşır. . Prediktif geçerlilik ile ilgili olarak, PD hastalarında LID'leri azaltan ilaçlar (örneğin, N-metil-D-aspartat (NMDA) reseptör antagonisti amantadin), kemirgen modelinde antidiskinezik etkinlik gösterir 22,36,37,38,39.

Kemirgen AIM derecelendirme ölçeği, baş, boyun ve gövdeyi etkileyen AIM'leri (eksenel AIM'ler), hiperkinetik ön ayak hareketlerini (uzuv AIM'leri) ve diskinetik benzeri orolingual hareketleri (orolingual AIM'ler) içeren dört AIM alt tipine dayanarak oluşturulmuştur. Kontralateral rotasyon (lokomotif AIM'ler) tek taraflı lezyonlu kemirgenlerde 20,22,23,25,40 da mevcut olmasına rağmen, LIDs 22,37,41'in spesifik bir ölçüsünü temsil etmeyebileceğinden diskinetik benzeri bir hareket olarak puanlanmamıştır.

Burada, PD'nin şiddetli (>%90) tek taraflı 6-OHDA lezyonlu sıçan modelinde diskinetik benzeri hareketlerin (eksenel, uzuv ve orolingual AIM'ler) nasıl indükleneceğini ve analiz edileceğini açıklayacağız. Protokolümüzü önceki literatüre ve laboratuvar uzmanlığımıza dayanarak düzenledik.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Tüm deneyler Ribeirão Preto'nun Felsefe, Fen Bilimleri ve Mektupları Fakültesi Etik Kurulu'na (CEUA/FFCLRP 18.5.35.59.5) uygun olarak gerçekleştirilmiştir.

1. 6-OHDA lezyonu

  1. Deneylerin başında (6 hafta) 200-250 g ağırlığındaki Sprague-Dawley erkek sıçanlarını kullanın. Hayvanları (kafes başına 2-3) standart laboratuvar koşullarında (12:12 saat aydınlık / karanlık döngüsü, saat 06:00'da ışıklar yanar, sıcaklık kontrollü tesisler (22-24 ° C), yiyecek ve su mevcut ad libitum ile barındırın.
    NOT: Şiddetli 6-OHDA lezyonlu sıçanların nasıl üretileceğine dair tam bir açıklama başka bir yerde açıklanmıştır42.
  2. Herhangi bir deneysel prosedürün başlangıcından önce hayvanları uygun şekilde alıştırın.
  3. Ameliyattan 30 dakika önce norepinefrin taşıyıcı inhibitörü imipraminin (20 mg / kg,% 0.9 salin çözeltisi içinde çözülmüş) uygulayın (intraperitoneal olarak, i.p.)
    NOT: Imipramin uygulaması, dopaminerjik nöronlar için 6-OHDA seçiciliğini artıracaktır.
  4. Ketamin / ksilazin (70/10 mg / kg) intraperitoneal olarak uygulanır.
  5. Hayvanın ayak parmağı sıkışmasına tepki eksikliği nedeniyle derinlemesine uyuşturulduğundan ve bir ısıtma yastığının üstündeki stereotaksik aparatta eğilimli bir konumda konumlandırıldığından emin olun.
  6. Baştaki kürkü çıkarın ve iyot bazlı bir ovma ve alkol arasında geçiş yaparak cerrahi bölgeyi 3 kez dezenfekte edin.
  7. Mikroenjeksiyonun gerçekleşeceği bölgede bir kesi (yaklaşık 1 cm) yapmak için bir neşter kullanın.
  8. Kafatası bölgesini pamuklu çubuklarla temizleyin ve Bregma ve Lambda'nın açığa çıktığından emin olun.
  9. MFB stereotaksik koordinatlarının bregma43,44,45'ten alındığından emin olun: -4,3 mm ön, 1,6 mm lateral (sağ taraf) ve 8,3 mm ventral (dura materden).
  10. 6-OHDA'yı 50 μL Hamilton cam şırınga kullanarak sağ medial ön beyin demetinde (MFB) tek taraflı olarak 0.4 μL / dak oranında (% 0.1 askorbik asit içeren 4 μL tuzlu su çözeltisinde 10 μg) uygulayın.
  11. Ameliyatın sonunda, kafa derisi kesisini dikin ve hayvanı ılık (~ 37 ° C) steril% 0.9 tuzlu su çözeltisi (~ 10 mL / kg, s.c.) ile yeniden sulandırın.
  12. Hayvanı stereotaksik çerçeveden çıkarın ve ısıtılmış bir kurtarma kafesine yerleştirin. Bilinç yeniden kazanılana kadar izleyin.
  13. Dopaminerjik lezyonun etkinliğini,46,47 basamak testi kullanarak lezyondan 4 hafta sonra değerlendirin.
    NOT: Bu testte, lezyona karşı ön ayaklı akinezi, lezyonun tersi olan ön pençe ile ayarlama adımlarının sayısı ile değerlendirilir. Kontralateral ön ayakla üç veya daha az ayarlama adımı sunan sıçanlar, varsayılan ciddi 6-OHDA lezyonlu sıçanlar48 olarak çalışmaya dahil edilmiştir.

2. L-DOPA kronik tedavisi

  1. Kronik tedaviye 6-OHDA lezyonundan 4 hafta sonra Pazartesi günü başlayın.
    NOT: AIM'ler 3 hafta boyunca haftada 3 gün üst üste (Çarşamba, Perşembe ve Cuma) videoya kaydedileceğinden, tedaviye Pazartesi günü başlanması önerilir.
  2. Sıçanlara taze hazırlanmış L-DOPA (deri altı (s.c.), 1 mL / kg yoluyla) artı benserazid hidroklorür (sırasıyla 5 mg / kg ve 12.5 mg / kg) ile 3 hafta boyunca, pazartesiden cumaya günde bir keztedavi edin 45.
    NOT: Bir kez kurulduktan sonra, AIM'ler L-DOPA'nın her bir uygulamasında ortaya çıkacaktır. Bu nedenle, 3 haftalık indüksiyon periyodundan sonra haftada 2-4 kez L-DOPA uygulaması, AIM48'in stabil bir ekspresyonunu korumak için yeterlidir.

3. AIM'lerin kaydedilmesi ve puanlanması

  1. Saat 09:00 ile 17:00 arasında deneyler yapın. Araştırmacının sıçanların kimliğinden ve farmakolojik tedavisinden tamamen habersiz olduğundan emin olun.
  2. Sıçanı dikkatlice şeffaf bir silindirin içine (20 cm çap x 40 cm boyunda) koyun ve en az 15 dakika boyunca iklimlendirilmesine izin verin. Zeminin yatak malzemesi ile kaplandığından emin olun. Aynalar silindirin arkasına yerleştirilmelidir, böylece deneyci hayvanı mümkün olan tüm açılardan gözlemleyebilir.
    NOT: Deney başına birden fazla sıçan varsa, her sıçan için bir silindir kullanın. Seanslar arasında hayvanların manipülasyonu davranışsal analize müdahale edebilir.
  3. Yüksek çözünürlüklü bir video kamerayı eksenel, uzuv ve orolingual AIM'lerin görüntülenmesini destekleyecek şekilde konumlandırın. Bu deneysel koşullar altında dönme davranışı mevcut olduğundan, silindirin arkasındaki aynalar AIM'lerin 360 ° 'lik bir açıyla izlenmesine izin verecektir. Bir tripod kullanın veya fotoğraf makinesini doğrudan tezgaha sabitleyin.
    NOT: Orolingual AIM'lerin puanlanması zor olabilir, özellikle de rotasyonel davranış insidansı yüksekse. Hayvanların 15° açıyla bulunduğu uçağın biraz altına yerleştirilmiş kamera ile video çekmek, bu hareket alt tipinin gözlemlenmesine yardımcı olacaktır.
  4. Hayvanı silindirden yavaşça çıkarın ve L-DOPA'yı uygulayın (12.5 mg / kg benserazid ile birlikte 5 mg / kg, s.c.).
  5. Hayvanı tekrar silindire koyun ve L-DOPA enjeksiyonundan sonra ANIM'leri izlemek için bir zamanlayıcı başlatın. L-DOPA enjeksiyonundan sonra 180 dakika boyunca AIM kaydetmek için bir video kamera kullanın. Analiz, hayvanın doğrudan gözlemlenmesiyle yapılabilmesine rağmen, çevrimdışı puanlama tercih edilir.
    NOT: ANIM'lerin L-DOPA uygulamasından sonra kesin zamanlarda puanlanabilmesi için zamanlayıcının da videoya kaydedildiğinden emin olun.
  6. IM'leri başlangıçta açıklandığı gibi 30 dakikalık aralıklarla L-DOPA enjeksiyonu sonrası 180 dakikaya kadar (tanımlar için Tablo 1'e bakınız)20,23 olarak puanlayın. Puanlar 1-2 dakikalık dönemler boyunca verilmeli ve eksenel, uzuv veya orolingual olarak sınıflandırılmalıdır (Şekil 1).
  7. Her AIM'yi dikkatlice gözlemleyin ve ciddiyet ve genlik için puanları özniteliklendirin. Talimatlar için Tablo 1'i kullanın. Yetiştirme, koklama, tımar etme ve kemirme gibi normal davranışları derecelendirmeye dahil etmeyin. Toplam altı gözlem periyodu (30, 60, 90, 120, 150 ve 180 dakika) olacaktır.
ALT
Eksenel: baş, boyun ve gövde burulması
Uzuv: hem distal hem de proksimal ön ayağın istemsiz hareketleri
Orolingual: orofasiyal kasların istemsiz hareketleri
ŞİDDET
0: Yok
1: Ara sıra (kesintilerle, gözlem süresinin yarısından daha azında mevcut)
2: Sık sık (kesintilerle birlikte, ancak gözlem süresinin yarısından fazlasında mevcut)
3: Sürekli ancak dış duyusal uyaranlar tarafından kesintiye uğratılmış
4: Sürekli ve dış duyusal uyaranlar tarafından kesilmez
BOLLUK
Eksenel
1: Baş ve boynun yaklaşık 30 ° açıyla burulması
2: Baş ve boynun yaklaşık 30 ° < açıda ≤ 60 ° 'de burulması
3: Baş, boyun ve üst gövdenin yaklaşık 60 ° < açısında ≤ 90 ° 'de burulması
4: Baş, boyun ve gövdenin 90 ° > açıyla burulması, genellikle sıçanın dengesini kaybetmesine neden olur.
Uzuv
1: Distal ön ayağın küçük istemsiz hareketleri
2: Hem distal hem de proksimal ön ayağın translokasyonuna neden olan düşük genlikli hareketler
3: Omuz kasları da dahil olmak üzere tüm uzuvların istemsiz hareketleri
4: Güçlü uzuv ve omuz hareketleri, genellikle balizme benzer
Orolingual
1: Orofasiyal kasların küçük istemsiz hareketleri
2: Dil çıkıntısı ile yüksek genlikli orofasiyal hareketler

Tablo 1: AIMS tanımı ve derecelendirme kriterleri.

Figure 1
Şekil 1: Her bir AIM alt türünü gösteren fotoğraf dizisi. (A'dan A'ya'ya) Farklı açılarda distonik benzeri hareketleri gösteren eksenel AIM (A: 30° açı, A': 30° < açı ≤ 60°, A": 90° < ≤ açı ve A'": 90° açı >). (B'den B'ye) Distal (B ve B') ve tüm ön ayağın (omuz, B dahil) istemsiz hareketlerini gösteren uzuv AIM (siyah oklar). (C) Dil çıkıntısı ile yüksek genlikli orolingual AIM (kırmızı ok). Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

4. Veri analizi

  1. Eksenel, uzuv veya orolingual AIM alt tiplerini, daha önce açıklandığı gibi L-DOPA uygulamasından sonra her gözlem periyodu (yani altı gözlem periyodu) için şiddet ve genlik puanlarını çarparak hesaplayın20. Bir hayvanın bir test oturumunda biriktirebileceği teorik maksimum puan 240'tır (gözlem periyodu başına maksimum puan 40'tır, ayrıntılar için Tablo 1'e bakınız).
  2. 3 haftalık kronik L-DOPA uygulaması boyunca Çarşamba, Perşembe ve Cuma günleri kaydedilen altı gözlem periyodunun tümü için AIM puanlarını çizin (Şekil 2). AIM'ler, her bir hayvanın her puanlama gününde (Şekil 3) veya her haftada (Şekil 4) 3 haftalık kronik L-DOPA uygulaması boyunca maksimum puanını belirtmek için toplanabilir.
  3. İstatistiksel analiz yaklaşımını seçmeden önce verilerin normale yakın bir dağılıma sahip olup olmadığını doğrulayın.
    NOT: AIM'lerin derecelendirme ölçekleri sıralı verilerden oluşur ve parametrik olmayan istatistiklerle analiz edilebilir. Parametrik testler, tekrarlanan test oturumlarını takiben deney grupları arasında AIM puanlarını karşılaştırırken yaygın olarak kullanılmaktadır40.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Sıçanlarda gözlenen AIM kalıpları, insanlarda ve insan olmayan primatlarda gözlemlenenlere kıyasla daha basit ve sınırlı olmasına rağmen, bu model kronik L-DOPA uygulaması tarafından indüklenen hem hiperkinetik hem de distonik benzeri hareketleri yeniden üretir. Burada, 3 hafta boyunca (Pazartesi-Cuma) kronik olarak L-DOPA (12.5 mg / kg benserazid ile birlikte 5 mg / kg) ile tedavi edilen tek taraflı 6-OHDA lezyonlu sıçanlardan oluşan bir gruptan (n = 10) toplanan veriler sunulmaktadır. Şekil 2, Şekil 3 ve Şekil 4'te sunulan verilerin aynı hayvanlardan geldiğini unutmayın.

Şekil 2 , 3 haftalık kronik L-DOPA uygulaması boyunca eksenel, uzuv ve orolingual AIM 'lere uygulanan puanlar için zaman kursu analizini göstermektedir. Belirli bir gözlem periyodundaki her bir AIM puan alt tipi, bu analizde şiddet ve genlik puanlarının çarpımı olarak raporlanır. Bu tür bir analiz,'lerin zamansal profiline müdahale eden ilaçların etkisini araştırmak için uygun olabilir.L-DOPA kaynaklı pik doz diskinezilerin, enjeksiyon sonrası 120 dakika sonra kademeli bir azalma ile 30-90 dakika arasında meydana geldiğini unutmayın (Şekil 2).

Figure 2
Şekil 2: 6-OHDA lezyonlu sıçanlara 3 haftalık kronik L-DOPA uygulaması (12.5 mg / kg benserazid ile birlikte 5 mg / kg) boyunca eksenel, uzuv ve orolingual AIM'leri gösteren zaman seyri analizi . (A) Aksiyel, (B) uzuv ve (C) orolingual AIM'ler Çarşamba, Perşembe ve Cuma günleri 3 haftalık kronik L-DOPA uygulaması boyunca puanlandı. Her AIM alt tipi, altı gözlem periyodunun her birinde ciddiyet çarpım genliğinin çarpımı olarak rapor edilir. Her AIM alt tipi ayrı ayrı analiz edilebilir veya (D)'de belirtildiği gibi özetlenebilir. AIM'lerin tepe şiddetinin, kronik L-DOPA uygulamasının ilk haftasında kademeli olarak artacağını unutmayın. Veriler ortalama ± SEM (n = 10) olarak ifade edilir. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 3 , Şekil 2'de gösterilen altı gözlem periyodunun tümü için sunulan AIM puanlarının toplamını göstermektedir (veri kümeleri kolay karşılaştırmalar için renk kodludur). Bu analiz, 3 haftalık kronik L-DOPA uygulaması boyunca her bir puanlama gününde (Çarşamba, Perşembe ve Cuma) her hayvanın maksimum puanını gösterir. Bu tür bir analiz, potansiyel antidiskinetik profillere sahip bileşiklerin etkisini araştırmak için avantajlı olabilir, çünkü özellikle AIM skorları kronik L-DOPA uygulamasının 2. ve 3. haftalarında stabildir. Ayrıca, haftalık AIM puanları (Şekil 4), Çarşamba, Perşembe ve Cuma günleri 6-OHDA lezyonlu sıçanlara atfedilen puanların toplamından üretilebilir.

Figure 3
Şekil 3: 6-OHDA lezyonlu sıçanlara 3 haftalık kronik L-DOPA uygulaması (12.5 mg / kg benserazid ile birlikte 5 mg / kg) boyunca bireysel puanlama günlerinde eksenel, uzuv ve orolingual AIM'lerin toplamı. Bu şekilde, altı gözlem periyodunun her birinde sunulan AIM puanları (Şekil 2 efsanesindeki ayrıntılara bakınız) toplanmıştır. Tek tek veri kümeleri, Şekil 2'de görüntülenen verilerle karşılaştırmak için renk kodludur. Bu analiz, 3 haftalık kronik L-DOPA uygulamasını takiben her bir puanlama gününde (Çarşamba - W, Perşembe - T ve Cuma - F) her hayvanın maksimum puanını gösterir. (A) Eksenel, (B) Uzuv ve (C) orolingual AIM'ler. (D) Eksenel, uzuv ve orolingual AIM'lerin toplamı. Tek yönlü tekrarlanan ölçümler ANOVA ve Holm-Sidak post-hoc testi, IM'lerin L-DOPA'nın kronik uygulamasına göre kademeli olarak arttığını ortaya koymuştur. AIM puanlarının kronik L-DOPA uygulamasının 2. ve 3. haftalarında stabil olduğunu unutmayın (* p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001 ve Çarşamba (W) 1. Haftada). Veriler ortalama ± SEM (n = 10) olarak ifade edilir. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 4
Şekil 4: Kronik L-DOPA uygulaması boyunca haftalık eksenel, ekstremite ve orolingual AIM'lerin toplamı (12.5 mg / kg benserazid ile birlikte 5 mg / kg) 6-OHDA lezyonlu sıçanlara. Bu şekilde, her hafta (Çarşamba, Perşembe ve Cuma - bkz. Şekil 3) puanlanan AIM'ler toplanmıştır. Bu analiz, her hayvanın kronik L-DOPA uygulamasının her haftasındaki maksimum puanını gösterir. (A) Eksenel, (B) Uzuv ve (C) orolingual AIM'ler. (D) Eksenel, uzuv ve orolingual AIM'lerin toplamı. Tek yönlü tekrarlanan ölçümler ANOVA ve Holm-Sidak post-hoc testi, AIM'lerin L-DOPA'nın kronik uygulamasına göre arttığını ortaya koymuştur (* p < 0.05'e karşı 1. Hafta). Veriler ortalama ± SEM (n = 10) olarak ifade edilir. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Bu protokol, MFB'de 6-OHDA'nın tek taraflı mikroenjeksiyonu ile indüklenen PD'nin sıçan modelinde AIM'lerin nasıl indükleneceğini ve analiz edileceğini göstermektedir. Düşük dozlarda L-DOPA'nın (5 mg / kg, 12.5 mg / kg benserazid ile birlikte) kronik günlük uygulaması, 3 haftalık tedavi boyunca AIM'lerin gelişimini sağlamıştır. Temporal analiz, AIM'lerde önemli bir artış olduğunu ortaya koydu ve L-DOPA uygulamasından 30 ila 90 dakika sonra pik doz diskinezi gözlendi. AIM'ler eksenel, uzuv ve orolingual kasları etkileyen tekrarlayan ve amaçsız hareketlerdir. Protokol ve burada sunulan veriler önceki literatür22,23,49,50,51 ile aynı fikirdedir.

Eksenel, uzuv ve orolingual AIM'lerin derecelendirme ölçeği çok hassastır, çünkü kemirgenlerin diskinetik benzeri hareketler gösterdiği süreyi (yani şiddetini) derecelendirir ve bu hareketlerin genliğini gösterir20. AIM puanları farklı zamansal çözünürlüklerde ifade edilebilir (bkz. Şekil 2, Şekil 3, Şekil 4)17,18,19,52. Birkaç çalışma, L-DOPA dozajının AIM'lerin gelişimi üzerindeki rolünü ele almıştır. Düşük dozlarda L-DOPA'nın (5-20 mg / kg) kronik olarak uygulanması, ISM'lerin tedaviye göre kademeli olarak gelişmesini desteklerken, yüksek dozlarda L-DOPA (25 mg / kg veya daha fazla), IM'lerin23,25,27,53'ün hızlı ve sağlam bir şekilde gelişmesine neden olur. İlginç bir şekilde, şiddetli 6-OHDA lezyonlu hayvanların bir kısmı, düşük dozlarda L-DOPA 40,49,53'ün kronik olarak uygulanmasını takiben AIM'ler geliştirmeyebilir (veya çok düşük AIM skorlarına sahip olmayabilir). L-DOPA'nın yönetim yolunu dikkate almak da önemlidir. AIM'ler benzer başlangıç, zaman profili ve şiddet derecesi40'ı paylaşmasına rağmen, intraperitoneal olarak tedavi edilen sıçanlarda doz başarısızlığı ataklarının sıklıkla meydana geldiği gösterilmiştir27. Ayrıca, L-DOPA'nın i.p. uygulaması, plazma seviyelerinde bireyler arası varyasyonlar üretti, bu da SC enjeksiyonlarından sonra gözlenmeyen bir etki27.

Bu çalışmada, AIM'ler ciddi nigrostriatal hasarı olan hayvanlarda belirgindi (dopaminerjik tükenmenin% 90'ından fazlası). Masif striatal dopaminerjik innervasyon kaybı, lezyonun48'ine kontralateral ön ayakla yapılan ayarlama adımlarının sayısında bir azalma ile karakterizedir. Bu nedenle, nigrostriatal yolda varsayılan şiddetli 6-OHDA lezyonları olan hayvanları seçmek için basamaklama testini öneriyoruz. Amfetamin kaynaklı rotasyon testi, varsayılan 6-OHDA lezyonlu sıçanları seçmek için yaygın olarak kullanılır. Amfetamin, bozulmamış striatumdaki dopamin salınımını arttırır ve böylece innerve ve denervated striatum arasındaki mevcut dengesizliği arttırır. Bununla birlikte, 312 6-OHDA lezyonlu sıçan11'de yapılan ilginç bir çalışma, ipsilateral substantia nigra pars compacta'daki amfetamin kaynaklı rotasyon ile tirozin hidroksilaz pozitif hücreler arasında bir korelasyon olmadığını ortaya koymuştur. Aynı çalışma, amfetamin kaynaklı rotasyon ile AIM'lerin şiddeti arasında zayıf bir korelasyon olduğunu göstermiştir.

AIM fenomenolojisi ile nigrostriatal dopaminerjik tükenme paterni arasında açık bir ilişki vardır20. Bu protokolde kullandığımız PD'nin 6-OHDA sıçan modeli, MFB'de 6-OHDA infüzyonunu takiben nigrostriatal dopamin terminallerinin ciddi tek taraflı tükenmesini geliştirir. Tamamen dopamin tükenmiş 6-OHDA lezyonlu sıçanlar, kısmen dopamin tükenmiş hayvanlara kıyasla daha yüksek AIM insidansına sahiptir. 6-OHDA lezyonu ve kronik L-DOPA uygulamasını takiben nöropeptitler dinorfin ve enkefalinin striatal ekspresyonunun ayrıntılı bir analizi başka bir yerde tanımlanmıştır45 ve önceki literatür23,25 ile tutarlıdır. Moleküler düzeyde, diskinetik kemirgenler, PD ve PD hastalarının insan dışı primat modellerinde belirgin olan diskinezi ile ilişkili moleküler belirteçleri paylaşırlar, örneğin ΔFosB transkripsiyon faktörü26,32,33,54'ün striatal upregülasyonu gibi. Ayrıca, PD'nin kemirgen modeli, L-DOPA tedavisi55'e yanıt olarak striatumda artmış mikrodamar yoğunluğunu, PD hastalarının putameninde gözlenen benzer şekilde göstermektedir56. LID'lerin kemirgen modelleri, klinikte kullanılan antidiskinetik farmakolojik yaklaşımlara yanıt verir, örneğin NMDA reseptör antagonisti amantadin 22,23,24,25,26,27,28,29,30,31,32,33,34, 35,36,37, 38,39. Toplamda, bu kanıt parçaları, LID'lerin patofizyolojisini karakterize etmek ve antidiskinetik özelliklere sahip bileşiklerin taranması için 6-OHDA sıçan modelinin yüz geçerliliğini ve öngörücü geçerliliğini doğrulamaktadır. LID'lerin fare modeli, transgenik farelerde LID'lerin çeşitli yönlerini incelemek için de değerli bir araçtır. LID'lerin fare modeli için protokoller, farklı araştırma gruplarından 30,57,58 makalelerde bulunabilir.

LID'lerin 6-OHDA lezyonlu kemirgen modelinin sınırlamaları olduğuna dikkat etmek önemlidir. 6-OHDA'ya bağlı dopaminerjik tükenme, PD hastasında nigrostriatal tükenmenin ilerleyici doğasına kıyaslaakuttur 5. Ayrıca, hastalarda antidiskinetik bir ilaç kullanmak için mükemmel bir terapötik pencere bulmak zor olabilir, çünkü bir ilacın dozajının arttırılması, L-DOPA tarafından üretilen yararlı etkiye müdahale edebilir veya hayvan modelinde gözlenmemiş olabilecek yan etkilere neden olabilir59,60. LID'lerin sıçan modelinin bir başka sınırlaması, kemirgenlerdeki AIM'ler arasında fiziksel benzerlik olmaması ve hastalarda ve insan olmayan primatlarda gözlenen koreiform hareketlerin tezahürüdür 10,61,62. Burada sunulan protokolün bir diğer potansiyel sınırlaması, ANIM'lerin L-DOPA uygulamasından sonra her 30 dakikada bir puanlanmasıdır, ancak deneyci L-DOPA uygulamasından sonra tüm hayvanları 180 dakika boyunca videoya kaydederse bu sorun yönetilebilir. Deneyci daha sonra puanlama protokolünü daha sık puanlama için ayarlayabilir (örneğin, her 10 veya 20 dakikada bir). Bu yaklaşım, AIM zaman seyrinin daha dinamik bir resmini gerektiren deneylerde avantajlıdır (örneğin, AIM'lerin puanlaması ve in vivo elektrofizyolojik veya nörokimyasal kayıtların kombinasyonu).

Sonuç olarak, LID'in 6-OHDA sıçan modeli, hastalığın patofizyolojisini yeniden üretmekte ve klinik olarak kullanılan ilaçlarla modüle edilebilen AIM'ler geliştirmektedir. Sınırlamaları olmasına rağmen, LID'nin 6-OHDA sıçan modeli, translasyonel potansiyele sahip etkili antidiskinetik müdahaleleri tanımlamak için hala paha biçilmez bir klinik öncesi aracı temsil etmektedir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarların çıkar çatışması yoktur.

Acknowledgments

Bu çalışma São Paulo Araştırma Vakfı (FAPESP, hibe 2017/00003-0) tarafından desteklenmiştir. Yüksek Öğretim Personelinin İyileştirilmesi için Koordinasyon (CAPES) için minnettarız. Dr. Anthony R. West, Dr. Heinz Steiner ve Dr. Kuei Y. Tseng'e destek ve mentorluk için teşekkür ederiz.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
6-hydroxydopamine hydrobromide Sigma-Aldrich, USA H6507 Neurotoxin that produces degeneration of catecholaminergic terminals
Benzerazide hydrochloride Sigma B7283 Peripheral dopa-decarboxylase inhibitor
Camera Bullet IR Turbo HD (HD-TVI)  2.8mm B HIKVISION DS-2CE16C0T-IRP Camera used to record all behavior
Imipramine hidrochloride Alfa Aesar J63723 Norepinephrine transporter inhibitor (NET) used to protect noradrenergic neurons from 6-OHDA
Ketamine hydrochloride Ceva Animal Health Anesthesia for surgical intervention
L-3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) methyl ester (hydrochloride) Cayman Chemical Company 16149 Dopamine precursor
Mirrors Used to observe the behavior of animals during experiments in all directions
Needles 0.30 x 13 mm PrecisionGlide Needles used to inject drugs
Sodium chloride (NaCl) Samtec Salt
Syringes 1 ml Sterile BD Plastipak Syringes used to inject drugs
Transparent cylinders Used to record animal behavior during experiments
Xylazine hydrochloride Ceva Animal Health Sedative, analgesic and muscle relaxant for surgical intervention

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Jenner, P. Molecular mechanisms of L-DOPA-induced dyskinesia. Nature Reviews. Neuroscience. 9 (9), 665-677 (2008).
  2. Nutt, J. G. Levodopa-induced dyskinesia: review, observations, and speculations. Neurology. 40 (2), 340-345 (1990).
  3. Luquin, M. R., Scipioni, O., Vaamonde, J., Gershanik, O., Obeso, J. A. Levodopa-induced dyskinesias in Parkinson's disease: clinical and pharmacological classification. Movement Disorders: Official Journal of the Movement Disorder Society. 7 (2), 117-124 (1992).
  4. Fabbrini, G., Brotchie, J. M., Grandas, F., Nomoto, M., Goetz, C. G. Levodopa-induced dyskinesias. Movement Disorders: Official Journal of the Movement Disorder Society. 22 (10), 1379 (2007).
  5. Cenci, M. A., Crossman, A. R. Animal models of l-dopa-induced dyskinesia in Parkinson's disease. Movement Disorders: Official Journal of the Movement Disorder Society. 33 (6), 889-899 (2018).
  6. Bastide, M. F., et al. Pathophysiology of L-dopa-induced motor and non-motor complications in Parkinson's disease. Progress in Neurobiology. 132, 96-168 (2015).
  7. Manson, A., Stirpe, P., Schrag, A. Levodopa-induced-dyskinesias clinical features, incidence, risk factors, management and impact on quality of life. Journal of Parkinson's Disease. 2 (3), 189-198 (2012).
  8. Grandas, F., Galiano, M. L., Tabernero, C. Risk factors for levodopa-induced dyskinesias in Parkinson's disease. Journal of Neurology. 246 (12), 1127-1133 (1999).
  9. Schrag, A., Quinn, N. Dyskinesias and motor fluctuations in Parkinson's disease. A community-based study. Brain: A Journal of Neurology. 123, Pt 11 2297-2305 (2000).
  10. Bezard, E., Brotchie, J. M., Gross, C. E. Pathophysiology of levodopa-induced dyskinesia: potential for new therapies. Nature Reviews. Neuroscience. 2 (8), 577-588 (2001).
  11. Tronci, E., Shin, E., Björklund, A., Carta, M. Amphetamine-induced rotation and L-DOPA-induced dyskinesia in the rat 6-OHDA model: a correlation study. Neuroscience Research. 73 (2), 168-172 (2012).
  12. Duty, S., Jenner, P. Animal models of Parkinson's disease: a source of novel treatments and clues to the cause of the disease. British Journal of Pharmacology. 164 (4), 1357-1391 (2011).
  13. Ungerstedt, U. 6-Hydroxy-dopamine induced degeneration of central monoamine neurons. European Journal of Pharmacology. 5 (1), 107-110 (1968).
  14. Ungerstedt, U. Postsynaptic supersensitivity after 6-hydroxy-dopamine induced degeneration of the nigro-striatal dopamine system. Acta Physiologica Scandinavica. Supplementum. 367, 69-93 (1971).
  15. Kirik, D., Rosenblad, C., Bjorklund, A. Characterization of behavioral and neurodegenerative changes following partial lesions of the nigrostriatal dopamine system induced by intrastriatal 6-hydroxydopamine in the rat. Experimental Neurology. 152, 259-277 (1998).
  16. Zahm, D. S. Compartments in rat dorsal and ventral striatum revealed following injection of 6-hydroxydopamine into the ventral mesencephalon. Brain Research. 552 (1), 164-169 (1991).
  17. Padovan-Neto, F. E., Echeverry, M. B., Tumas, V., Del-Bel, E. A. Nitric oxide synthase inhibition attenuates L-DOPA-induced dyskinesias in a rodent model of Parkinson's disease. Neuroscience. 159 (3), 927-935 (2009).
  18. Padovan-Neto, F. E., et al. Antidyskinetic effect of the neuronal nitric oxide synthase inhibitor is linked to decrease of FosB/deltaFosB expression. Neuroscience Letters. 541, 126-131 (2013).
  19. Padovan-Neto, F. E., Cavalcanti-Kiwiatkoviski, R., Carolino, R. O., Anselmo-Franci, J., Del Bel, E. Effects of prolonged neuronal nitric oxide synthase inhibition on the development and expression of L-DOPA-induced dyskinesia in 6-OHDA-lesioned rats. Neuropharmacology. 89, 87-99 (2015).
  20. Winkler, C., Kirik, D., Björklund, A., Cenci, M. A. L-DOPA-induced dyskinesia in the intrastriatal 6-hydroxydopamine model of parkinson's disease: relation to motor and cellular parameters of nigrostriatal function. Neurobiology of Disease. 10 (2), 165-186 (2002).
  21. Francardo, V., et al. Impact of the lesion procedure on the profiles of motor impairment and molecular responsiveness to l-DOPA in the 6-hydroxydopamine mouse model of Parkinson's disease. Neurobiology of Disease. 42, 327-340 (2011).
  22. Lundblad, M., et al. Pharmacological validation of behavioural measures of akinesia and dyskinesia in a rat model of Parkinson's disease. The European Journal of Neuroscience. 15 (1), 120-132 (2002).
  23. Cenci, M. A., Lee, C. S., Björklund, A. L-DOPA-induced dyskinesia in the rat is associated with striatal overexpression of prodynorphin- and glutamic acid decarboxylase mRNA. The European Journal of Neuroscience. 10 (8), 2694-2706 (1998).
  24. Henry, B., Crossman, A. R., Brotchie, J. M. Characterization of enhanced behavioral responses to L-DOPA following repeated administration in the 6-hydroxydopamine-lesioned rat model of Parkinson's disease. Experimental Neurology. 151 (2), 334-342 (1998).
  25. Lee, C. S., Cenci, M. A., Schulzer, M., Björklund, A. Embryonic ventral mesencephalic grafts improve levodopa-induced dyskinesia in a rat model of Parkinson's disease. Brain: A Journal of Neurology. 123, Pt 7 1365-1379 (2000).
  26. Andersson, M., Hilbertson, A., Cenci, M. A. Striatal fosB expression is causally linked with l-DOPA-induced abnormal involuntary movements and the associated upregulation of striatal prodynorphin mRNA in a rat model of Parkinson's disease. Neurobiology of Disease. 6 (6), 461-474 (1999).
  27. Lindgren, H. S., Rylander, D., Ohlin, K. E., Lundblad, M., Cenci, M. A. The "motor complication syndrome" in rats with 6-OHDA lesions treated chronically with L-DOPA: relation to dose and route of administration. Behavioural Brain Research. 177 (1), 150-159 (2007).
  28. Animal Models of Movement Disorders: volume I, Neuromethods. Lane, E. L., Dunnett, S. 61, Springer Science+Business Media. (2011).
  29. Carlsson, T., Carta, M., Winkler, C., Björklund, A., Kirik, D. Serotonin neuron transplants exacerbate l-DOPA-induced dyskinesias in a rat model of Parkinson's disease. Journal of Neuroscience. 27 (30), 8011-8022 (2007).
  30. Lundblad, M., Picconi, B., Lindgren, H., Cenci, M. A. A model of L-DOPA-induced dyskinesia in 6-hydroxydopamine lesioned mice: relation to motor and cellular parameters of nigrostriatal function. Neurobiology of Disease. 16 (1), 110-123 (2004).
  31. Fasano, S., et al. Inhibition of Ras-guanine nucleotide-releasing factor 1 (Ras-GRF1) signaling in the striatum reverts motor symptoms associated with L-dopa-induced dyskinesia. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (50), 21824-21829 (2010).
  32. Berton, O., et al. Striatal overexpression of DeltaJunD resets L-DOPA-induced dyskinesia in a primate model of Parkinson disease. Biological Psychiatry. 66 (6), 554-561 (2009).
  33. Lindgren, H. S., et al. Putaminal upregulation of FosB/ΔFosB-like immunoreactivity in Parkinson's disease patients with dyskinesia. Journal of Parkinson's Disease. 1 (4), 347-357 (2011).
  34. Rylander, D., et al. Maladaptive plasticity of serotonin axon terminals in levodopa-induced dyskinesia. Annals of Neurology. 68 (5), 619-628 (2010).
  35. Smith, R., et al. The role of pallidal serotonergic function in Parkinson's disease dyskinesias: a positron emission tomography study. Neurobiology of Aging. 36 (4), 1736-1742 (2015).
  36. Lundblad, M., et al. Pharmacological validation of a mouse model of l-DOPA-induced dyskinesia. Experimental Neurology. 194 (1), 66-75 (2005).
  37. Dekundy, A., Lundblad, M., Danysz, W., Cenci, M. A. Modulation of L-DOPA-induced abnormal involuntary movements by clinically tested compounds: further validation of the rat dyskinesia model. Behavioural Brain Research. 179 (1), 76-89 (2007).
  38. Blanchet, P. J., Konitsiotis, S., Chase, T. N. Amantadine reduces levodopa-induced dyskinesias in parkinsonian monkeys. Movement Disorders: Official Journal of the Movement Disorder Society. 13 (5), 798-802 (1998).
  39. Verhagen Metman, I., et al. Amantadine as treatment for dyskinesias and motor fluctuations in Parkinson's disease. Neurology. 50 (5), 1323-1326 (1998).
  40. Cenci, M. A., Lundblad, M. Ratings of L-DOPA-induced dyskinesia in the unilateral 6-OHDA lesion model of Parkinson's disease in rats and mice. Current Protocols in Neuroscience. , Chapter 9, Unit 9 25 (2007).
  41. Dupre, K. B., et al. Effects of coincident 5- HT1A receptor stimulation and NMDA receptor antagonism on L-DOPA-induced dyskinesia and rotational behaviors in the hemi-parkinsonian rat. Psychopharmacology (Berl). 199 (1), 99-108 (2008).
  42. Guimarães, P. R., Bariotto-dos-Santos, K., Ribeiro, D. L., Padovan-Neto, F. E. The 6-hydroxydopamine (6-OHDA) rat model of Parkinson's disease. Journal of Visualized Experiments: JoVE. , (2021).
  43. Paxinos, G., Watson, C. The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates. , Academic Press. New York. (1998).
  44. Tseng, K. Y., et al. Inhibition of striatal soluble guanylyl cyclase-cGMP signaling reverses basal ganglia dysfunction and akinesia in experimental parkinsonism. PloS One. 6 (11), 27187 (2011).
  45. Padovan-Neto, F. E., et al. Selective regulation of 5-HT1B serotonin receptor expression in the striatum by dopamine depletion and repeated L-DOPA treatment: Relationship to L-DOPA-induced dyskinesias. Molecular Neurobiology. 57 (2), 736-751 (2020).
  46. Olsson, M., Nikkhah, G., Bentlage, C., Bjorklund, A. Forelimb akinesia in the rat Parkinson model: Differential effects of dopamine agonists and nigral transplants as assessed by a new stepping test. Journal of Neuroscience. 15, 3863-3875 (1995).
  47. Chang, J. W., Wachtel, S. R., Young, D., Kang, U. J. Biochemical and anatomical characterization of forepaw adjusting steps in rat models of Parkinson's disease lesions. Neuroscience. 88, 617-628 (1995).
  48. Jayasinghe, V. R., Flores-Barrera, E., West, A. R., Tseng, K. Y. Frequency-dependent corticostriatal disinhibition resulting from chronic dopamine depletion: Role of local striatal cGMP and GABAAR signaling. Cerebral Cortex. 27, 625-634 (2017).
  49. Picconi, B., et al. Loss of bidirectional striatal synaptic plasticity in L-DOPA-induced dyskinesia. Nature Neuroscience. 6 (5), 501-506 (2003).
  50. Carta, M., et al. Role of striatal L-DOPA in the production of dyskinesia in 6-hydroxydopamine lesioned rats. Journal of Neurochemistry. 96 (6), 1718-1727 (2006).
  51. Westin, J. E., Andersson, M., Lundblad, M., Cenci, M. A. Persistent changes in striatal gene expression induced by long-term L-DOPA treatment in a rat model of Parkinson's disease. The European Journal of Neuroscience. 14 (7), 1171-1176 (2001).
  52. Bariotto-Dos-Santos, K., et al. Repurposing an established drug: an emerging role for methylene blue in L-DOPA-induced dyskinesia. The European Journal of Neuroscience. 49 (6), 869-882 (2018).
  53. Lindgren, H. S., Lane, E. L. Rodent Models of l-DOPA-Induced Dyskinesia. Animal Models of Movement Disorders. Neuromethods. Lane, E., Dunnett, S. 61, Humana Press. (2011).
  54. Doucet, J., et al. Drug-drug interactions related to hospital admissions in older adults: A prospective study of 1000 patients. Journal of the American Geriatrics Society. 44, 944-948 (1996).
  55. Ohlin, K. E., et al. Vascular endothelial growth factor is upregulated by L-dopa in the parkinsonian brain: implications for the development of dyskinesia. Brain: A Journal of Neurology. 134, Pt 8 2339-2357 (2011).
  56. Jourdain, V. A., et al. Increased putamen hypercapnic vasoreactivity in levodopa-induced dyskinesia. JCI insight. 2 (20), 96411 (2017).
  57. Thiele, S. L., et al. Generation of a model of l-DOPA-induced dyskinesia in two different mouse strains. Journal of Neuroscience Methods. 197 (2), 193-208 (2011).
  58. Dos-Santos-Pereira, M., et al. Contributive role of TNF-α to L-DOPA-induced dyskinesia in a unilateral 6-OHDA lesion model of Parkinson's disease. Frontiers in Pharmacology. 11, 617085 (2021).
  59. Cenci, M. A., Ohlin, K. E., Odin, P. Current options and future possibilities for the treatment of dyskinesia and motor fluctuations in Parkinson's disease. CNS & Neurological Disorders Drug Targets. 10 (6), 670-684 (2011).
  60. Cenci, M. A. Presynaptic mechanisms of l-DOPA-induced dyskinesia: The findings, the debate, and the therapeutic implications. Frontiers in Neurology. 5, 242 (2014).
  61. Langston, J. W., Quik, M., Petzinger, G., Jakowec, M., Di Monte, D. A. Investigating levodopa-induced dyskinesias in the parkinsonian primate. Annals of Neurology. 47 (4), Suppl 1 79-89 (2000).
  62. Chase, T. N. Levodopa therapy: consequences of the nonphysiologic replacement of dopamine. Neurology. 50 (5), Suppl 5 17-25 (1998).

Tags

Biyoloji Sayı 176 Parkinson hastalığı bazal gangliyon 6-hidroksidopamin L-DOPA kaynaklı diskineziler anormal istemsiz hareketler
Parkinson Hastalığının Tek Taraflı 6-OHDA-Lezyonlu Sıçan Modelinde L-DOPA-İndüklenen Diskinezilerin Değerlendirilmesi
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Bariotto-dos-Santos, K., Ribeiro, D. … More

Bariotto-dos-Santos, K., Ribeiro, D. L., Guimarães, R. P., Padovan-Neto, F. E. Rating L-DOPA-Induced Dyskinesias in the Unilaterally 6-OHDA-Lesioned Rat Model of Parkinson's Disease. J. Vis. Exp. (176), e62924, doi:10.3791/62924 (2021).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter